凋亡相关斑点样蛋白不同表位抗体对β淀粉样蛋白聚集及神经毒性作用的研究

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作者 赖霞 刘河 +2 位作者 朱晓鹏 龙艳 邓娟 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期341-343,共3页

目的 探讨凋亡相关斑点样蛋白(ASC)不同表位抗体对β淀粉样蛋白(Aβ)聚集和神经毒性的作用。方法 SH-SY5Y-APP695细胞培养体系培育按实验目的分组:A组(25μmol/L Aβ)、B组(2μmol/L ASC)、C组(2μmol/L ASC+25μmol/L Aβ+10μg/ml AL1... 目的 探讨凋亡相关斑点样蛋白(ASC)不同表位抗体对β淀粉样蛋白(Aβ)聚集和神经毒性的作用。方法 SH-SY5Y-APP695细胞培养体系培育按实验目的分组:A组(25μmol/L Aβ)、B组(2μmol/L ASC)、C组(2μmol/L ASC+25μmol/L Aβ+10μg/ml AL177)、D组(2μmol/L ASC+25μmo/L Aβ+10μg/ml ab155970)、E组(25μmol/L Aβ+2μmol/L ASC)用于探讨重组ASC蛋白与Aβ蛋白结合。对照组[磷酸盐吐温缓冲液(PBST)]、Aβ组(10μmol/L Aβ)、Aβ+N端组(10μmol/L Aβ+10μg/ml AL177)、Aβ+C端组(10μmo/L Aβ+10μg/ml ab155970)用于探讨细胞炎性反应。Ⅰ组(PBST)、Ⅱ组(10μmol/L Aβ)、Ⅲ组(10μmol/L Aβ+10μg/ml AL177)、Ⅳ组(10μmol/L Aβ+10μg/ml ab155970)用于细胞毒性检测。N端组[10μg/ml AL177+10μg/ml异硫氰酸荧光素(FITC)-Aβ_(42)]、C端组(10μg/ml ab155970+10μg/ml FITC-Aβ_(42))、空白组(PBST)用于免疫荧光染色。结果与A组比较,C组细胞中Aβ聚集减少,D组Aβ聚集增多(P<0.01)。与对照组比较,Aβ+C端组Aβ引起的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1含量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。噻唑蓝法检测结果显示,Ⅱ组细胞活性低于Ⅰ组,差异有统计学意义(1.12±4.25 vs 0.73±5.68,P<0.01);Ⅲ组细胞活性明显高于Ⅱ组,差异有统计学意义(1.28±2.21 vs 0.73±5.68,P<0.05)。结论 ASC蛋白N端抗体AL177抑制Aβ聚集,ASC蛋白C端抗体ab155970促进Aβ聚集,并具有时间依赖性。C端抗体刺激Aβ引起炎性反应,N端抗体拮抗对Aβ神经细胞毒性。表明ASC不同表位抗体对Aβ聚集及神经毒性具有不同作用,对阿尔茨海默病防治有一定的应用前景。 展开更多

关键词 Β淀粉样蛋白 阿尔茨海默病 细胞毒性 免疫 抗体 表位 凋亡相关斑点样蛋白

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凋亡相关斑点样蛋白敲除PK-15细胞系的建立及对PRV感染的影响 被引量：3

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作者 翟云云 李佳佳 +4 位作者 张爽 任子昱 金前跃 杜永坤 万博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期478-487,共10页

本试验旨在研究凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)感染PK-15细胞的影响。以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK-15)ASC基因稳定敲除细胞系,通过T7核酸酶检测靶基因的敲除效率;CCK-8试剂盒... 本试验旨在研究凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)感染PK-15细胞的影响。以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK-15)ASC基因稳定敲除细胞系,通过T7核酸酶检测靶基因的敲除效率;CCK-8试剂盒检测PK-15敲除ASC基因对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测PK-15以及PK15-ASC-/-细胞感染PRV-GFP病毒的增殖差异;RT-PCR检测PRV-gB及IFN-β、ISG15、IL^-1βmRNA表达水平;Western blot检测PRV gE蛋白的表达;TCID50检测子代病毒感染力的滴定。结果表明:两对特异性sgRNA均能对ASC进行基因编辑,但经过T7核酸酶酶切检测进行基因编辑效率分析,结果表明,sgRNA2的基因编辑效率最高;CCK-8试剂盒检测细胞活力结果表明,PK-15以及PK15-ASC-/-细胞活力无影响;流式细胞仪检测结果表明PRV-GFP在PK15-ASC-/-细胞中的增殖显著低于PK-15细胞;定量RT-PCR结果表明,PRV-gB基因在PK15-ASC-/-细胞中的转录水平显著低于PK-15细胞,而IFN-β、ISG15基因在PK15-ASC-/-细胞中的转录水平显著高于PK-15细胞;Western blot结果表明,PRV的gE蛋白在PK15-ASC-/-细胞中的表达显著低于PK-15细胞;滴度测定结果表明敲除ASC基因能够显著抑制子代病毒的增殖能力。本研究成功构建了PK15-ASC-/-细胞系,并通过PRV感染试验证实敲除ASC基因可以抑制PRV在PK-15细胞中的增殖。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 凋亡相关斑点样蛋白 先天性免疫 猪肾上皮细胞

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Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1对过氧化氢诱导的晶状体上皮细胞凋亡与自噬的影响

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作者 鲍思洁 李鹏飞 +3 位作者 康丽华 王从玉 王思文 管怀进 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第12期934-939,共6页

目的探究Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1(NEIL1)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡与自噬的影响。方法以年龄相关性白内障(ARC)患者、接受透明晶状体摘除术的黄斑前膜患者的晶状体前囊膜样本和晶状体上皮细胞系SRA01/04细... 目的探究Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1(NEIL1)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡与自噬的影响。方法以年龄相关性白内障(ARC)患者、接受透明晶状体摘除术的黄斑前膜患者的晶状体前囊膜样本和晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞为研究对象,采用RT-PCR实验检测NEIL1 mRNA表达。将SRA01/04细胞随机分为对照组、OE-Vector组和OE-NEIL1组,采用RT-PCR和Western blot检测过表达效率;将细胞随机分为对照组、H_(2)O_(2)组、OE-Vector H_(2)O_(2)组、OE-NEIL1 H_(2)O_(2)组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测自噬相关蛋白(ATG7、P62、Beclin1、LC3-I和LC3-II)和凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达,荧光染色检测细胞凋亡与线粒体膜电位情况。结果ARC患者晶状体前囊膜样本中的NEIL1 mRNA表达显著低于黄斑前膜患者,且H_(2)O_(2)组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA的表达同样低于对照组(均为P<0.05)。RT-PCR与Western blot检测结果显示,OE-NEIL1组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA和蛋白表达均显著高于OE-Vector组(均为P=0.000)。与对照组相比,H_(2)O_(2)组SRA01/04细胞中细胞活力显著降低;Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调;Mito-Tracker标记活细胞数显著减少,Annexin V-FITC标记的凋亡细胞数显著增多,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与OE-Vector H_(2)O_(2)组相比,OE-NEIL1 H_(2)O_(2)组SRA01/04细胞中细胞活力显著升高;自噬相关蛋白(ATG7、P62、Beclin1、LC3-I和LC3-II)表达均显著上调;Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调;Mito-Tracker标记的活细胞数增加,Annexin V-FITC标记的凋亡细胞数减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论在H_(2)O_(2)诱导氧化应激条件下,NEIL1可通过促进LECs的自噬,维持LECs内环境稳定,增加其细胞活力从而减少LECs凋亡,参与ARC的发生发展。 展开更多

关键词 Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 凋亡 自噬

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芍药苷上调lncRNA MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进人类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡 被引量：8

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作者 杨帆 沈俊逸 蔡辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期692-698,共7页

目的探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条... 目的探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1的小干扰RNA(si-MALAT1)片段,脂质体转染48 h后,实时定量PCR检测筛选出敲除效果最佳si-MALAT1。将细胞分对照组、PAE组、si-NC组、si-MALAT1组、PAE联合si-MALAT1组。敲低MALAT1表达后,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测各组Wnt1、β联蛋白(β-catenin)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA表达;Western blot法检测各组Wnt1、β-catenin、caspase-3、caspase-9、Bcl2、BAX的蛋白表达。结果不同浓度PAE对RA-FLS均有抑制作用,相同浓度RA-FLS活力呈时间依赖性下降;与FLS对照组相比,RA-FLS组MALAT1表达下调,经PAE处理后细胞凋亡率增加;RA-FLS中si-MALAT1组细胞凋亡率最低,而PAE联合si-MALAT1组显著增高;PAE组较对照组Bcl2、Wnt1、β-catenin的mRNA表达降低,caspase-3、caspase-9、BAX的mRNA表达则升高;si-MALAT1组的Bcl2表达显著增高,PAE联合si-MALAT1组的Bcl2表达则显著下调,BAX、caspase-3、caspase-9表达显著升高。结论PAE通过上调MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进RA-FLS凋亡。 展开更多

关键词 芍药苷 长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1) WNT1 β联蛋白(β-catenin) 成纤维细胞样滑膜细胞(FLS) 细胞凋亡

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类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中c-FLIP与外源性凋亡途径的相关性分析 被引量：2

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作者 林美娜 许瑞元 +2 位作者 章涛 张琳 梅序桥 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期381-388,共8页

目的:分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Fas相关死亡区样白介素1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)与外源性凋亡途径相关蛋白死亡结构域蛋白(FADD)、caspase-8表达水平变化的相关性。方法:选择2014年1月至2015年6月福建医科大学附属... 目的:分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中Fas相关死亡区样白介素1转换酶抑制蛋白(c-FLIP)与外源性凋亡途径相关蛋白死亡结构域蛋白(FADD)、caspase-8表达水平变化的相关性。方法:选择2014年1月至2015年6月福建医科大学附属漳州市医院类风湿关节炎患者60例,按照类风湿关节炎疾病活动指数将患者分为低、中、高活动度组(分别为22、20和18例)。同时选择健康体检者25名作为健康对照组。采用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA和蛋白表达水平,并采用Pearson检验对c-FLIP与FADD、caspase-8表达的相关性进行分析。结果:类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP、FADD和caspase-8的mRNA表达量均高于健康对照组(均P <0. 05)。其中,中活动度组PBMC中FADD和caspase-8的mRNA表达量高于低活动度组(均P <0. 05),c-FLIP的mRNA表达量与低活动度组相近(P>0. 05);高活动度组PBMC中c-FLIP的mRNA表达量高于中、低活动度组(均P <0. 05),caspase-8的mRNA表达量低于中、低活动度组(均P <0. 05),FADD的mRNA表达量高于低活动度组(P <0. 05)。类风湿关节炎患者PBMC中c-FLIP mRNA水平与FADD mRNA水平呈正相关(r=0. 323,P <0. 05),与caspase-8mRNA水平呈负相关(r=-1. 104,P <0. 05)。中活动度组c-FLIP和FADD蛋白表达量高于健康对照组、低活动度组和高活动度组(P <0. 05或P <0. 01);中、高活动度组caspase-8蛋白表达量高于健康对照组和低活动度组(P <0. 05或P <0. 01),且高活动度组caspase-8蛋白表达量高于中活动度组(P <0. 05)。结论:类风湿关节炎患者PBMC中凋亡相关蛋白c-FLIP可能参与了外源性凋亡途径,并可为类风湿关节炎病情评估提供参考。 展开更多

关键词 关节炎 类风湿/病理生理学 单核细胞/代谢 Fas相关死亡结构域蛋白质/代谢 凋亡调节蛋白质类 CASP8和FADD样细胞凋亡调节蛋白质/生理学 细胞凋亡

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车叶草苷对少弱精症大鼠抗氧化应激及抗细胞凋亡的作用机制研究

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作者 张敏 颜峰 +1 位作者 张泰宁 王雪楠 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第17期2584-2589,2595,共7页

目的:探讨车叶草苷(ASP)对少弱精症大鼠抗氧化应激及抗细胞凋亡的作用机制。方法:通过灌胃奥硝唑建立少弱精症大鼠模型,将SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、车叶草苷组(60 mg/kg)和通路抑制剂(第3周腹腔注射2 mg/kg)+车叶草苷... 目的:探讨车叶草苷(ASP)对少弱精症大鼠抗氧化应激及抗细胞凋亡的作用机制。方法:通过灌胃奥硝唑建立少弱精症大鼠模型,将SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、车叶草苷组(60 mg/kg)和通路抑制剂(第3周腹腔注射2 mg/kg)+车叶草苷组,每组10只。检测大鼠精子参数;酶联免疫吸附试验法检测血清丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;实时萤光定量聚合酶链式反应法检测睾丸组织B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bax)和核因子E2相关因子2(Nrf2)基因水平;蛋白质免疫印迹法检测睾丸组织Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)水平。结果:与对照组比较,模型组精子活力、精子浓度、GSH-Px、GSH、SOD、Bcl-2、Keap1、Nrf2、HO-1水平下降(P<0.05),MDA和Bax水平上升(P<0.05);与模型组比较,车叶草苷组精子活力、精子浓度、GSH-Px、GSH、SOD、Bcl-2、Keap1、Nrf2、HO-1水平上升(P<0.05),MDA和Bax水平下降(P<0.05)。结论:ASP能有效改善少弱精症大鼠精子活力、精子浓度,减少睾丸组织细胞的凋亡,改善氧化应激损伤,Keap1/Nrf2信号通路的激活可能是其作用机制。 展开更多

关键词 车叶草苷 精子活力 精子损伤 Kelch样ECH关联蛋白1/核因子E2相关因子2信号通路 氧化应激 少弱精症 细胞凋亡 性激素

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ASC在ONO-AE-248诱发的中性粒细胞非凋亡性程序化死亡中的作用

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作者 羊建 刘佳佳 +1 位作者 郑小莉 薛晓婕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期471-473,477,共4页

目的:探讨接受ONO-AE-248刺激后重要的差异表达蛋白——凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)的表达及意义。方法:Ficoll法新鲜分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞(Polymorpho-nuclear ne... 目的:探讨接受ONO-AE-248刺激后重要的差异表达蛋白——凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)的表达及意义。方法:Ficoll法新鲜分离健康志愿者外周静脉血中性粒细胞(Polymorpho-nuclear neu-trophils,PMN),与ONO-AE-248共同培养,2小时提取总RNA,并行反转录-PCR检测ASC mRNA的表达;12小时提取总蛋白,双向电泳分离后,采用PDQest2-DE软件分析找出差异表达的蛋白质斑点,并用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果:ONO-AE-248刺激2小时中性粒细胞ASC mRNA的表达明显下调(P<0.01);12小时通过双向电泳和蛋白质质谱分析发现ASC为重要的差异表达蛋白且ONO-AE-248刺激后的表达量明显低于自发性凋亡组。结论:ONO-AE-248引起的ASC表达的下调可能是中性粒细胞凋亡和ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡性程序化细胞死亡的关键性差异点。ONO-AE-248显著下调ASC的表达,可能是ONO-AE-248诱使中性粒细胞发生非凋亡性程序化死亡的根本原因之一。 展开更多

关键词 中性粒细胞 ONO—AE-248 非凋亡性程序化细胞死亡 凋亡 凋亡相关斑点样蛋白

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阿尔采末病相关基因与细胞凋亡 被引量：2

8

作者 王雪 张岱 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期307-311,共5页

阿尔采末病 (Alzheimer’sdisease ,AD)是最常见的一种老年期痴呆综合征 ,痴呆的发生与神经元的凋亡密切相关。AD相关基因编码蛋白APP、PS1及PS2的突变体均对细胞凋亡有调节作用 ,同时亦有越来越多的凋亡调节因子参与AD神经元退行性病... 阿尔采末病 (Alzheimer’sdisease ,AD)是最常见的一种老年期痴呆综合征 ,痴呆的发生与神经元的凋亡密切相关。AD相关基因编码蛋白APP、PS1及PS2的突变体均对细胞凋亡有调节作用 ,同时亦有越来越多的凋亡调节因子参与AD神经元退行性病变。该领域的研究对深入探讨AD的发病机制以及研究其防治措施均有重要意义。 展开更多

关键词 阿尔采末病 细胞凋亡 淀粉样前体蛋白 衰老蛋白 凋亡调节因子 AD 病理 相关基因

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ASC在ONO-AE-248诱导的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的表达 被引量：1

9

作者 胡艳玲 李国利 刘佳佳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期202-205,共4页

目的:探讨凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein,ASC)在ONO-AE-248所诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的作用及意义。方法:TUNEL法标记凋亡细胞,结合激光共聚焦扫描显微镜观察细胞核形态以及DNA片段化发... 目的:探讨凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein,ASC)在ONO-AE-248所诱发的中性粒细胞非凋亡、非坏死性死亡中的作用及意义。方法:TUNEL法标记凋亡细胞,结合激光共聚焦扫描显微镜观察细胞核形态以及DNA片段化发生的情况;Western blot法检测不同药物刺激组(LPS延迟凋亡组、TNF-α促进凋亡组、ONO-AE-248刺激组以及自发性凋亡组)的ASC蛋白的表达差异性。结果:TUNEL法检测ONO-AE-248培养12小时后的中性粒细胞,未见TUNEL阳性细胞。Western blot结果显示ONO-AE-248刺激后中性粒细胞ASC蛋白的表达一直处于下调状态。结论:ONO-AE-248诱导人中性粒细胞死亡过程中细胞核DNA断裂方式明显不同于自发性凋亡组,核内染色体可能只发生DNA较大片段的断裂,而没有发生小片段化。ONO-AE-248引起的ASC表达的下调可能是这种新型细胞死亡方式区别于自发性凋亡的重要差异点。 展开更多

关键词 凋亡相关斑点样蛋白 ONO-AE-248 中性粒细胞 非凋亡、非坏死性程序化死亡 凋亡

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磷酸甘油酸变位酶5与坏死样凋亡 被引量：4

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作者 佘浪 彭军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期377-380,共4页

多年来人们认为细胞死亡方式主要包括坏死和凋亡。坏死是不受特定调控的被动死亡方式，表现为细胞器肿胀，细胞膜破裂，内容物渗出，有炎症反应[1]，而凋亡则是由细胞内胱天蛋白酶（caspase）调控的一种主动死亡方式，因caspase激活导... 多年来人们认为细胞死亡方式主要包括坏死和凋亡。坏死是不受特定调控的被动死亡方式，表现为细胞器肿胀，细胞膜破裂，内容物渗出，有炎症反应[1]，而凋亡则是由细胞内胱天蛋白酶（caspase）调控的一种主动死亡方式，因caspase激活导致细胞内底物裂解，破坏胞膜囊泡形成凋亡小体，死亡过程中无内容物渗出，不引起炎症反应[2]。 展开更多

关键词 坏死样凋亡 磷酸甘油酸变位酶5 发动蛋白相关蛋白1 线粒体分裂 磷酸酶

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MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡 被引量：6

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作者 陶天琪 王晓礽 +3 位作者 徐菲菲 刘蜜 李玉珍 刘秀华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期193-202,共10页

目的:研究肌原纤维形成调节因子1(MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)途径减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡。方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞... 目的:研究肌原纤维形成调节因子1(MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)途径减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡。方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞的凋亡率;以Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化PERK、Nrf2、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Bcl-2和Bax的蛋白水平,研究过表达或敲低对于H/R致心肌细胞凋亡的影响及其与PERK/Nrf2途径活化的关系。结果:H/R引起心肌细胞凋亡;过表达MR-1减轻H/R引起的细胞凋亡(P<0.01),下调CHOP表达(P<0.05),引起Bcl-2/Bax值升高(P<0.01),并抑制H/R诱导的PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01)。敲低MR-1加重H/R引起的细胞凋亡(P<0.01)、CHOP表达上调(P<0.05)和Bcl-2/Bax值下降(P<0.01),并加重H/R诱导的PERK磷酸化(P<0.05)、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01)。结论:MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 缺氧 复氧 心肌细胞 肌原纤维形成调节因子1 蛋白激酶R样内质激酶 核因子E2 相关因子2

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NF-κB介导MRP8/14诱导的人肺泡上皮A549细胞凋亡 被引量：4

12

作者 黄林 杨晨 +3 位作者 梁婕 罗海华 姜勇 刘爱华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期701-706,共6页

目的:探讨髓样相关蛋白8/14(MRP8/14)对人肺泡上皮A549细胞存活及凋亡的影响,并研究核因子κB(NF-κB)在其中的作用。方法:MRP8/14以不同剂量或刺激时间处理A549细胞,CCK-8法检测其对细胞活力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western b... 目的:探讨髓样相关蛋白8/14(MRP8/14)对人肺泡上皮A549细胞存活及凋亡的影响,并研究核因子κB(NF-κB)在其中的作用。方法:MRP8/14以不同剂量或刺激时间处理A549细胞,CCK-8法检测其对细胞活力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法及间接免疫荧光法检测A549细胞内NF-κB p65蛋白核移位情况;Western blot法检测NF-κB p65蛋白磷酸化水平;使用NF-κB特异性抑制剂Bay 11-7082探讨NF-κB在凋亡过程中的作用。结果:MRP8/14能以剂量和时间依赖的方式影响A549细胞的存活(P<0.05),流式细胞技术检测结果表明MRP8/14处理后A549细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。此外,MRP8/14能够诱导NF-κB p65蛋白发生显著磷酸化,并移位至细胞核中,NF-κB信号通路明显激活,而NF-κB特异性抑制剂Bay 11-7082能够明显抑制MRP8/14诱导的细胞凋亡(P<0.01)。结论:NF-κB在MRP8/14所导致的肺泡上皮细胞凋亡过程发挥了重要作用。 展开更多

关键词 急性肺损伤 细胞凋亡 髓样相关蛋白8/14 肺泡Ⅱ型上皮细胞 核因子ΚB

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ASC及ASC-b异常表达与痛风性关节炎患者血清中炎症介质分泌的相关性研究 被引量：4

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作者 马玲 《海南医学院学报》 CAS 2017年第24期3385-3388,共4页

目的:研究凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及其亚型ASC-b异常表达与痛风性关节炎患者血清中炎症介质分泌的相关性。方法:选择2014年7月~2017年3月期间在德阳市人民医院就诊的急性痛风性关节炎患者作为研究的AGA组,痛风性关节炎间歇期患者作为... 目的:研究凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及其亚型ASC-b异常表达与痛风性关节炎患者血清中炎症介质分泌的相关性。方法:选择2014年7月~2017年3月期间在德阳市人民医院就诊的急性痛风性关节炎患者作为研究的AGA组,痛风性关节炎间歇期患者作为研究的IGA组,另取同期在德阳市人民医院体检的健康志愿者作为研究的对照组。测定外周血中ASC、ASC-b的表达量以及血清中炎症介质的含量。结果:AGA组患者外周血中ASC、ASC-b的mRNA表达量以及血清中IL-1β、IL-18、TNF-α、PGE_2、IL-6、IL-8、DKK-1、TRAP5b、ANGPTL4、RANKL、APN/CD31的含量均显著高于IGA组和对照组(P<0.05),IGA组患者外周血中ASC、ASC-b的mRNA表达量以及血清中IL-1β、IL-18、TNF-α、PGE_2、IL-6、IL-8、DKK-1、TRAP5b、ANGPTL4、RANKL、APN/CD31的含量与对照组比较无显著性差异(P>0.05);AGA患者外周血中ASC、ASC-b的mRNA表达量与血清中IL-1β、IL-18、TNF-α、PGE_2、IL-6、IL-8、DKK-1、TRAP5b、ANGPTL4、RANKL、APN/CD31的含量呈正相关。结论:痛风性关节炎患者外周血中高表达的ASC及ASCb与炎症反应的激活以及关节的骨破坏密切相关。 展开更多

关键词 痛风性关节炎 凋亡相关斑点样蛋白 炎症反应 骨破坏

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敲低ROCK2基因通过促进线粒体融合并抑制其分裂改善AD小鼠认知功能及减轻神经细胞凋亡

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作者 郭敏芳 张慧宇 +7 位作者 章培军 于婧文 孟涛 李苏垚 宋丽娟 柴智 尉杰忠 马存根 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期701-707,共7页

目的 探讨敲低Rho相关螺旋卷曲激酶2(ROCK2)基因对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠认知功能的影响及其机制。方法 APP/PS1双转基因小鼠随机分为AD模型组(AD组)、 ROCK2基因敲低组(shROCK2组)、 ROCK2基因敲低对照组(shNC... 目的 探讨敲低Rho相关螺旋卷曲激酶2(ROCK2)基因对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠认知功能的影响及其机制。方法 APP/PS1双转基因小鼠随机分为AD模型组(AD组)、 ROCK2基因敲低组(shROCK2组)、 ROCK2基因敲低对照组(shNC组),同龄野生型C57BL/6小鼠作为野生型对照(WT组)。Morris水迷宫和Y迷宫实验测试小鼠认知功能,尼氏染色检测神经元形态,免疫荧光组织化学染色检测磷酸化动力蛋白相关蛋白1(p-Drp1)和线粒体融合蛋白1(Mfn1)的表达,Western blot法检测海马组织ROCK2、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关蛋白X(BAX)、 p-Drp1、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、视神经萎缩因子1(OPA1)、 Mfn1和Mfn2的蛋白表达。结果 与AD组小鼠相比,shROCK2组小鼠ROCK2表达明显减少;其认知功能明显改善,海马CA3和DG区神经元数量增加,尼氏体染色深;c-caspase-3和BAX表达降低,同时Bcl2表达升高;线粒体分裂相关蛋白p-Drp1和Fis1的表达减少,而线粒体融合相关蛋白OPA1、 Mfn1和Mfn2的表达增加。结论 敲低ROCK2可以显著改善APP/PS1小鼠的认知功能,并抑制神经细胞凋亡,其机制可能与促进线粒体融合并抑制其分裂有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠 Rho相关螺旋卷曲激酶2(ROCK2) 认知障碍 凋亡 线粒体动力学

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KLF5转录因子抑制TRAIL诱导PC-3前列腺癌细胞凋亡的分子机制 被引量：3

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作者 杨超 石琦 +2 位作者 马建斌 郭鹏 贺大林 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期206-209,共4页

目的探究通过抑制KLF5表达促进TRAIL诱导的前列腺癌PC-3细胞凋亡的分子机制。方法在TRAIL诱导下,使用MTT实验、流式细胞实验、Western blot及qRT-PCR检测KLF5敲低组与对照组的PC-3细胞在细胞活性、凋亡比例及凋亡相关标志物的表达。结果... 目的探究通过抑制KLF5表达促进TRAIL诱导的前列腺癌PC-3细胞凋亡的分子机制。方法在TRAIL诱导下,使用MTT实验、流式细胞实验、Western blot及qRT-PCR检测KLF5敲低组与对照组的PC-3细胞在细胞活性、凋亡比例及凋亡相关标志物的表达。结果在PC-3细胞中抑制KLF5表达后,TRAIL诱导下的细胞凋亡明显增加,TRAIL受体DR4、DR5表达上升,凋亡抑制因子c-FLIP蛋白表达下调,但是其mRNA表达水平不变。结论抑制KLF5,可以通过上调TRAIL受体、下调c-FLIP蛋白表达的途径,促进TRAIL诱导的前列腺癌PC-3细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。使用小干扰RNA或小分子药物抑制KLF5表达,可能是潜在的激素非敏感前列腺癌治疗手段。 展开更多

关键词 前列腺癌 Krüppel样因子5(KLF5) 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL) 凋亡 细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)

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玉屏风合二陈散减少咳嗽变异性哮喘炎症反应的机制研究

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作者 于素平 任献青 +5 位作者 徐炎 宋桂华 张岩 吕伟刚 陈小松 彭明浩 《世界中医药》 北大核心 2025年第10期1694-1698,共5页

目的:探索玉屏风合二陈散靶向NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)减轻咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠炎症反应的机制。方法:健康雄性大鼠分为空白组、模型组、地塞米松组、玉屏风合二... 目的:探索玉屏风合二陈散靶向NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)减轻咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠炎症反应的机制。方法:健康雄性大鼠分为空白组、模型组、地塞米松组、玉屏风合二陈散组,使用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝造模,苏木精-伊红(HE)染色检测肺组织炎症程度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素(IL-1β)和IL-18炎症介质水平,蛋白质印迹法(WB)和实时荧光定量聚合酶链反应检测NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白和基因表达水平。结果:玉屏风合二陈散可减轻肺组织炎症反应,可降低CVA大鼠血清中IL-1β和IL-18炎症介质水平,降低肺组织中NLRP3、ASC、Caspase-1的基因和蛋白表达。结论:玉屏风合二陈散可通过降低NLRP3、Caspase-1、ASC表达,减轻炎症反应,发挥治疗CVA的作用。 展开更多

关键词 玉屏风散 二陈散 大鼠 咳嗽变异性哮喘 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 胱天蛋白酶-1 凋亡相关斑点样蛋白 炎症反应

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急性白血病患者NLRP3、ASC及AIM2炎性复合体的表达及意义 被引量：6

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作者 郑永亮 钟思思 +1 位作者 辛柳燕 陈懿建 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期358-362,共5页

目的:检测炎性复合体隐热蛋白(NLR family,pyrin domain containing 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck like protein containing a CRAD,ASC)及黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)在急性白血病患者... 目的:检测炎性复合体隐热蛋白(NLR family,pyrin domain containing 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck like protein containing a CRAD,ASC)及黑色素瘤缺乏因子2(absent in melanoma 2,AIM2)在急性白血病患者血浆中的表达水平,并探究其意义。方法:收集2013年7月至2014年7月赣南医学院第一附属医院血液科住院的19例急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)和41例急性非淋巴细胞白血病(acute non-lymphocytic leukemia,ANLL)共60例AL患者(AL组)以及同期20例非恶性血液病患者(对照组)外周血液标本,其中AL组又分为急性白血病初治组、复发组及缓解组各20例。采用酶联免疫吸附剂测定法(enzymelinked immunosorbnent assay,ELISA)检测外周血血浆中NLRP3、ASC及AIM2的表达水平。结果:NLRP3、ASC及AIM2在对照组及AL缓解组患者血浆中表达水平显著高于初治组及复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。在ALL与ANLL组表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:炎性复合体在AL患者中表达受抑,可能起到了抗白血病免疫的作用。对炎性复合体的检测可能为急性白血病的早期诊断和疗效判定提供实验室依据。 展开更多

关键词 急性白血病 人隐热蛋白 人凋亡相关斑点样蛋白 人黑色素瘤缺乏因子2

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金银花提取液通过调控NLRP3/ASC/caspase-1信号通路对溃疡性结肠炎大鼠肠道黏膜的影响 被引量：16

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作者 葛柳青 周峰 +1 位作者 王晓兵 聂家艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期2723-2728,共6页

目的:探讨金银花提取液通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)/含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道黏膜的影响。方法:随机选取1... 目的:探讨金银花提取液通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3(NLRP3)/含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道黏膜的影响。方法:随机选取10只大鼠为对照组,另取55只大鼠在肛门约8 cm结肠处注射含5%TNBS和50%乙醇的混合液(4 ml/kg)构建大鼠UC模型,将造模成功的50只大鼠分为UC组、金银花低、中、高剂量组和金银花+NSS(NLRP3激活剂)组,每组10只。金银花低、中、高剂量组分别灌胃给予40、80、120 mg/(kg·d)金银花提取液,金银花+NSS组灌胃给予120 mg/(kg·d)金银花提取液和4 mg/(kg·d)NSS,对照组、UC组灌胃给予等体积生理盐水。观察大鼠一般情况,末次给药24 h后腹主动脉取血,处死大鼠,收集结肠组织,量取结肠长度。试剂盒检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、TNF-α、IL-6水平;HE染色检测大鼠结肠黏膜病理学变化;RT-PCR和Western blot检测大鼠肠道黏膜NLRP3/ASC/caspase-1通路mRNA和蛋白表达。结果:与对照组比较,UC组大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤程度、血清LDH、MDA、TNF-α、IL-6水平及结肠黏膜组织NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达显著升高,结肠长度、血清SOD水平显著降低(P<0.05);与UC组比较,金银花低、中、高剂量组DAI、结肠黏膜损伤程度、LDH、MDA、TNF-α、IL-6水平及NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达显著降低,结肠长度、血清SOD水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05);与金银花高剂量组比较,金银花+NSS组DAI、结肠黏膜损伤程度、LDH、MDA、TNF-α、IL-6水平及NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β mRNA和蛋白表达显著升高,结肠长度、SOD水平显著降低(P<0.05)。结论:金银花提取液可能通过抑制NLRP3/ASC/caspase-1信号通路激活缓解UC大鼠肠道黏膜损伤。 展开更多

关键词 金银花 核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族吡啉结构域蛋白3 含CARD结构域的凋亡相关颗粒样蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 溃疡性结肠炎 肠道黏膜

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原发性干燥综合征患者的血清IL-38水平及其临床意义

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作者 周晓娟 龚翠婷 张继云 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2025年第2期205-213,共9页

目的:观察并评估血清白介素-38(interleukin-38,IL-38)在原发性干燥综合征(primary sjogren′s syndrome,pSS)患者中的水平及临床意义。方法:纳入pSS患者53例作为pSS组,健康人群30例作为对照组,收集相应的临床资料,检测IL-38、凋亡相关... 目的:观察并评估血清白介素-38(interleukin-38,IL-38)在原发性干燥综合征(primary sjogren′s syndrome,pSS)患者中的水平及临床意义。方法:纳入pSS患者53例作为pSS组,健康人群30例作为对照组,收集相应的临床资料,检测IL-38、凋亡相关斑点样蛋白(pyrin and caspase recruitment domain containing,PYCARD)及IL-6水平。采用两独立样本t检验、Wilcoxon秩和检验比较IL-38的水平,Pearson相关系数评价pSS与IL-38的相关性,Logistic回归分析pSS的独立危险因素,ROC曲线评价IL-38的预测价值。结果:①pSS患者血清IL-38水平明显低于健康对照(healthy control,HC)组(P<0.0001)、疾病活动组低于疾病稳定组及HC组(P<0.0001),PYDARD水平在pSS组显著高于HC组(P<0.0001)、疾病活动组PYCARD高于稳定组及HC组(P<0.0001);pSS合并肺间质病变组患者IL-38水平低于pSS不合并肺间质病变组(P<0.05),PYCARD水平高于不合并肺间质病变组(P<0.001);抗SSA抗体阳性组、抗SSB抗体阳性组患者血清IL-38浓度均低于阴性组(P<0.05);而PYCARD在抗体阳性组高于抗体阴性组(P<0.01)。②IL-38与C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、欧洲抗风湿病联盟干燥综合征疾病活动指数(EULAR sjogren′s syndrome disease activity index,ESSDAI)评分、IL-6呈负相关(P<0.05);PYCARD与CRP、ESR、RF、ESSDAI评分、IL-6正相关,(P<0.05)。③IL-38和PYCARD之间存在负相关(P=0.0001),单因素Logistic回归结果显示,血清IL-38是pSS发生的保护因素(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血清IL-38预测pSS的敏感度为86.70%,特异度为79.20%,曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.89;IL-38联合PYCARD诊断pSS的敏感度为81.10%,特异度为83.30%,AUC为0.90。结论:IL-38水平在pSS中检测异常,并且与临床指标及炎症因子IL-6、PYCARD等相关,对pSS有一定预测价值。因此,IL-38在pSS中具有潜在的临床意义,有望成为新的血清学标志物。 展开更多

关键词 干燥综合征 IL-38 凋亡相关斑点样蛋白 血清学标志物

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五味子乙素对帕金森病小鼠神经炎症的影响

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作者 贾璐 肖琪 +5 位作者 张仲瑾 王青 李彦青 樊慧杰 柴智 马存根 《世界中医药》 北大核心 2025年第3期424-428,共5页

目的:探讨五味子乙素(Sch B)对帕金森病(PD)模型小鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法:将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组和Sch B组,每组10只。模型组和Sch B组采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)... 目的:探讨五味子乙素(Sch B)对帕金森病(PD)模型小鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。方法:将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组和Sch B组,每组10只。模型组和Sch B组采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立PD模型,正常组注射等量生理盐水。除正常组,Sch B组小鼠从造模第1天给予80 mg/(kg·d)Sch B灌胃,模型组和正常组小鼠予以等体积0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,连续干预14 d。采用爬杆实验观察小鼠行为学表现,采用免疫荧光染色法检测小鼠黑质区离子钙接头蛋白(Iba-1)表达,采用蛋白质免疫印迹法检测黑质区CD 11b、白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素1β(IL-1β)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、剪切的胱天蛋白酶-1(cleaved-Caspase 1)和N端-Gasdermin D蛋白(GSDMD-N)表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠爬杆时间明显延长(P<0.01),Iba-1荧光强度显著增强(P<0.01),CD 11b、IL-18、IL-1β、NLRP3、ASC、cleaved-Caspase 1和GSDMD-N蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,Sch B组小鼠爬杆时间显著减少,Iba-1荧光强度显著减弱,同时CD 11b、IL-18、IL-1β、NLRP3、ASC、cleaved-Caspase1和GSDMD-N蛋白表达显著减少(P<0.05或P<0.01)。结论:Sch B能够减轻MPTP诱导的PD小鼠神经炎症,这可能与干预NLRP3信号通路有关。 展开更多

关键词 五味子乙素 帕金森病 MPTP 神经炎症 NOD样受体蛋白3 凋亡相关斑点样蛋白 剪切的胱天蛋白酶-1 N端-Gasdermin D蛋白

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