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miR-497阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制SGC-7901人胃癌失巢凋亡抵抗细胞的生长和转移 被引量:1
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作者 禹莉 许颖 +5 位作者 杨靖瑞 高榴 李海翔 王姿涵 张兆君 凌云志 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期617-625,共9页
目的 探讨微小RNA 497(miR-497)在胃癌转移中的作用及机制。方法 SGC-7901胃癌亲本细胞培养在超低黏附环境中,重新贴壁后建立SGC-7901细胞失巢凋亡抵抗模型,集落形成实验、流式细胞术、 TranswellTM实验和划痕愈合实验检测其细胞生物学... 目的 探讨微小RNA 497(miR-497)在胃癌转移中的作用及机制。方法 SGC-7901胃癌亲本细胞培养在超低黏附环境中,重新贴壁后建立SGC-7901细胞失巢凋亡抵抗模型,集落形成实验、流式细胞术、 TranswellTM实验和划痕愈合实验检测其细胞生物学行为与亲本细胞的差异、荧光定量PCR检测miR-497表达、 Western blot法检测无翅基因/β联蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白如波形蛋白(vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)等表达的变化;亲本细胞和凋亡抵抗SGC-7901细胞转染miR-497抑制物(miR-497 inhibitor)或miR-497模拟物(miR-497 mimic), CCK-8法检测其增殖活性、 TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力、 TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测细胞迁移能力、 Western blot法检测Wnt1、 β-catenin、 E-cadherin、 vimentin蛋白表达的变化。通过在失巢凋亡抵抗SGC-7901细胞中转染miR-497 mimic,在裸鼠皮下接种,测量并记录肿瘤组织的体积及质量的变化,Western blot法检测Wnt1、 β-catenin、 E-cadherin、 vimentin蛋白表达的变化。结果 与亲本细胞相比,SGC-7901胃癌失巢凋亡抵抗细胞增殖速度更快、集落形成更强,凋亡率更低,侵袭和迁移能力更强,miR-497表达明显下降。下调miR-497后细胞增殖能力显著增强,侵袭、迁移能力明显增强,Wnt1、 β-catenin蛋白表达量显著增加,vimentin表达显著增加,E-cadherin表达下降,而上调miR-497表达结果相反。miR-497过表达组的肿瘤组织生长速度、肿瘤的体积与质量明显低于对照组;Wnt1、 β-catenin、 vimentin蛋白表达量显著下降,而E-cadherin表达明显上调。结论miR-497在SGC-7901失巢凋亡抵抗细胞中低表达,miR-497通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活化和EMT,抑制胃癌细胞的生长和转移。 展开更多
关键词 miR-497 SGC-7901细胞 WNT β联蛋白(β-catenin) 失巢凋亡抵抗
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SATB1通过PI3K/Akt信号通路在哌立福新对胃癌失巢凋亡抵抗细胞作用机制中的研究 被引量:6
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作者 秦玉萍 高迎新 +3 位作者 马熙萌 杜瑶 王新 禹莉(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期273-281,共9页
目的:探讨人胃癌细胞失巢凋亡抵抗的机制,研究哌立福新对胃癌细胞凋亡抵抗的可能治疗作用以及SATB1通过PI3K/Akt信号通路在哌立福新对胃癌失巢凋亡抵抗细胞中的作用机制。方法:在超低黏附条件下培养胃癌AGS亲本细胞,建立AGS细胞失巢凋... 目的:探讨人胃癌细胞失巢凋亡抵抗的机制,研究哌立福新对胃癌细胞凋亡抵抗的可能治疗作用以及SATB1通过PI3K/Akt信号通路在哌立福新对胃癌失巢凋亡抵抗细胞中的作用机制。方法:在超低黏附条件下培养胃癌AGS亲本细胞,建立AGS细胞失巢凋亡抵抗模型,检测细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力、PI3K/Akt信号通路相关蛋白以及MMP-2、SATB1的表达与亲本细胞的差异;通过MTT、流式细胞术、划痕试验、Transwell试验和Western blot等检测哌立福新对凋亡抵抗AGS细胞生物学行为的影响,抑制信号传导通路及干扰SATB1基因的表达对胃癌失巢凋亡抵抗AGS细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响。结果:成功构建了胃癌AGS细胞失巢凋亡抵抗模型。与亲代细胞相比,胃癌AGS细胞失巢凋亡模型的生长速度更快,凋亡率更低,迁移和侵袭能力更强,PIK3CA、Akt mRNA表达增加,PTEN mRNA表达减少,p-Akt、SATB1、MMP-2的蛋白表达增加,PTEN蛋白表达减少。不同浓度的哌立福新作用于凋亡抵抗AGS细胞后,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭,p-Akt、MMP-2蛋白表达随哌立福新浓度增加而下降,PTEN蛋白表达逐渐增加。此外,发现哌立福新降低了SATB1蛋白在凋亡抵抗AGS细胞中的表达,SATB1的下调增强了哌立福新介导的抗肿瘤能力。结论:哌立福新可通过PI3K/Akt途径对凋亡抵抗AGS细胞发挥抗癌作用,并且下调SATB1的表达可增强抗癌作用。本次研究可能为胃癌转移提供一种新的潜在的抗肿瘤治疗策略。 展开更多
关键词 哌立福新 AGS PI3K/AKT信号通路 SATB1 失巢凋亡抵抗
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恶性淋巴瘤细胞对TRAIL诱导凋亡的抵抗及其分子机制
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作者 赵天锁 史玉荣 +1 位作者 任贺 郝继辉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期156-158,162,共4页
目的:探讨在体外恶性淋巴瘤细胞对TRAIL(TNF—related apoptosis—inducing ligand)诱导凋亡的抵抗作用及其分子机制。方法:TRAIL处理恶性淋巴瘤U937细胞后,在不同的时间采用MTT法检测药物对细胞的毒性作用;流式细胞术检测细胞周... 目的:探讨在体外恶性淋巴瘤细胞对TRAIL(TNF—related apoptosis—inducing ligand)诱导凋亡的抵抗作用及其分子机制。方法:TRAIL处理恶性淋巴瘤U937细胞后,在不同的时间采用MTT法检测药物对细胞的毒性作用;流式细胞术检测细胞周期;Western—blot法检测Bax蛋白质水平变化;实时荧光定量RT—PCR法检测BaxmRNA的表达情况。结果:TRAIL的浓度在500μg/L时可抑制U937的细胞生存,但其抑制率低于正常对照细胞Hmy2.ciR;TRAIL阻滞U937细胞周期于G0/G,期;但这种阻滞效应较Hmy2.ciR细胞明显减弱。Western—blot法检测TRAIL处理的U937细胞Bax蛋白表达水平下降;实时荧光定量RT—PCR法检测BaxmRNA的表达水平却未见差异性改变。结论:TRAIL在诱导恶性淋巴瘤细胞凋亡过程中出现抵抗,这种作用可能与促凋亡蛋白Bax表达水平下降有关。Bax蛋白表达水平的下降可能是由于翻译后修饰导致Bax蛋白降解。 展开更多
关键词 TRAIL 淋巴瘤细胞 凋亡抵抗
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细胞衰老与特发性肺纤维化药物治疗研究进展 被引量:1
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作者 任正肖 张颖颖 +2 位作者 车萍 李紫薇 朱庆均 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期601-605,共5页
特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种病因不明的破坏性肺部疾病,它的特点是细胞外基质蛋白(如胶原蛋白和纤连蛋白)在肺间质中沉积,导致呼吸衰竭。我们对IPF的病理生物学的理解仍然不完整;然而,人们普遍认为,衰老... 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种病因不明的破坏性肺部疾病,它的特点是细胞外基质蛋白(如胶原蛋白和纤连蛋白)在肺间质中沉积,导致呼吸衰竭。我们对IPF的病理生物学的理解仍然不完整;然而,人们普遍认为,衰老是该疾病的主要危险因素。衰老是一个复杂的过程,以不可逆的细胞周期停滞和分泌衰老相关的表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)为特征,导致衰老细胞不断累积和炎症发生。细胞衰老与IPF疾病进展密切相关。该文主要探讨细胞衰老的分子机制,端粒缩短、线粒体功能障碍、自噬不足及细胞凋亡抵抗等细胞衰老相关的各种诱发因素在IPF发病中的作用以及用于治疗IPF疾病的抗衰老药物,为将来治疗IPF提供理论依据和治疗方法。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 细胞衰老 衰老相关表型 端粒缩短 线粒体功能障碍 自噬不足 细胞凋亡抵抗 治疗
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senex基因在急性髓系白血病中的表达及意义 被引量:2
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作者 曹艳芸 陶千山 +3 位作者 王会平 胡林辉 张家奎 翟志敏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期401-405,共5页
目的探讨senex基因在急性髓系白血病(AML)中的表达水平,并探讨其在AML发生发展中的意义。方法应用实时荧光定量PCR检测senex基因在21例初诊AML患者(初诊组)、27例骨髓完全缓解的AML患者(缓解组)、19例骨髓复发的AML患者(复发组)以及12... 目的探讨senex基因在急性髓系白血病(AML)中的表达水平,并探讨其在AML发生发展中的意义。方法应用实时荧光定量PCR检测senex基因在21例初诊AML患者(初诊组)、27例骨髓完全缓解的AML患者(缓解组)、19例骨髓复发的AML患者(复发组)以及12例对照者(对照组)的骨髓单个核细胞中的表达情况,比较4组之间的基因表达水平差异,并分析senex基因表达水平与临床特征和疗效的关联性。结果初诊组senex基因表达水平高于缓解组(4.06±2.72 vs 2.52±1.83,P=0.04)和对照组(4.06±2.72 vs 1.22±0.48,P=0.001),复发组senex基因表达水平高于对照组(3.27±2.54 vs 1.22±0.48,P=0.017),且各亚型之间以AML-M3的senex基因表达水平最高。AML患者senex基因mRNA表达水平与骨髓原始细胞比例存在相关性(rs=0.557,P=0.000)。此外分析AML初诊患者的临床特征显示1次化疗缓解的患者(n=14)的senex基因表达显著低于1次化疗未缓解的患者(n=7)(1.77±1.47 vs 4.85±2.20,P=0.003),并且1次化疗未缓解的患者预后均较差。结论 senex基因的异常表达可能与AML的发生发展以及预后密切相关。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 senex 细胞衰老 复发 凋亡抵抗
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细胞衰老诱导的抑制性细胞因子累积对DLBCL细胞功能的影响 被引量:1
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作者 易浏颖 王极宇 +5 位作者 陶千山 完颜智翔 朱凤凤 王会平 王芝涛 翟志敏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第9期1350-1355,共6页
目的探讨细胞衰老在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞抵抗化疗中的作用及机制。方法将入组的DLBCL患者分为初诊(ND)组、完全缓解(CR)组、复发/难治(r/r)组。分别应用HE染色和β-半乳糖苷酶染色法检测淋巴结反应性增生患者、r/r DLBCL患者... 目的探讨细胞衰老在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞抵抗化疗中的作用及机制。方法将入组的DLBCL患者分为初诊(ND)组、完全缓解(CR)组、复发/难治(r/r)组。分别应用HE染色和β-半乳糖苷酶染色法检测淋巴结反应性增生患者、r/r DLBCL患者淋巴结组织衰老情况;用β-半乳糖苷酶染色法检测ND、r/r组DLBCL患者外周血中的衰老情况;用10、20、40 nmol/L的阿霉素(DOX)反复诱导DLBCL细胞株LY8衰老,构建衰老模型;CCK-8法检测衰老模型细胞增殖情况;流式细胞术检测衰老模型细胞凋亡情况;ELISA法检测DLBCL患者血清和衰老模型上清液中细胞因子表达。结果r/r组DLBCL患者淋巴结组织及外周血中的衰老细胞明显增多且血清中白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、IL-35、转化生长因子-β1(TGF-β1)等促炎性和免疫抑制性细胞因子分泌增加;使用40 nmol/L DOX成功诱导LY8细胞衰老,衰老细胞比例24.77%。对对照组及DOX诱导组进行功能检测,结果提示衰老组细胞增殖率低于对照组但高于10 nmol/L和20 nmol/L DOX组(P<0.05);凋亡率高于对照组但低于10 nmol/L和20 nmol/L DOX组(P<0.05)。同时,各组IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1分泌量差异有统计学意义(P<0.05),与对照组比较,衰老组细胞上清液中IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-35、TGF-β1等各种促炎和免疫抑制性细胞因子分泌增加。结论细胞衰老通过诱导抑制性细胞因子累积促进DLBCL细胞凋亡抵抗。 展开更多
关键词 细胞衰老 抑制性细胞因子 弥漫大B细胞淋巴瘤 凋亡抵抗
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