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尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素Ⅲ的荧光光谱 被引量：6
1
作者 陈真龙 赵大庆 +3 位作者 刘清亮 丁兰 张祖德 倪嘉缵 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第2期185-190,共6页
皖南尖吻蝮蛇蛇毒经分离和纯化得到出血毒素Ⅲ（ＡａＨⅢ），质谱测定分子量为２３，２８４．４±０．１。实验表明，Ｔｒｐ残基较大程度位于ＡａＨⅢ分子的疏水区。十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）和盐酸胍的加入使ＡａＨⅢ的分子构象发... 皖南尖吻蝮蛇蛇毒经分离和纯化得到出血毒素Ⅲ（ＡａＨⅢ），质谱测定分子量为２３，２８４．４±０．１。实验表明，Ｔｒｐ残基较大程度位于ＡａＨⅢ分子的疏水区。十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）和盐酸胍的加入使ＡａＨⅢ的分子构象发生变化，导致分子内色氨酸（Ｔｒｐ）残基的荧光淬灭。盐酸胍的加入使Ｔｒｐ残基的荧光发射峰位明显红移，表明位于ＡａＨⅢ分子较疏水环境的Ｔｒｐ残基相对外露。我们还就酸度、ＥＤＴＡ和金属离子对ＡａＨⅢ分子内Ｔｒｐ残基荧光光谱的影响进行了研究和讨论。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇 出血毒素Ⅲ 荧光光谱 蛇毒
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尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素DaHT-3的纯化与性质 被引量：4
2
作者 叶文娟 冉永禄 +3 位作者 赖仞 龚光林 俞帆 曾昭权 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第5期762-767,共6页
被尖吻蝮蛇咬伤会引起严重的出血,对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物的筛选.通过SephadexG-75,DEAE-SephadexA-50,SephadexG-200和两次PBE聚焦层析,从尖吻蝮蛇(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化到一个分子量为56000的出血毒... 被尖吻蝮蛇咬伤会引起严重的出血,对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物的筛选.通过SephadexG-75,DEAE-SephadexA-50,SephadexG-200和两次PBE聚焦层析,从尖吻蝮蛇(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化到一个分子量为56000的出血毒素(DaHT-3),经氨基酸组成测定计算,由487个氨基酸残基组成.此成分在SDS-PAGE上显示出一条均一的蛋白染色带,用等电聚焦电泳测定,其pI为5.50.该出血成分的最小出血剂量是2.6μg,具有蛋白水解酶活力,其活力为3.68,但没有精氨酸酯酶和磷脂酶A2活力.用红外光谱仪研究DaHT-3在溶液中酰胺I带的吸收谱,该毒素含有31.8%的α螺旋、56.1%的β折叠和12.1%的转角;当加入EDTA螯合剂去除金属离子后,它们的α螺旋、β折叠、转角和无规卷曲分别变为11%、26.4%、46.2%和16.5%,而出血活力和蛋白水解酶活力均丧失。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇毒 出血毒素 理化性质 纯化 金属蛋白酶
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湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质 被引量：6
3
作者 陶勇 冉永禄 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期189-194,共6页
经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤，ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５离子交换层析的步骤，从湖南产尖吻蝮（Ｄｉｅｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）蛇毒中纯化出两个出血毒素（ＤａＨＴ－... 经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤，ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５离子交换层析的步骤，从湖南产尖吻蝮（Ｄｉｅｎａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）蛇毒中纯化出两个出血毒素（ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量均为２３．５ｋＤ，ＩＥＦ－ＰＡＧＥ测得等电点分别为５．６和５．２，两者具有相似的氨基酸组成，其中酸性氨基酸（Ａｓｘ，Ｇｌｘ）分别占２３％和２４％，ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最小出血剂量（ＭＨＤ）分别为０．５μｇ和０．８μｇ。都具蛋白水解酶活性，无对ＴＡＭＥ，ＢＡＥＥ的水解活性和ＰＬＡ２酶活性．两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关．ＤａＨＴ－１和ＤａＨＴ－２的最适温度分别为３５℃和４０℃，最适ｐＨ为６－９，对热均不稳定，温度高于６０℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含０．５ｍｏｌ的Ｚｎ，１ｍｏｌ的Ｃａ，较多的Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ，不含Ｃｏ。 展开更多
关键词 尖吻蝮 蛇毒 出血毒素 理化性质 提纯
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皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅳ的纯化与初步鉴定 被引量：2
4
作者 朱中良 龚为民 +1 位作者 牛立文 滕脉坤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第3期357-359,共3页
从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳... 从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为４４ｋＤ，等电点为ｐＨ５．０．从５００ｍｇ粗毒中可获得２０ｍｇＡａＨⅣ纯品．ＡａＨⅣ有较强的出血活性，最小出血剂量（ＭＨＤ）为０．４μｇ． 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇 蛇类 出血毒素 蛇毒蛋白 提纯 鉴定
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湖南尖吻蝮蛇毒出血毒素的圆二色性和化学修饰 被引量：4
5
作者 陶勇 冉永禄 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期195-200,共6页
用远紫外ＣＤ谱研究了湖南产尖吻蝮蛇毒的两个出血毒素（ＤａＨＴ－１、ＤａＨＴ－２）的溶液构象，计算得ＤａＨＴ－１的α螺旋、β折叠、无规卷曲的含量分别为３６．９％、３５．５％、２７．６％；ＤａＨＴ－２的α螺旋、β折叠、无... 用远紫外ＣＤ谱研究了湖南产尖吻蝮蛇毒的两个出血毒素（ＤａＨＴ－１、ＤａＨＴ－２）的溶液构象，计算得ＤａＨＴ－１的α螺旋、β折叠、无规卷曲的含量分别为３６．９％、３５．５％、２７．６％；ＤａＨＴ－２的α螺旋、β折叠、无规卷曲分别为２３．４％、３１．３％、４５．３％。随ｐＨ的增大或减小，峰位蓝移，酸性条件下的变化比碱性条件下的变化大。构象单元含量计算表明：α螺旋减少，无规卷曲增多，β折叠基本未变。温度和ｐＨ对ＣＤ谱的影响相似，５０℃时峰位蓝移，α螺旋减少，无规卷曲增多．ＥＤＴＡ对ＣＤ谱影响显著，０．０２ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ便导致两个出血毒素呈极度的无序状态。ＥＤＴＡ完全抑制，半胱氨酸部分抑制，胰蛋白酶不影响它们的出血活性。 展开更多
关键词 尖吻蝮 蛇毒 出血毒素 圆二色性 化学修饰
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在制备尖吻蝮蛇毒出血毒素抗血清中不同凝胶染色方法的比较 被引量：1
6
作者 韦传宝 曹佳敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1793-1796,共4页
目的:寻找在制备出血毒素抗血清中电泳后染色凝胶的好方法。方法:按照前人的方法从皖南产尖吻蝮蛇毒中初步分离3种出血毒素:Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ并获得3种粗提取的出血毒素,用制备电泳的方法进一步纯化Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ,对每... 目的:寻找在制备出血毒素抗血清中电泳后染色凝胶的好方法。方法:按照前人的方法从皖南产尖吻蝮蛇毒中初步分离3种出血毒素:Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ并获得3种粗提取的出血毒素,用制备电泳的方法进一步纯化Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ,对每种出血毒素,配制6块制备电泳板并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用6种不同的染色方法分别染色,将含出血毒素的凝胶切下,磨细后直接免疫注射小鼠并获得抗血清,用ELISA检测和中和出血毒素出血活性两种方法检测抗血清的质量。结果:不同染色方法制备的抗血清中有效Ig G浓度不同,用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色制备的抗血清有效Ig G浓度最高。结论:用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色是制备抗血清最好的染色方法。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇 出血毒素 抗血清制备 染色法 质量检测
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尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ三维荧光光谱研究
7
作者 陈真龙 刘清亮 +2 位作者 张祖德 王守业 余华明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期507-509,共3页
蛇毒中含有多种金属蛋白质，它们具有不同的生物学活性，如抗凝血因子（ＡＣＦ）、糖苷水解酶（ＮＡＤａｓｅ）、纤溶组分（ＦＰ）及出血毒素等，它们的许多生物活性、荧光光谱和结构的性质等方面的研究已见报道［１］．徐洵等［２］从... 蛇毒中含有多种金属蛋白质，它们具有不同的生物学活性，如抗凝血因子（ＡＣＦ）、糖苷水解酶（ＮＡＤａｓｅ）、纤溶组分（ＦＰ）及出血毒素等，它们的许多生物活性、荧光光谱和结构的性质等方面的研究已见报道［１］．徐洵等［２］从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离出３种出血毒... 展开更多
关键词 蛇毒 尖吻蝮蛇 出血毒素Ⅲ 荧光光谱
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皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅰ氨基酸序列初步研究 被引量：2
8
作者 龚为民 朱中良 +3 位作者 牛立文 腾脉坤 王淳 沈为群 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期366-368,共3页
中国皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒出血毒素Ｉ（ＡａＨＩ）氨基酸序列得到初步测定．ＡａＨＩ的Ｎ端１３个残基序列为ＳＴＥＦＱＲＹＭＥＩＶＩＶ．序列比较表明ＡａＨＩ与其它种属来源的低分子量（２０～２４... 中国皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒出血毒素Ｉ（ＡａＨＩ）氨基酸序列得到初步测定．ＡａＨＩ的Ｎ端１３个残基序列为ＳＴＥＦＱＲＹＭＥＩＶＩＶ．序列比较表明ＡａＨＩ与其它种属来源的低分子量（２０～２４ｋＤ）蛇毒出血毒素和金属蛋白酶有较高的同源性． 展开更多
关键词 出血毒素 蛇毒金属蛋白酶 氨基酸序列 尖吻蝮蛇
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皖南尖吻蝮蛇毒中类去整合蛋白/富含半胱氨酸两结构域cDNA的克隆和表达 被引量：1
9
作者 刘庆都 张家琳 +2 位作者 承新 刘爱平 刘兢 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期462-467,共6页
为了探讨出血毒金属蛋白酶结构功能关系 ,通过 RT- PCR方法 ,从皖南尖吻蝮蛇( Agkistrodon acutus)毒腺总 RNA中扩增得到编码 P- 型出血毒金属蛋白酶的完整类去整合蛋白和富含半胱氨酸两个结构域 c DNA( AA/DC) .它全长 964bp的 c DNA... 为了探讨出血毒金属蛋白酶结构功能关系 ,通过 RT- PCR方法 ,从皖南尖吻蝮蛇( Agkistrodon acutus)毒腺总 RNA中扩增得到编码 P- 型出血毒金属蛋白酶的完整类去整合蛋白和富含半胱氨酸两个结构域 c DNA( AA/DC) .它全长 964bp的 c DNA,开放阅读框架编码 2 1 6个氨基酸残基 ,序列比较分析表明它同来自 Bothrops jararaca的 jararhagin- C、来自 Crotalus atrox的 catrocollastatin- C有很高的同源性 .在类去整合蛋白结构域中 ,Ser- Glu- Cys- Asp( SECD)代替了去整合蛋白中相应部位的 Arg- Gly- Asp( RGD)三肽序列 .将编码区基因克隆入 p GEX- 2 T载体中 ,转化大肠杆菌 TG- 1 ,用 IPTG诱导表达 ,表达产物具有抑制胶原诱导的血小板凝集活性 ,但不抑制ADP诱导的血小板凝集 .该研究为进一步阐述蛇毒金属蛋白酶结构功能关系和药物开发奠定了基础 . 展开更多
关键词 蛇出血毒素 类去整合蛋白 半胱氨酸 基因克隆
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基于蛇毒提取物的超级止血粘合剂的发现
10
作者 胡乃华(编译) 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第9期1557-1557,共1页
蛇毒可以伤人,也可以救人。它的主要毒性(活性)成分是蛋白质,根据作用部位及原理不同一般分为神经毒素、心脏毒素、凝血毒素、出血毒素等。研究人员分离和研究了多种毒蛇的毒液,目前基于蛇毒毒素也开发出了多种抗癌、镇痛、抗血栓的药物。
关键词 作用部位 出血毒素 心脏毒素 神经毒素 蛇毒 抗血栓 粘合剂 提取物
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