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家蚕凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)基因真核表达与功能分析 被引量:2
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作者 易华山 马鲜平 +1 位作者 潘敏慧 鲁成 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期18-23,共6页
【目的】家蚕Bombyx mori凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)是在家蚕中发现的一个凋亡蛋白抑制因子(IAP)。本研究旨在验证家蚕BmIAP蛋白在家蚕细胞内的功能特征,以进一步研究BmIAP在家蚕细胞凋亡中的作用。【方法】对构建的瞬时表达载体PIZ/V5-Bm... 【目的】家蚕Bombyx mori凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)是在家蚕中发现的一个凋亡蛋白抑制因子(IAP)。本研究旨在验证家蚕BmIAP蛋白在家蚕细胞内的功能特征,以进一步研究BmIAP在家蚕细胞凋亡中的作用。【方法】对构建的瞬时表达载体PIZ/V5-BmIAP-dsRed,应用脂质体转染家蚕Bm N-SWU1细胞;应用实时荧光定量PCR和Western blot分析BmIAP mRNA及蛋白表达水平;通过150 ng/m L放线菌素D诱导家蚕Bm N-SWU1细胞12,18和24 h,应用免疫荧光及实时荧光定量PCR方法,分析BmIAP瞬时表达与细胞凋亡的关系。【结果】构建的瞬时表达载体PIZ/V5-BmIAP-dsRed能在家蚕Bm N-SWU1细胞表达BmIAP蛋白,其BmIAP mRNA表达水平上调近45倍,融合蛋白约为60 k D;BmIAP基因瞬时表达72 h后,BmIAP能显著抑制放线菌素D诱导12 h时的家蚕Bm N-SWU1细胞凋亡。【结论】BmIAP蛋白在家蚕细胞中能抑制家蚕细胞凋亡,是家蚕的一种凋亡蛋白抑制因子。 展开更多
关键词 家蚕 细胞 凋亡蛋白抑制因子 真核表达 瞬时表达
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凋亡蛋白抑制因子与阿克拉霉素诱导骨髓增生异常综合征细胞株细胞凋亡关系的体外研究
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作者 林茂芳 熊红 +1 位作者 蔡真 王云贵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期606-609,共4页
为了探讨阿克拉霉素 (aclacinomycin ,ACM)诱导骨髓增生异常综合征 (MDS)细胞凋亡与凋亡蛋白抑制因子 (IAP)的关系 ,以DNA片段原位末端 (TUNEL)标记方法检测MDS细胞株MUTZ 1细胞 (RAEB型 )经ACM作用后的TUNEL阳性细胞 ,并用RT PCR技术检... 为了探讨阿克拉霉素 (aclacinomycin ,ACM)诱导骨髓增生异常综合征 (MDS)细胞凋亡与凋亡蛋白抑制因子 (IAP)的关系 ,以DNA片段原位末端 (TUNEL)标记方法检测MDS细胞株MUTZ 1细胞 (RAEB型 )经ACM作用后的TUNEL阳性细胞 ,并用RT PCR技术检测cIAP1及cIAP2mRNA表达水平的变化。结果表明 :① 0 .2 5μmol LACM处理 2 4小时 ,MUTZ 1细胞cIAP1mRNA相对表达量 (cIAP1 GAPDH)为 0 .2 4± 0 .0 5 ,与未处理组(0 4 4± 0 0 8)相比 ,有显著的差异 (P =0 .0 2 4 ) ;0 .5 μmol L和 1.0 μmol LACM处理 2 4小时 ,cIAP1mRNA相对表达量分别为 0 .15± 0 .0 9和 0 .0 0± 0 .0 0 ,与未处理组相比 ,均有非常显著的差异 (P值分别为 0 .0 0 2和 0 .0 0 0 2 )。相关性分析显示 ,cIAP1mRNA表达强度与ACM作用浓度呈负相关 (r=- 0 .97,P <0 .0 1)。② 0 .5 μmol LACM作用 6、12、2 4小时 ,cIAP1mRNA相对表达量分别为 0 .95± 0 .0 4 ,0 .73± 0 .0 5 ,0 .38± 0 .0 7,与未经ACM处理组相比 ,均有显著的差异 (P值分别为 0 .0 2 ,0 .0 0 0 4 ,0 .0 0 0 2 )。相对表达量与ACM作用时间呈负相关 (r =- 0 996 ,P <0 0 1)。③ 0 .5 μmol LACM处理 3,6 ,12和 2 4小时 ,MUTZ - 1细胞cIAP2mRNA相对表达量分别为 1 17±0 .0 6 ,0 . 展开更多
关键词 阿克拉霉素 骨髓增生异常综合征 凋亡蛋白抑制因子 细胞
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X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究 被引量:1
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作者 朱黎明 涂水平 +3 位作者 戴强 姚玮艳 乔敏敏 江石湖 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1419-1423,共5页
目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体... 目的研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周。每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异。原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD)。结果与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01)。结论腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。 展开更多
关键词 X连锁抑制蛋白相关因子-1 肝癌 腺病毒 移植瘤 血管形成
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含胱天蛋白酶富集功能域凋亡抑制因子在心血管疾病中的研究进展
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作者 李奇 杨俊 +1 位作者 杨简 杨英 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期536-540,共5页
细胞凋亡在维持机体正常发育以及内环境稳定中发挥重要作用,同时也对多种疾病的病理生理产生影响。研究表明心肌细胞凋亡参与了多种心血管疾病的发生发展过程。含胱天蛋白酶富集功能域凋亡抑制因子(ARC)是迄今为止唯一在心脏特异性高表... 细胞凋亡在维持机体正常发育以及内环境稳定中发挥重要作用,同时也对多种疾病的病理生理产生影响。研究表明心肌细胞凋亡参与了多种心血管疾病的发生发展过程。含胱天蛋白酶富集功能域凋亡抑制因子(ARC)是迄今为止唯一在心脏特异性高表达的抗凋亡蛋白,并可通过其抗凋亡能力发挥心肌保护作用。本文就ARC的结构和特点、ARC在心血管疾病中的作用及机制予以综述。 展开更多
关键词 含胱天蛋白酶富集功能域抑制因子 心血管疾病
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XAF1基因对胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 黄佳 姚玮艳 +2 位作者 朱黎明 曹海霞 章永平 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期378-380,384,共4页
目的探讨Ad5/F35腺病毒介导的X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖和凋亡的影响。方法构建和包装Ad5/F35-XAF1重组腺病毒并感染胰腺癌细胞SW1990(Ad5/F35-XAF1组),设立对照病毒感染组(Ad5/F35-Null组)... 目的探讨Ad5/F35腺病毒介导的X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖和凋亡的影响。方法构建和包装Ad5/F35-XAF1重组腺病毒并感染胰腺癌细胞SW1990(Ad5/F35-XAF1组),设立对照病毒感染组(Ad5/F35-Null组)和空白组。运用RT-PCR技术和Western blotting分析对感染细胞进行鉴定。流式细胞仪检测细胞凋亡并分析细胞周期,TUNEL法测定细胞凋亡率;MTT法检测细胞增殖。结果Ad5/F35-XAF1组SW1990细胞XAF1mRNA和蛋白表达水平均明显上调。与空白对照组和Ad5/F35-Null组比较,Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率明显增加,增殖活性明显降低,G2/M期细胞比例显著增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Ad5F35-XAF1重组腺病毒感染胰腺癌细胞SW1990后,能促进细胞凋亡并抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 X染色体连锁抑制蛋白相关因子1 胰腺癌 细胞 细胞周期
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日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估
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作者 胡超 罗荣 +6 位作者 刀金威 王宇清 赵江平 陆珂 李浩 刘金明 程国锋 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第3期34-40,共7页
为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利... 为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP)重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利用重组蛋白制备兔源多克隆抗体血清。然后,选用SjIAP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA检测免疫小鼠血清中的特异性抗体水平,以及免疫小鼠脾脏淋巴细胞在SjIAP重组蛋白刺激后产生的细胞因子水平。强化免疫后,将小鼠进行血吸虫尾蚴攻虫试验,感染38 d,进行剖杀,计算虫体减虫率及肝脏减卵率。Western blot结果表明本研究制备的兔源多抗血清能特异性识别SjIAP重组蛋白。ELISA检测表明免疫SjIAP重组蛋白可诱导较高水平的IgG及IgG亚型(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3)抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。动物试验表明,免疫SjIAP重组蛋白的小鼠与PBS组相比分别获得了31.5%的减虫率和37.2%的肝脏减卵率。免疫SjIAP重组蛋白能诱导小鼠获得一定减虫和减卵保护效果,提示血吸虫凋亡蛋白抑制因子可作为抗血吸虫病的疫苗候选分子。 展开更多
关键词 日本血吸虫 凋亡蛋白抑制因子 免疫保护
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Survivin在人脑胶质瘤中的表达及意义 被引量:7
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作者 甄海宁 章翔 +5 位作者 杨彤涛 胡佩臻 付洛安 马福成 王西玲 梁景文 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期6-8,12,共4页
目的:探讨凋亡蛋白抑制因子Survivin在人脑胶质瘤中的表达水平及与脑胶质瘤发生发展的关系。方法:采用免疫组化SABC方法检测Survivin蛋白在83例脑胶质瘤和12例正常脑组织标本中的表达水平。结果:Survivin在脑胶质瘤及正常脑组织中的表... 目的:探讨凋亡蛋白抑制因子Survivin在人脑胶质瘤中的表达水平及与脑胶质瘤发生发展的关系。方法:采用免疫组化SABC方法检测Survivin蛋白在83例脑胶质瘤和12例正常脑组织标本中的表达水平。结果:Survivin在脑胶质瘤及正常脑组织中的表达阳性率及免疫反应评分(IRS)分别为57.8%、3.75±3.89和8.3%、0.17±0.58,两者间表达阳性率及IRS均有极显著差异(P均<0.01)。Ⅰ~Ⅳ级以及良、恶性脑胶质瘤Survivin表达阳性率分别为29.4%、44.0%、72.2%、82.6%和38.1%、78.0%,在脑胶质瘤不同病理级别以及不同恶性度间Survivin表达阳性率均有极显著差异(P=0.002,P<0.01)。Ⅰ~Ⅳ级以及良、恶性脑胶质瘤SurvivinIRS分别为1.29±2.62、2.56±3.44、4.78±3.89、6.04±3.78和2.05±3.16、5.49±3.83,在脑胶质瘤不同病理级别以及不同恶性度间SurvivinIRS也有极显著差异(P均<0.01)。结论:Survivin在脑胶质瘤中高表达,且随脑胶质瘤病理级别的增高而表达增强,Survivin在脑胶质瘤发生发展过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 Survivin凋亡蛋白抑制因子 胶质瘤 免疫组化
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Survivin与肿瘤治疗的研究进展 被引量:5
8
作者 张文璎 薛月珍 《实用医学杂志》 CAS 2008年第1期155-157,共3页
Survivin是1997年Ambrosini等用效应细胞蛋白酶受体-1(EPR-1)cDNA在人类基因库的杂交筛选中分离得到。是凋亡蛋白抑制因子(inhibitors of apoptosis protein,IAP)家族中最具有基础与临床研究意义而备受关注的分子。本文就survivin... Survivin是1997年Ambrosini等用效应细胞蛋白酶受体-1(EPR-1)cDNA在人类基因库的杂交筛选中分离得到。是凋亡蛋白抑制因子(inhibitors of apoptosis protein,IAP)家族中最具有基础与临床研究意义而备受关注的分子。本文就survivin在肿瘤治疗方面的研究综述如下。 展开更多
关键词 SURVIVIN 肿瘤治疗 APOPTOSIS 凋亡蛋白抑制因子 SURVIVIN PROTEIN 杂交筛选 效应细胞
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大鼠XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒的构建及IRF-1结合位点的鉴定
9
作者 周建博 邱文 +3 位作者 卢燕来 单锴 赵聃 王迎伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期295-300,共6页
目的:构建大鼠X染色体连锁的凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis associated factor 1,XAF1)基因启动子(全长和截断)荧光素酶报告质粒,并观察在人胚肾细胞HEK293中过表达干扰素调节因子-1(interferon regulatoryfac... 目的:构建大鼠X染色体连锁的凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis associated factor 1,XAF1)基因启动子(全长和截断)荧光素酶报告质粒,并观察在人胚肾细胞HEK293中过表达干扰素调节因子-1(interferon regulatoryfactor-1,IRF-1)对XAF1基因启动活性的影响,同时,筛选其可能的IRF-1结合位点。方法:采用PCR技术,扩增出大鼠XAF1基因启动子序列(-1497~+166 nt),将XAF1基因启动子插入荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中获得pGL3-XAF1-QC,与大鼠野生型IRF-1表达质粒(pcDNA3.1-IRF-1)共转染HEK293细胞,检测其荧光素酶活性,确定IRF-1对XAF1基因的启动作用。同时,应用生物信息学软件预测XAF1基因启动子上IRF-1潜在的结合位点,并构建截断的XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒(pGL3-XAF1-1、pGL3-XAF1-2、pGL3-XAF1-3和pGL3-XAF1-4)。将上述全长和各截断的XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒和IRF-1过表达质粒共转染HEK293细胞,再行荧光素酶活性测定,筛选IRF-1的结合位点。结果:菌液PCR及核酸测序证实,上述荧光素酶报告质粒均构建成功。将pGL3-XAF1-QC和pcDNA3.1-IRF-1共转染HEK293细胞发现,XAF1基因启动子活性显著增加。而将pGL3-XAF1-QC、pGL3-XAF1(1~4号)和pcDNA3.1-IRF-1共转染HEK293细胞后证实,pGL3-XAF1-3的启动活性显著低于pGL3-XAF1-1和pGL3-XAF1-2。提示IRF-1可能结合在大鼠XAF1基因启动子的-337~-47 nt区域。结论:本实验成功构建了大鼠全长及截断的XAF1基因启动子荧光素酶报告质粒,并初步筛查出IRF-1在XAF1基因启动子上的结合区域,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 X染色体连锁的抑制蛋白相关因子1(XAF1) 干扰素调节因子-1(IRF-1) 启动子 生物信息学 荧光素酶报告质粒
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膀胱癌中增殖基因的表达及其与ILP-2和EpCAM的相关性 被引量:1
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作者 陈智慧 邓有强 +1 位作者 罗惠兰 周祥福 《海南医学院学报》 CAS 2018年第14期1379-1382,共4页
目的:研究膀胱癌中增殖基因的表达及其与凋亡抑制因子样蛋白2(ILP-2)和上皮特异性黏附分子(EpCAM)的相关性。方法:选择我院及中山大学附属第三医院2015年3月~2017年12月期间进行手术切除的膀胱癌患者作为研究对象,收集膀胱癌病... 目的:研究膀胱癌中增殖基因的表达及其与凋亡抑制因子样蛋白2(ILP-2)和上皮特异性黏附分子(EpCAM)的相关性。方法:选择我院及中山大学附属第三医院2015年3月~2017年12月期间进行手术切除的膀胱癌患者作为研究对象,收集膀胱癌病灶和癌旁病灶组织适量,测定ILP-2、EpCAM、凋亡相关基因、侵袭相关基因的mRNA表达量。结果:膀胱癌病灶内ILP2、EpCAM、ILK、GRP48、β-catenin、MMP9、Trim59的mRNA表达量显著高于癌旁病灶,Caspase-3、DR4、DR5、NDGR2的mRNA表达量均显著低于癌旁病灶;ILP-2高表达的膀胱癌病灶内Caspase-3、DR4、DR5、NDGR2的mRNA表达量低于ILP-2低表达的膀胱癌病灶,EpCAM高表达的膀胱癌病灶内ILK、GRP48、β-catenin、MMP9、Trim59的mRNA表达量高于EpCAM低表达的膀胱癌病灶。结论:膀胱癌中ILP-2和EpCAM的高表达与凋亡基因表达的下调、侵袭基因表达的上调密切相关。 展开更多
关键词 膀胱癌 抑制因子蛋白-2 上皮特异性黏附分子 侵袭
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