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沙糖橘几丁质酶基因orange1.1t05124的克隆及原核表达
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作者 胡亚平 陈聪 +4 位作者 吉前华 郭雁君 郭丽英 蒋惠 杨凤梅 《中国南方果树》 北大核心 2025年第1期9-15,共7页
柑橘几丁质酶作为一种重要的抗真菌蛋白,可以降解真菌细胞壁中的几丁质。利用沙糖橘的cDNA文库克隆了沙糖橘几丁质酶基因orange1.1t05124。该基因位于第8染色体末端,包含3个外显子。将该基因克隆到pEASY-Blunt E1载体中,测序验证序列无... 柑橘几丁质酶作为一种重要的抗真菌蛋白,可以降解真菌细胞壁中的几丁质。利用沙糖橘的cDNA文库克隆了沙糖橘几丁质酶基因orange1.1t05124。该基因位于第8染色体末端,包含3个外显子。将该基因克隆到pEASY-Blunt E1载体中,测序验证序列无误,随后转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导生成了目的蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE电泳)验证成功表达,在产物的包涵体中纯化到了目标蛋白。通过生物信息学分析发现,该蛋白具有信号肽,定位在细胞外,是单体的球状蛋白质。通过进化树分析发现,该几丁质酶在植物中广泛存在同源蛋白质,且都含有GH19几丁质酶催化结构域。对柑橘几丁质酶基因进行克隆和表达,可为了解该基因家族的抗病机理和开发基于几丁质酶的新型生物农药、生物肥料提供基因资源。 展开更多
关键词 沙糖橘 几丁质基因 原核表达 抗真菌蛋白质
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猕猴桃几丁质酶基因家族的鉴定和表达特征分析
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作者 刘晓驰 路喻丹 +4 位作者 冯新 高敏霞 赖瑞联 陈桂信 陈义挺 《热带亚热带植物学报》 北大核心 2025年第1期1-14,共14页
为探究几丁质酶基因家族(CHis)的特征和功能,从猕猴桃(Actinidia chinensis)中鉴定得到18个AcCHis基因。系统进化分析表明它们分别聚在GH18和GH19分支,可分为6小组,组内各成员间的保守结构域、基因结构、蛋白质结构具有较高的相似性。Ac... 为探究几丁质酶基因家族(CHis)的特征和功能,从猕猴桃(Actinidia chinensis)中鉴定得到18个AcCHis基因。系统进化分析表明它们分别聚在GH18和GH19分支,可分为6小组,组内各成员间的保守结构域、基因结构、蛋白质结构具有较高的相似性。AcCHis基因启动子区域的顺式作用元件主要涉及激素响应、非生物胁迫应答和生长发育调控。18个AcCHis基因不均匀分布在12条染色体上,其中有5个基因发生了片段重复。AcCHis的表达可能受到miR172、miR408调控。AcCHis中,GH18与GH19成员在不同组织(成熟果、幼果、叶、茎、花)中的转录差异明显。在猕猴桃果实贮藏过程中,90.9%的GH18成员不表达或表达量较低;而71.4%的GH19成员呈现差异表达,其中猕猴桃果实中AcCHi8在25℃贮藏1周和4℃贮藏1~3周均上调表达,以4℃贮藏3周的表达量最大(为对照的188倍),而果实浸泡ABA后在25℃贮藏1周的表达下调,推测AcCHis基因可能参与采后果实贮藏软化过程。 展开更多
关键词 几丁质 猕猴桃 基因鉴定 基因表达
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白三叶几丁质酶基因家族鉴定及TrChit3功能分析
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作者 秦晓芳 何芷睿 +4 位作者 贾彤 杨玉娇 付薇 李航 彭燕 《草业学报》 北大核心 2025年第10期187-201,共15页
几丁质酶是一种糖苷水解酶,在植物生长发育过程中发挥着重要作用。目前几丁质酶在白三叶应答各种生物和非生物胁迫的相关研究报道相对较少。本研究对白三叶的几丁质酶基因家族进行了全基因组鉴定,得到了44个几丁质酶基因,不均匀分布于... 几丁质酶是一种糖苷水解酶,在植物生长发育过程中发挥着重要作用。目前几丁质酶在白三叶应答各种生物和非生物胁迫的相关研究报道相对较少。本研究对白三叶的几丁质酶基因家族进行了全基因组鉴定,得到了44个几丁质酶基因,不均匀分布于白三叶16条染色体上,通过系统进化分析将这些几丁质酶分为GH18和GH19分支,5个不同的小组:I~V。其中29个基因属于GH18亚家族,15个基因属于GH19亚家族,且同一亚族基因具有相似的结构和功能,启动子分析发现,这44个几丁质酶基因的启动子区域包含与生长发育、激素及逆境胁迫相关的多种顺式作用元件,此外,qRT-PCR分析显示,盐胁迫和干旱胁迫处理显著诱导了几丁质酶基因的表达,进一步验证了其在植物胁迫响应中的作用。选择TrChit3基因深入研究几丁质酶基因的抗旱能力。在拟南芥中过表达TrChit3基因并进行干旱胁迫处理,测定相对电导率、丙二醛等生理指标,结果显示在干旱条件下过表达TrChit3基因能够显著提高拟南芥的耐旱能力。研究结果为植物中几丁质酶基因的探索奠定了基础。 展开更多
关键词 白三叶 几丁质 基因家族 表达分析
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平沙绿僵菌几丁质酶基因家族鉴定及表达模式分析
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作者 赵誉霞 刘耀辉 +3 位作者 应玥 张威 舒金平 张亚波 《林业科学研究》 北大核心 2025年第5期174-184,共11页
[目的]对平沙绿僵菌WP08的几丁质酶基因家族成员进行鉴定,解析其在不同培养条件下的表达模式,以期为深入研究平沙绿僵菌WP08几丁质酶基因的功能奠定基础。[方法]通过生物信息学对平沙绿僵菌WP08几丁质酶基因家族成员进行系统分析,利用... [目的]对平沙绿僵菌WP08的几丁质酶基因家族成员进行鉴定,解析其在不同培养条件下的表达模式,以期为深入研究平沙绿僵菌WP08几丁质酶基因的功能奠定基础。[方法]通过生物信息学对平沙绿僵菌WP08几丁质酶基因家族成员进行系统分析,利用实时荧光定量技术检测该家族成员在PPDA培养基和添加虫体粉末的诱导培养基MC中的表达模式。[结果]从平沙绿僵菌WP08基因组中鉴定出15个几丁质酶基因家族成员,编码181~1 322 aa,几乎所有成员都偏酸性,属于稳定蛋白,分布在8条染色体上,且均有内含子结构。种间共线性分析展示出平沙绿僵菌与白僵菌、蛹虫草的几丁质酶基因可能由相同祖先进化而来,系统进化分析说明平沙绿僵菌WP08几丁质酶基因家族主要包括3个亚组,其中亚组B的成员数量最多。平沙绿僵菌WP08不同亚组的几丁质酶成员在不同情况下的表达模式不同,亚组B几丁质酶基因在诱导表达培养基中呈现出高水平的表达;部分亚组A几丁质酶基因表达水平则在诱导培养基中下降。[结论]平沙绿僵菌WP08几丁质酶基因家族成员不同亚家族成员具有功能分化,其中亚组B几丁质酶成员在平沙绿僵菌侵染昆虫的过程中可能发挥了重要作用,该研究结果为后续以几丁质酶基因为靶点开发新的绿僵菌生防菌剂提供理论依据。 展开更多
关键词 平沙绿僵菌WP08 基因家族分析 几丁质 表达模式
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调控棘孢木霉几丁质酶Tachi2基因的转录因子和蛋白的互作研究
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作者 曲珊 赵月 +2 位作者 李雅华 郑桂玲 咸洪泉 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期310-319,共10页
【目的】生防菌棘孢木霉(Trichoderma asperellum)TD3104产生的几丁质酶Tachi2在植物病害防治过程中发挥重要作用,47号转录因子作用于特异响应几丁质诱导的Tachi2基因启动子顺式作用元件。探究47号转录因子与一种新调控蛋白H63的互作关... 【目的】生防菌棘孢木霉(Trichoderma asperellum)TD3104产生的几丁质酶Tachi2在植物病害防治过程中发挥重要作用,47号转录因子作用于特异响应几丁质诱导的Tachi2基因启动子顺式作用元件。探究47号转录因子与一种新调控蛋白H63的互作关系,为解析几丁质诱导调控基因转录表达机制提供科学依据。【方法】利用酵母双杂交系统对棘孢木霉几丁质酶基因Tachi2中47号转录因子的候选互作蛋白H63进行体内点对点互作鉴定;采用大肠杆菌表达系统分别对H63蛋白与47号转录因子基因进行原核诱导表达,利用亲和层析技术纯化融合蛋白,通过GST pull-down实验进行体外蛋白互作检测;利用农杆菌介导的洋葱表皮细胞亚细胞定位技术和BiFC实验进一步检测细胞内蛋白的相互作用。【结果】H63蛋白与47号转录因子在酵母细胞内存在互作关系;原核表达的重组H63蛋白、47号转录因子大小分别为36 kD和18 kD,二者在体外存在互作关系;成功构建了双分子荧光互补载体,证实H63蛋白与47号转录因子在洋葱内表皮细胞中存在相互作用,并且互作发生在细胞核内。【结论】证实H63蛋白与47号转录因子在细胞内外均存在相互作用,为解析真菌几丁质酶基因的表达调控、几丁质酶在农业和生物医药领域的开发利用奠定理论基础。 展开更多
关键词 棘孢木霉 几丁质 转录因子 基因表达 互作蛋白 酵母双杂交 GSTPull-down 双分子荧光互补
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砂糖橘几丁质酶基因Cs9g18700.1的克隆和原核表达
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作者 胡亚平 陈聪 +3 位作者 吉前华 郭雁君 蒋惠 郭丽英 《中国果树》 2025年第6期54-62,共9页
几丁质酶是植物重要的抗真菌病基因,在生长发育、抗逆境、共生固氮等过程中发挥作用。通过PCR从砂糖橘cDNA文库中扩增到了Cs9g18700.1基因的全长cDNA序列,它是柑橘32个几丁质酶基因家族中的一员,定位在第9染色体,有信号肽指导其分泌到... 几丁质酶是植物重要的抗真菌病基因,在生长发育、抗逆境、共生固氮等过程中发挥作用。通过PCR从砂糖橘cDNA文库中扩增到了Cs9g18700.1基因的全长cDNA序列,它是柑橘32个几丁质酶基因家族中的一员,定位在第9染色体,有信号肽指导其分泌到细胞外,是单体的球状蛋白质。经过测序验证序列无误后,将该基因克隆到表达载体pEASY-Blunt E1中,转入大肠杆菌BL21菌株,用IPTG诱导Cs9g18700.1基因成功表达。为揭示该基因的抗病机理和提高柑橘抗病能力奠定了基础,也为基于几丁质酶降解物的生物肥料、食品、医药的开发提供了基因资源。 展开更多
关键词 砂糖橘 几丁质 基因克隆 诱导表达
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芥蓝几丁质酶基因家族对环境信号的响应分析
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作者 曾语 吴卉芳 +4 位作者 邱昱岑 于雪晴 朱俊杰 谢炳峰 吕美玲 《热带作物学报》 北大核心 2025年第10期2355-2363,共9页
几丁质酶与植物的逆境抗性和生长发育密切相关。为了揭示植物激素及环境胁迫对芥蓝几丁质酶基因表达的影响,本研究使用水杨酸(SA)、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)、茉莉酸甲酯(MeJA)等3种植物激素,以及胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium ca... 几丁质酶与植物的逆境抗性和生长发育密切相关。为了揭示植物激素及环境胁迫对芥蓝几丁质酶基因表达的影响,本研究使用水杨酸(SA)、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)、茉莉酸甲酯(MeJA)等3种植物激素,以及胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum subsp.Brasiliense)、高温等2种胁迫分别对白花芥蓝(Brassica oleracea cv.BaiHua)植株进行处理,并采用qRT-PCR方法分析芥蓝几丁质酶基因家族成员的转录水平。结果表明:在芥蓝的几丁质酶基因家族中,18个基因能响应植物激素的诱导表达,16个基因能够被软腐菌显著诱导表达,8个基因对高温胁迫有响应。该研究表明芥蓝相关几丁质酶基因能够响应激素信号和环境胁迫,可能在抗逆境和生长发育中发挥相应功能,该结果可为芥蓝等作物分子育种研究提供参考依据。 展开更多
关键词 芥蓝 几丁质基因 植物激素 抗逆机理 QRT-PCR
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木薯Ⅴ型几丁质酶MeCHITV基因生物信息学分析及其表达载体构建
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作者 刘沁雲 向春瑜 蔡杰 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期289-298,共10页
【目的】研究木薯Ⅴ型几丁质酶基因MeCHITV,以为后续阐明其在共生中的功能奠定基础,并为木薯高效栽培与养分利用提供理论依据。【方法】通过RT-PCR技术成功克隆了SC8木薯中的Ⅴ型几丁质酶基因MeCHITV,并采用生物信息学方法对其蛋白结构... 【目的】研究木薯Ⅴ型几丁质酶基因MeCHITV,以为后续阐明其在共生中的功能奠定基础,并为木薯高效栽培与养分利用提供理论依据。【方法】通过RT-PCR技术成功克隆了SC8木薯中的Ⅴ型几丁质酶基因MeCHITV,并采用生物信息学方法对其蛋白结构、组织特异性表达模式和遗传进化关系进行了全面分析。构建了MeCHITV基因的原核表达载体、过表达载体和基因编辑载体。【结果】MeCHITV基因的编码序列(CDS)全长1137 bp,编码378个氨基酸。MeCHITV蛋白的分子质量为42.09 ku,等电点为6.92,不稳定系数为33.97,是稳定蛋白且具有亲水性。其N端含有一个由21个氨基酸组成的信号肽序列。二级结构由33.33%的α螺旋、4.76%的β折叠、41.01%无规则卷曲和20.90%延伸链构成。与截形苜蓿Ⅴ型几丁质酶MtNFH1的同源性最高,亲缘关系最近。MeCHITV基因在木薯须根中表达量最高。此外,成功构建了原核表达载体pET28a-MeCHIV、过表达载体pCAMBIA1300-35S-MeCHITV和基因编辑载体pYAO:hSpCas9-MeCHITV,并分别成功转化至原核表达菌株Rossetta(DE3)和根癌农杆菌LBA4404。【结论】根据MeCHITV基因在须根中的高表达及对其所编码蛋白的结构,推断MeCHITV在根际发挥功能。结合同源性蛋白功能的分析,推测MeCHITV参与了木薯与丛枝菌根真菌(AMF)共生信号的调控。 展开更多
关键词 木薯 丛枝菌根真菌 Ⅴ型几丁质 MeCHITV 表达载体 基因编辑
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粘质沙雷氏菌几丁质酶(ChiC)基因克隆及其生物信息学分析 被引量:12
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作者 魏巍 贺淹才 +1 位作者 方柏山 刘爱花 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期444-448,共5页
从粘质沙雷氏菌(Serratia marcescensATCC14041)中克隆出几丁质酶基因(ChiC),将回收纯化的PCR产物与载体pMD18-T连接,构建成的重组质粒命名为pMD-Ch iC,将重组质粒转化到受体E.coliDH5α中进行克隆,经BamHI和NheI双酶切验证、核酸序列... 从粘质沙雷氏菌(Serratia marcescensATCC14041)中克隆出几丁质酶基因(ChiC),将回收纯化的PCR产物与载体pMD18-T连接,构建成的重组质粒命名为pMD-Ch iC,将重组质粒转化到受体E.coliDH5α中进行克隆,经BamHI和NheI双酶切验证、核酸序列测定证实,重组质粒pMD-Ch iC含有几丁质酶C基因(ChiC)。利用生物信息学的方法,推测该粘质沙雷氏菌ChiC基因编码的蛋白质由480个氨基酸组成。预测该蛋白的等电点为5.63,分子量约为52kD。针对粘质沙雷氏菌中的几个几丁质酶基因做了进化树,进而验证了粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)几丁质酶(ChiC)在沙雷氏菌几丁质酶中的分类;同时对粘质沙雷氏菌几丁质酶C(ChiC)蛋白的高级结构作出了预测,得到其编码的属于18家族的蛋白质高级结构图谱。 展开更多
关键词 几丁质酶chic基因 粘质沙雷氏菌 基因克隆 生物信息学分析
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野生大豆与栽培大豆几丁质酶基因鉴定及其表达分析 被引量:1
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作者 张华 李娜 +3 位作者 邢馨竹 邵振启 李喜焕 张彩英 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1573-1588,共16页
几丁质酶是以几丁质等为底物的糖基水解酶(GH,glycosyl hydrolases),在植物生长发育及抵御逆境中发挥重要功能。然而,大豆几丁质酶基因的组织表达模式及对逆境的响应尚不清楚,影响了其在遗传改良中的应用。本研究分别鉴定野生大豆与栽... 几丁质酶是以几丁质等为底物的糖基水解酶(GH,glycosyl hydrolases),在植物生长发育及抵御逆境中发挥重要功能。然而,大豆几丁质酶基因的组织表达模式及对逆境的响应尚不清楚,影响了其在遗传改良中的应用。本研究分别鉴定野生大豆与栽培大豆几丁质酶基因,并分析其表达模式。结果发现,野生大豆与栽培大豆分别含62个和55个几丁质酶基因,位于17条和18条染色体上;进化树分析发现,117个基因分为5类,其中类群Ⅲ与类群Ⅴ属于GH18亚家族,类群Ⅰ、类群Ⅱ与类群Ⅳ属于GH19亚家族;启动子分析发现,几丁质酶家族成员包含响应激素及逆境胁迫顺式作用元件。栽培大豆几丁质酶基因表达分析发现,其在不同组织及抗病耐逆等过程差异表达,其中Gm.01G142400和Gm.13G346700等在接种花叶病毒的抗病品种叶片中诱导表达,Gm.03G254300和Gm.20G164600等在低磷胁迫的磷高效品种根系中诱导表达,Gm.08G259200和Gm.19G245400等在低磷胁迫根瘤中诱导表达;野生大豆几丁质酶基因表达分析发现,其在不同组织及耐盐过程差异表达,其中Gs.02G002604和Gs.02G002940等在盐胁迫耐盐品种叶片中诱导表达。以上结果为挖掘利用几丁质酶基因奠定了基础。 展开更多
关键词 几丁质 野生大豆 栽培大豆 基因家族 表达模式
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向大豆导入几丁质酶基因的初步研究 被引量:44
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作者 徐香玲 邹联沛 +1 位作者 刘伟华 李集临 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期101-107,共7页
以根癌农杆菌的Ti质粒为介导,将抗真菌病的几丁质酶基因,导入黑龙江省栽培大豆-东农37号,吉林28号等14个品种。从子叶节和下胚轴诱导出丛生芽,并再生植株,经PCR和DNA分子杂交检测,确认为转化植株。用花粉管通道导... 以根癌农杆菌的Ti质粒为介导,将抗真菌病的几丁质酶基因,导入黑龙江省栽培大豆-东农37号,吉林28号等14个品种。从子叶节和下胚轴诱导出丛生芽,并再生植株,经PCR和DNA分子杂交检测,确认为转化植株。用花粉管通道导入法,直接导入几丁质酶基因,共获223粒种子,经PCR和DNA分子杂交检测的113株大豆幼苗中,有7株呈阳性反应,证明几丁质酶基因已导入并整合到大豆的基因组中。 展开更多
关键词 几丁质基因 基因植株 大豆 基因
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转几丁质酶基因(RC24)水稻中大2号抗纹枯病特性研究 被引量:21
12
作者 袁红旭 许新萍 +2 位作者 张建中 郭建夫 李宝健 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期39-42,共4页
导入外源几丁质酶基因“RC2 4”的水稻中大 2号接种纹枯病菌的结果表明 ,接种病菌后病斑扩展速率和田间病情指数小 ,表现为对水稻纹枯病高抗。组织病理学研究表明纹枯病菌能侵入中大 2号 ,并引发纹枯病 ,入侵时间和症状出现的时间与非... 导入外源几丁质酶基因“RC2 4”的水稻中大 2号接种纹枯病菌的结果表明 ,接种病菌后病斑扩展速率和田间病情指数小 ,表现为对水稻纹枯病高抗。组织病理学研究表明纹枯病菌能侵入中大 2号 ,并引发纹枯病 ,入侵时间和症状出现的时间与非转基因感病对照没有显著差异 ,但病菌菌丝体消解现象出现早于对照 ,其抗病性主要表现为限制病菌扩展。以中大 2号与非转基因水稻材料配制的杂交组合的抗病性表明 ,杂交组合的抗病性均高于非转基因亲本 ,但其抗病性也会因母本的不同而有所变化。 展开更多
关键词 基因水稻 几丁质基因 纹枯病 抗病性
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转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶双价基因小麦的获得和鉴定 被引量:39
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作者 叶兴国 程红梅 +3 位作者 徐惠君 杜丽璞 陆维忠 黄益洪 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期583-586,共4页
利用农杆菌介导法将几丁质酶基因和β1,3 葡聚糖酶双价基因导入小麦品种扬麦10号和Bobwhite ,共得到了13株T0 代转基因植株,2个小麦品种的转化效率分别为1 .4 %和1. 0 %。T1 代植株赤霉病抗性鉴定结果表明,转基因植株对赤霉病具有一定抗... 利用农杆菌介导法将几丁质酶基因和β1,3 葡聚糖酶双价基因导入小麦品种扬麦10号和Bobwhite ,共得到了13株T0 代转基因植株,2个小麦品种的转化效率分别为1 .4 %和1. 0 %。T1 代植株赤霉病抗性鉴定结果表明,转基因植株对赤霉病具有一定抗性,小穗发病率4 .76 %~11. 76 % ,低于抗病对照和感病对照。T1 代植株分子检测结果表明,外源基因分离比例为2. 33∶1,较低的分离比例可能与外源基因的丢失有关。 展开更多
关键词 小麦 几丁质和β-1 3-葡聚糖基因 农杆菌 基因 赤霉病
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转几丁质酶-葡聚糖酶基因水稻稻瘟病抗谱分析 被引量:16
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作者 许明辉 李成云 +5 位作者 李进斌 谭学林 田颖川 陈正华 唐祚舜 田文忠 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期307-310,共4页
用来源于云南各地属于 2 4个稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)生理小种的 3 3个菌株 ,对受体品种南 2 9及其 4个转几丁质酶 β 1,3 葡聚糖酶串联基因水稻T5 代品系进行了温室接种鉴定。结果表明 ,不能侵染受体品种南 2 9的 13个菌株也不... 用来源于云南各地属于 2 4个稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)生理小种的 3 3个菌株 ,对受体品种南 2 9及其 4个转几丁质酶 β 1,3 葡聚糖酶串联基因水稻T5 代品系进行了温室接种鉴定。结果表明 ,不能侵染受体品种南 2 9的 13个菌株也不能侵染转基因品系 ,可侵染受体品种南 2 9的 2 0个菌株一般不能侵染转基因品系 ,转基因水稻对稻瘟病菌抗性范围较受体对照扩大 ,证明转几丁质酶 葡聚糖酶基因水稻对稻瘟病具有一定的广谱抗性 ;诱发条件下 ,转基因品系大田叶瘟病情指数为 0~ 1级 ,穗瘟发病率为 0 .3 %~ 10 .2 3 % ,抗性较受体对照大幅度提高 ,表明这些品系在稻瘟病抗病育种中是有应用潜力的。 展开更多
关键词 几丁质-葡聚糖基因 水稻 稻瘟病 抗谱 基因
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基因枪法向小麦导入几丁质酶基因的研究 被引量:14
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作者 刘伟华 李文雄 +4 位作者 胡尚连 徐香玲 李集临 陈正华 胡赞民 《西北植物学报》 CAS CSCD 2003年第1期54-59,共6页
利用基因枪法,以菜豆几丁质酶基因转化小麦幼胚愈伤组织。在轰击压力1300psi,轰击距离6cm、100μg金粉/枪和轰击距离9cm、150μg金粉/枪的2种处理条件下,获得4株春小麦东农7742转化植株,转化频率分别为0.36%和0.56%。经PCR和PCR-Souther... 利用基因枪法,以菜豆几丁质酶基因转化小麦幼胚愈伤组织。在轰击压力1300psi,轰击距离6cm、100μg金粉/枪和轰击距离9cm、150μg金粉/枪的2种处理条件下,获得4株春小麦东农7742转化植株,转化频率分别为0.36%和0.56%。经PCR和PCR-Southern杂交分析,证实菜豆几丁质酶基因已整合到T0和T1小麦基因组中。采用氨基葡萄糖法测定几丁质酶活力,结果表明,转基因小麦的几丁质酶活力明显高于对照株;转基因植株对白粉病症状减缓,并获得一株赤霉菌接种未扩展的转基因T1植株。 展开更多
关键词 基因枪法 小麦 几丁质基因 转化 抗真菌病
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农杆菌介导西瓜转葡聚糖酶及几丁质酶双基因 被引量:13
16
作者 张明方 于天祥 +2 位作者 杨景华 毛碧增 何祖华 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期475-478,i0002,共5页
采用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将含有葡聚糖酶基因和几丁质酶基因表达载体遗传转化西瓜(Citrulluslanatus),遗传转化体系为以子叶为外植体经过组织培养获得再生植株。结果表明,Kan抗性芽的分化率随着共培养时间的延... 采用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将含有葡聚糖酶基因和几丁质酶基因表达载体遗传转化西瓜(Citrulluslanatus),遗传转化体系为以子叶为外植体经过组织培养获得再生植株。结果表明,Kan抗性芽的分化率随着共培养时间的延长先上升后下降,GUS阳性芽的百分率逐渐升高,共培养时间30h后,GUS阳性芽的百分率趋于平稳,同时,通过对候选转基因植株中GUS基因染色鉴定、卡那基因、葡聚糖酶基因及几丁质酶基因特异引物PCR检测,表明葡聚糖酶和几丁质酶基因已成功导入西瓜植株中,转基因植株的表现在进一步研究中。 展开更多
关键词 西瓜 葡聚糖基因 几丁质基因 基因
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转几丁质酶和葡聚糖酶双价基因棉花株系对黄萎病的抗性 被引量:13
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作者 朱荷琴 冯自力 +3 位作者 李志芳 赵丽红 师勇强 尹志新 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期58-63,共6页
采用人工病圃、重病田及苗期室内鉴定相结合的方法,研究了转双价(Chi+Glu)基因的棉花株系61217-1对棉花黄萎病的抗性。结果表明,转基因棉花株系61217-1在人工病圃连续3年达抗病水平,病指极显著低于其受体中棉所24。2009年该转基因株系... 采用人工病圃、重病田及苗期室内鉴定相结合的方法,研究了转双价(Chi+Glu)基因的棉花株系61217-1对棉花黄萎病的抗性。结果表明,转基因棉花株系61217-1在人工病圃连续3年达抗病水平,病指极显著低于其受体中棉所24。2009年该转基因株系在河南安阳、江苏大丰及新疆石河子棉花黄萎病重病田的病指分别为18.7、18.1和16.7,均极显著低于受体中棉所24的病指。该转基因株系对来自河北、湖北、新疆的3个强致病力落叶型菌株均达抗病水平,病指分别为16.4、16.8和15.6,也极显著低于受体中棉所24的病指。表明转双价(Chi+Glu)基因的棉花株系61217-1具有优异稳定的抗黄萎病性。 展开更多
关键词 基因棉花 黄萎病 几丁质基因 葡聚糖基因
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香蕉一个Ⅲ类酸性几丁质酶基因与果实成熟关系的研究(英文) 被引量:9
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作者 刘菊华 徐碧玉 +2 位作者 张建斌 贾彩红 金志强 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期2022-2027,共6页
为了解Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)与香蕉果实采后成熟过程的相互关系,对经乙烯和1-甲基环丙烯(1-MCP)处理的巴西香蕉果实采后乙烯释放量、Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)表达以及几丁质酶活性进行了测定。结果显示:(1)乙烯催熟处理的... 为了解Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)与香蕉果实采后成熟过程的相互关系,对经乙烯和1-甲基环丙烯(1-MCP)处理的巴西香蕉果实采后乙烯释放量、Ⅲ类酸性几丁质酶基因(MaCHⅢ)表达以及几丁质酶活性进行了测定。结果显示:(1)乙烯催熟处理的香蕉果实,乙烯释放量比对照处理的果实提前15 d达到高峰;1-MCP处理的香蕉果实,乙烯生物合成和果实成熟明显受到了抑制。(2)外源乙烯加速了MaCHⅢ基因的下调表达和Ⅲ类酸性几丁质酶活性的下降,MaCHⅢ表达量和Ⅲ类酸性几丁质酶活性分别在采后第3天和第4天下降到最小值。(3)1-MCP处理使MaCHⅢ基因呈现上调表达,Ⅲ类酸性几丁质酶活性上升,MaCHⅢ基因表达量和Ⅲ类酸性几丁质酶活性分别在采后18 d和25 d达到高峰。研究表明,MaCHⅢ基因可能与香蕉果实采后成熟呈负相关。 展开更多
关键词 香蕉 Ⅲ类酸性几丁质 基因表达 活性 果实成熟
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细菌几丁质酶基因转化番茄的研究 被引量:10
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作者 任春梅 高必达 +2 位作者 张学文 何迎春 苏建明 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期298-301,共4页
为了获得抗真菌病的番茄材料 ,采用农杆菌介导法将细菌几丁质酶基因转化番茄子叶 ,获得了抗卡那霉素的转化植株 ,PCR检测初步证明细菌几丁质酶基因已整合到番茄的基因组 .同时对番茄耐 Kan水平、转化受体的预培养以及共培后洗涤抑菌进... 为了获得抗真菌病的番茄材料 ,采用农杆菌介导法将细菌几丁质酶基因转化番茄子叶 ,获得了抗卡那霉素的转化植株 ,PCR检测初步证明细菌几丁质酶基因已整合到番茄的基因组 .同时对番茄耐 Kan水平、转化受体的预培养以及共培后洗涤抑菌进行了研究 .结果表明 :卡那霉素质量浓度为 5 0 m g/ L 时就能完全抑制番茄子叶再生 ;共培后直接用抑菌剂洗涤的抑菌效果较好 ;番茄子叶预培养 展开更多
关键词 细菌 几丁质 基因转化 番茄 农杆菌介导法
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转番茄几丁质酶基因西瓜植株的获得及其抗病性研究 被引量:13
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作者 张志忠 吴菁华 +1 位作者 吕柳新 何承坤 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1943-1946,共4页
构建了以C aM V 35s启动子驱动的含有番茄几丁质酶基因(Ch i3)的植物表达载体,通过冻融法导入根癌农杆菌(A g robacterium tum ef aciens)菌株EHA 105中,用叶盘法转化西瓜(C itru llus lana tus)栽培种“中育1号”,通过PCR、Sou thern b... 构建了以C aM V 35s启动子驱动的含有番茄几丁质酶基因(Ch i3)的植物表达载体,通过冻融法导入根癌农杆菌(A g robacterium tum ef aciens)菌株EHA 105中,用叶盘法转化西瓜(C itru llus lana tus)栽培种“中育1号”,通过PCR、Sou thern b lot和RT-PCR鉴定,表明外源基因已成功整合到西瓜基因组中,并获得表达。利用尖孢镰刀菌西瓜专化型进行的转基因植株叶片粗提液抑菌效果检测,表明转基因植株的抗病性均有一定程度的增强。 展开更多
关键词 番茄几丁质基因 西瓜 遗传转化 抗病性
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