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表达胃癌MG7-Ag模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗的研制和初步鉴定
被引量：
3
1
作者
孟繁平
丁杰
+3 位作者
喻召才
韩全利
郭长存
樊代明
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期138-140,143,共4页
目的 研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗。 方法将ＮｃｏⅠ位点和ＭＧ７－Ａｇ模拟表位编码序列的互补序列设计到上游引物的５′端。以含有ＨＢｃＡｇ全序列的质粒ｐ１．２Ⅱ为模板，通过ＰＣＲ扩增，获得Ｍ...
目的 研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗。 方法将ＮｃｏⅠ位点和ＭＧ７－Ａｇ模拟表位编码序列的互补序列设计到上游引物的５′端。以含有ＨＢｃＡｇ全序列的质粒ｐ１．２Ⅱ为模板，通过ＰＣＲ扩增，获得ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因。将目的基因插入载体ｐＵＣｍ－Ｔ，经酶切鉴定和序列测定证实后，再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０互补的质粒ｐＹＡ３３４１中，再以此重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０。结果序列测定证实，ＰＣＲ产物为胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因片段；最终得到含有目的基因片段的重组表达载体ｐＹＡ３３４１。重组质粒在Ｘ４５５０中的表达产物，经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明，在相对分子质量（Ｍｒ）约在２２ ０００处有１条可与抗ＭＧ７ ｍＡｂ特异性结合的多肽表位。结论成功地研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位减毒鼠伤寒杆菌疫苗，为进一步研究其在胃癌免疫治疗中的作用奠定了基础。
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关键词
胃肿瘤
模拟表位
减毒鼠伤寒杆菌
MG7-AG
胃癌
疫苗
研制
鉴定
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职称材料
沙眼衣原体主要外膜蛋白在减毒鼠伤寒杆菌中的表达及初步鉴定
被引量：
3
2
作者
白光春
李元
+4 位作者
董辉
李别虎
薛莹
范雄林
马文煜
《细胞与分子免疫学杂志》
CSCD
2000年第4期311-313,共3页
目的采用作为疫苗载体的减毒鼠伤寒杆菌致死性平衡系统 ,构建能异源表达沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)的重组菌株。方法以D型Ct的DNA为模板 ,用所设计的特异性引物扩增编码CtMOMP高变区(VDI～VDIV)基因 ,并将扩增产物定向克隆至质粒...
目的采用作为疫苗载体的减毒鼠伤寒杆菌致死性平衡系统 ,构建能异源表达沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)的重组菌株。方法以D型Ct的DNA为模板 ,用所设计的特异性引物扩增编码CtMOMP高变区(VDI～VDIV)基因 ,并将扩增产物定向克隆至质粒pUC19中。序列分析后 ,再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌X4550互补的质粒pYA3341中 ,以重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌X4550。结果对构建的重组菌以种特异性抗CtMOMP单克隆抗体(mAb)做蛋白印迹表明 ,在相对分子质量(Mr)约为33000处表达有1条带 ,表达量约占菌体总蛋白的13 %。结论成功地构建了能表达MOMP的重组菌株并获得表达。
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关键词
沙眼衣原体
MOMP
减毒鼠伤寒杆菌
基因表达
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职称材料
题名
表达胃癌MG7-Ag模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗的研制和初步鉴定
被引量：
3
1
作者
孟繁平
丁杰
喻召才
韩全利
郭长存
樊代明
机构
第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期138-140,143,共4页
基金
国家自然科学基金资助
No.398707424 39800057
文摘
目的 研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗。 方法将ＮｃｏⅠ位点和ＭＧ７－Ａｇ模拟表位编码序列的互补序列设计到上游引物的５′端。以含有ＨＢｃＡｇ全序列的质粒ｐ１．２Ⅱ为模板，通过ＰＣＲ扩增，获得ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因。将目的基因插入载体ｐＵＣｍ－Ｔ，经酶切鉴定和序列测定证实后，再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０互补的质粒ｐＹＡ３３４１中，再以此重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌Ｘ４５５０。结果序列测定证实，ＰＣＲ产物为胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位与ＨＢｃＡｇ的融合基因片段；最终得到含有目的基因片段的重组表达载体ｐＹＡ３３４１。重组质粒在Ｘ４５５０中的表达产物，经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明，在相对分子质量（Ｍｒ）约在２２ ０００处有１条可与抗ＭＧ７ ｍＡｂ特异性结合的多肽表位。结论成功地研制可表达胃癌ＭＧ７－Ａｇ模拟表位减毒鼠伤寒杆菌疫苗，为进一步研究其在胃癌免疫治疗中的作用奠定了基础。
关键词
胃肿瘤
模拟表位
减毒鼠伤寒杆菌
MG7-AG
胃癌
疫苗
研制
鉴定
Keywords
gastric neoplasm
mimotope
attenuated Salmonella typhimurium
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
沙眼衣原体主要外膜蛋白在减毒鼠伤寒杆菌中的表达及初步鉴定
被引量：
3
2
作者
白光春
李元
董辉
李别虎
薛莹
范雄林
马文煜
机构
第四军医大学微生物学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CSCD
2000年第4期311-313,共3页
文摘
目的采用作为疫苗载体的减毒鼠伤寒杆菌致死性平衡系统 ,构建能异源表达沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)的重组菌株。方法以D型Ct的DNA为模板 ,用所设计的特异性引物扩增编码CtMOMP高变区(VDI～VDIV)基因 ,并将扩增产物定向克隆至质粒pUC19中。序列分析后 ,再亚克隆至与减毒鼠伤寒杆菌X4550互补的质粒pYA3341中 ,以重组质粒转化减毒鼠伤寒杆菌X4550。结果对构建的重组菌以种特异性抗CtMOMP单克隆抗体(mAb)做蛋白印迹表明 ,在相对分子质量(Mr)约为33000处表达有1条带 ,表达量约占菌体总蛋白的13 %。结论成功地构建了能表达MOMP的重组菌株并获得表达。
关键词
沙眼衣原体
MOMP
减毒鼠伤寒杆菌
基因表达
Keywords
Chlamydia trachomatis
major outer membrane pro tein
attenuated Salmonella typhimurium
gene c
loning
gene expression
分类号
R374.1 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达胃癌MG7-Ag模拟表位的减毒鼠伤寒杆菌疫苗的研制和初步鉴定
孟繁平
丁杰
喻召才
韩全利
郭长存
樊代明
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
沙眼衣原体主要外膜蛋白在减毒鼠伤寒杆菌中的表达及初步鉴定
白光春
李元
董辉
李别虎
薛莹
范雄林
马文煜
《细胞与分子免疫学杂志》
CSCD
2000
3
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