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组合策略提高枯草芽孢杆菌中几丁二糖脱乙酰酶的胞外表达
1
作者
刘杨韬
李阳阳
+1 位作者
贾士儒
侯颖
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第10期233-242,共10页
几丁二糖脱乙酰酶(diacetylchitobiose deacetylase,Dac)能够将乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)水解成生物活性物质氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN),而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacillus subtilis ...
几丁二糖脱乙酰酶(diacetylchitobiose deacetylase,Dac)能够将乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)水解成生物活性物质氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN),而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacillus subtilis BS-P43-NMK-T0为出发菌株,首先筛选了12种信号肽,其中,信号肽NprB引导Dac分泌能力最强,并且优化其功能区域后,重组菌株BS-P43-NMK-T4-N1的胞外酶活力达到69.83 U/mL;随后,筛选了3个诱导型启动子,其中启动子P grac100诱导表达效果最好,优化诱导条件后重组菌株BS-NMK-T4-N1-Pgrac的胞外酶活力提高至88.92 U/mL;当发酵条件为接种量4%、葡萄糖20 g/L(碳源)和营养肉汤10 g/L(氮源),胞外Dac酶活力达到127.59 U/mL,而在摇瓶中补加葡萄糖可以使Dac活性进一步提高至144.25 U/mL;最后,在3 L发酵罐中进行放大培养,胞外Dac活性为319.63 U/mL,是出发菌株胞外Dac活性的7.09倍。该研究为酶转化法制备GlcN的工业化生产提供基础研究。
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关键词
几丁二糖脱乙酰酶
枯草芽孢杆菌
信号肽
启动子
发酵优化
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题名
组合策略提高枯草芽孢杆菌中几丁二糖脱乙酰酶的胞外表达
1
作者
刘杨韬
李阳阳
贾士儒
侯颖
机构
天津科技大学生物工程学院
江南大学
出处
《食品与发酵工业》
北大核心
2025年第10期233-242,共10页
基金
天津市科学基金项目(18JCQNJC78600)。
文摘
几丁二糖脱乙酰酶(diacetylchitobiose deacetylase,Dac)能够将乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)水解成生物活性物质氨基葡萄糖(glucosamine,GlcN),而高效生产Dac是实现该催化过程的关键。以一株表达Dac的Bacillus subtilis BS-P43-NMK-T0为出发菌株,首先筛选了12种信号肽,其中,信号肽NprB引导Dac分泌能力最强,并且优化其功能区域后,重组菌株BS-P43-NMK-T4-N1的胞外酶活力达到69.83 U/mL;随后,筛选了3个诱导型启动子,其中启动子P grac100诱导表达效果最好,优化诱导条件后重组菌株BS-NMK-T4-N1-Pgrac的胞外酶活力提高至88.92 U/mL;当发酵条件为接种量4%、葡萄糖20 g/L(碳源)和营养肉汤10 g/L(氮源),胞外Dac酶活力达到127.59 U/mL,而在摇瓶中补加葡萄糖可以使Dac活性进一步提高至144.25 U/mL;最后,在3 L发酵罐中进行放大培养,胞外Dac活性为319.63 U/mL,是出发菌株胞外Dac活性的7.09倍。该研究为酶转化法制备GlcN的工业化生产提供基础研究。
关键词
几丁二糖脱乙酰酶
枯草芽孢杆菌
信号肽
启动子
发酵优化
Keywords
diacetylchitobiose deacetylase
Bacillus subtilis
signal peptide
promoter
fermentation optimization
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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1
组合策略提高枯草芽孢杆菌中几丁二糖脱乙酰酶的胞外表达
刘杨韬
李阳阳
贾士儒
侯颖
《食品与发酵工业》
北大核心
2025
0
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