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利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因
被引量：
5
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作者
李娇
杜娟
李尚伟
《山地农业生物学报》
2016年第3期10-17,62,共9页
稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一种主要的水稻害虫,几丁质合成酶是昆虫体内几丁质合成通路中的一个关键酶,在昆虫生长发育中具有重要作用,是控制害虫的理想靶标。本文采用RNA干扰(RNAi)技术,以稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因(Cm...
稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一种主要的水稻害虫,几丁质合成酶是昆虫体内几丁质合成通路中的一个关键酶,在昆虫生长发育中具有重要作用,是控制害虫的理想靶标。本文采用RNA干扰(RNAi)技术,以稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因(CmCHSA)为靶标,设计两个靶位点CmCHSA-I和CmCHSA-II,在体外分别合成其双链RNA(dsRNA),用显微注射法导入3龄幼虫体内,然后通过表型观察和荧光定量PCR(RT-q PCR)检测干扰效应。结果表明,注射两种dsRNA后纵卷叶螟对水稻的取食明显下降,生长发育阻滞,虫体变小变黑和畸形,有的出现死亡。RT-q PCR表明,注射CmCHSA-I和CmCHSA-II两种dsRNA在96 h后,CmCHSA的表达量相比对照分别下降了59%和64%。注射CmCHSA-I和CmCHSA-II两种dsRNA 7 d后,稻纵卷叶螟的死亡率分别为80%和83.33%,与对照组相比,分别增加了66.67%和70%。本研究用注射法RNAi技术成功实现了对稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因的沉默,为利用该技术研究昆虫基因的功能,以及通过转基因RNAi技术防治稻纵卷叶螟奠定了基础。
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关键词
RNA干扰
稻纵卷叶螟
几丁质合成酶a基因
双链RNA
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职称材料
题名
利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因
被引量：
5
1
作者
李娇
杜娟
李尚伟
机构
贵州大学昆虫研究所贵州山地农业病虫害重点实验实
贵州大学昆虫资源开发利用特色重点实验室
出处
《山地农业生物学报》
2016年第3期10-17,62,共9页
基金
国家自然科学基金项目"利用RNAi技术防治稻纵卷叶螟的研究"(31360443)
贵州省科技创新人才团队项目"贵州省节肢动物资源开发利用科技创新人才团队"(黔科合人才团队[2014]4001号)
文摘
稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)是一种主要的水稻害虫,几丁质合成酶是昆虫体内几丁质合成通路中的一个关键酶,在昆虫生长发育中具有重要作用,是控制害虫的理想靶标。本文采用RNA干扰(RNAi)技术,以稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因(CmCHSA)为靶标,设计两个靶位点CmCHSA-I和CmCHSA-II,在体外分别合成其双链RNA(dsRNA),用显微注射法导入3龄幼虫体内,然后通过表型观察和荧光定量PCR(RT-q PCR)检测干扰效应。结果表明,注射两种dsRNA后纵卷叶螟对水稻的取食明显下降,生长发育阻滞,虫体变小变黑和畸形,有的出现死亡。RT-q PCR表明,注射CmCHSA-I和CmCHSA-II两种dsRNA在96 h后,CmCHSA的表达量相比对照分别下降了59%和64%。注射CmCHSA-I和CmCHSA-II两种dsRNA 7 d后,稻纵卷叶螟的死亡率分别为80%和83.33%,与对照组相比,分别增加了66.67%和70%。本研究用注射法RNAi技术成功实现了对稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因的沉默,为利用该技术研究昆虫基因的功能,以及通过转基因RNAi技术防治稻纵卷叶螟奠定了基础。
关键词
RNA干扰
稻纵卷叶螟
几丁质合成酶a基因
双链RNA
Keywords
RNA interference
Cnaphalocrocis medinalis
chitin synthase A
double-stranded RNA
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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作者
出处
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被引量
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1
利用RNA干扰技术沉默稻纵卷叶螟几丁质合成酶A基因
李娇
杜娟
李尚伟
《山地农业生物学报》
2016
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