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细胞凋亡抑制因子6(Api6)在高脂肺损伤中的作用研究
被引量:
2
1
作者
龚雪
沈炼桔
+3 位作者
刘丹
叶秀峰
唐任宽
练雪梅
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期40-45,共6页
目的:了解单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响及细胞凋亡抑制因子6(Api6)的表达情况.方法:将8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,分别饲以普通饮食和高脂饮食,14周后获得上述2组小鼠的肺部组织切片,进行油红O染色、HE染色和免疫组化实...
目的:了解单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响及细胞凋亡抑制因子6(Api6)的表达情况.方法:将8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,分别饲以普通饮食和高脂饮食,14周后获得上述2组小鼠的肺部组织切片,进行油红O染色、HE染色和免疫组化实验,观察单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响;提取小鼠肺组织RNA,检测Api6在病变小鼠肺组织中的表达.结果:与普通饮食组小鼠肺组织相比,油红O染色可见高脂饮食组小鼠肺组织有明显的脂质沉积;HE染色和增殖期细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色可见高脂饮食组肺组织肺泡间隔增宽,肺组织炎性细胞浸润,同时增殖期细胞明显增多;Api6在高脂饮食组小鼠肺组织中的表达明显升高.结论:高脂饮食可直接导致小鼠肺组织脂质蓄积和炎性损伤,Api6可能在其发病机制中发挥一定的作用.
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关键词
细胞
凋亡抑制因子6
(Api
6
)
高脂饮食
脂代谢异常
肺
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职称材料
高脂、炎症状态下Api6在巨噬细胞中的表达研究
被引量:
1
2
作者
刘丹
张勇
+2 位作者
李越
龚雪
练雪梅
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期488-493,共6页
目的:凋亡抑制因子6(Apoptosis inhibitor 6,Api6)是清道夫受体富含半胱氨酸残基家族新成员,在免疫反应、肿瘤发生中发挥着重要的作用;但作为清道夫受体,Api6在脂质代谢中的作用尚未得到深入研究。方法:本文采用脂多糖(Lipopolysacchari...
目的:凋亡抑制因子6(Apoptosis inhibitor 6,Api6)是清道夫受体富含半胱氨酸残基家族新成员,在免疫反应、肿瘤发生中发挥着重要的作用;但作为清道夫受体,Api6在脂质代谢中的作用尚未得到深入研究。方法:本文采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和氧化低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)刺激细胞建立炎症和高脂模型,定量RT-PCR检测初步探讨了Api6在体外培养的2种单核/巨噬细胞株:RAW264.7细胞和THP-1细胞中的表达水平。结果:研究发现200ng/ml的LPS和100μg/ml的oxLDL处理可以导致体外培养的2种巨噬细胞出现异常的脂质蓄积,清道夫受体SRA在RAW264.7细胞和THP-1细胞中的表达分别上调了6倍、2.5倍和6倍、44倍。但同样处理条件下,Api6在RAW264.7细胞的表达没有明显上调;而炎症和高脂同时存在时,Api6在THP-1细胞中的表达却上调了2.7倍。结论:不同处理条件下,Api6的表达水平与肝核受体(Nuclearreceptor liver Xreceptor,LXR)受体α亚型的表达水平明显相关;由于缺乏LXRα受体,体外培养的小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞Api6基础表达量较低,因此可以作为载体细胞,用以建立过表达Api6的细胞模型深入研究Api6在脂质代谢中的作用。
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关键词
凋亡抑制因子6
核受体LXR
RAW2
6
4.7细胞
THP-1细胞
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职称材料
Api6在高脂高胆固醇饮食引起肺部炎症中所发挥作用的研究
3
作者
张恋
方严
+2 位作者
陈婷
陈可
练雪梅
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期853-858,共6页
的:研究凋亡抑制园子6(Api6)在高脂高胆固醇饮食所致C57BL/6J小鼠肺部炎症反应中的作 用。方法:6-8周龄的C57BLl6J雄性小鼠喂养于SPF环境中,随机分成2组,分别给予普通饮食和高脂高胆固醇 饮食喂养。喂养16周后收集肺组织并采用免...
的:研究凋亡抑制园子6(Api6)在高脂高胆固醇饮食所致C57BL/6J小鼠肺部炎症反应中的作 用。方法:6-8周龄的C57BLl6J雄性小鼠喂养于SPF环境中,随机分成2组,分别给予普通饮食和高脂高胆固醇 饮食喂养。喂养16周后收集肺组织并采用免疫组织化学和ELISA法鉴定肺组织的炎症状态。实时定量PCR和Western blotting鉴定Api6 mRNA与蛋白的表达水平,流式细胞术检测小鼠支气管肺泡灌洗液细胞凋亡情况。体外培养H噬细胞RAW264.7,流式细胞术检测Api6对氧化型低密度脂蛋白( oxLDL)引起的细胞凋亡的影响。结果:高脂高胆固醇饮食喂养小鼠16周后,C57BL/6J小鼠肺组织出现以巨噬细胞蓄积以及肿瘤坏死因子α和单核细胞趋化蛋白1升高为主的炎症反应。与普通饮食组相比,高脂高胆固醇饮食喂养小鼠肺组织的Api6mRNA和蛋白表 达水平都显著上调(P〈0.01),同时支气管肺泡灌洗液中的巨噬细胞凋亡水平明显下降(P〈0.01)。体外实验证实500μg/L的重组Api6处理RAW264.7细胞可显著抑制oxLDL引起的细胞凋亡(P〈0.05)。结论:高脂高胆固醇饮食可致C57BL/6J小鼠肺组织巨噬细胞蓄积,其机制可能与Api6抑制巨噬细胞的凋亡有关。
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关键词
高脂高胆固醇饮食
凋亡抑制因子6
细胞
凋
亡
氧化型低密度脂蛋白
巨噬细胞
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职称材料
人Api6融合蛋白原核表达系统的构建
4
作者
方严
练雪梅
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期1069-1072,共4页
目的:本研究拟采用蛋白原核表达的方法,诱导表达人Api6(Apoptosis inhibitor 6)融合蛋白,为进一步研究Api6在凋亡抑制、脂质代谢和肿瘤发生中的作用奠定基础。方法:利用PCR技术扩增人Api6基因,将其克隆至原核表达载体ppSUMO,构建重...
目的:本研究拟采用蛋白原核表达的方法,诱导表达人Api6(Apoptosis inhibitor 6)融合蛋白,为进一步研究Api6在凋亡抑制、脂质代谢和肿瘤发生中的作用奠定基础。方法:利用PCR技术扩增人Api6基因,将其克隆至原核表达载体ppSUMO,构建重组质粒ppSUMO-Api6;重组质粒转化原核表达宿主菌E.coli Rosetta感受态;采用蛋白原核表达的方法,不同诱导前菌液浓度,不同温度、不同异丙基硫化半乳糖苷(Isopropy1-β-D-thiogalaotopyrano-side,IPTG)浓度、不同诱导时间,筛选诱导表达Api6重组蛋白的最优条件;Western blot鉴定其表达情况。结果:成功构建重组质粒ppSUMO-Api6;成功诱导Api6重组蛋白的原核表达,表达的最优条件为:OD600=0.5~0.8的重组菌,16℃、0.5 mmol/L IPTG诱导16 h。结论:含有人Api6 cDNA全长序列的重组质粒ppSUMO-Api6,经转化原核表达宿主菌E.coli Rosetta感受态细胞,在诱导前菌液OD600=0.5~0.8、16℃、0.5 mmol/LIPTG、诱导16 h这一优化的诱导条件下,重组菌ppSUMO-Api6-Rosetta可诱导重组蛋白ppSUMO-Api6的原核表达。
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关键词
凋亡抑制因子6
原核表达
融合蛋白
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职称材料
题名
细胞凋亡抑制因子6(Api6)在高脂肺损伤中的作用研究
被引量:
2
1
作者
龚雪
沈炼桔
刘丹
叶秀峰
唐任宽
练雪梅
机构
重庆医科大学公共卫生学院
重庆医科大学病理学教研室
重庆医科大学感染性疾病教育部重点实验室
出处
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期40-45,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30600660)
重庆市教委资助项目(KJ060311)
文摘
目的:了解单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响及细胞凋亡抑制因子6(Api6)的表达情况.方法:将8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,分别饲以普通饮食和高脂饮食,14周后获得上述2组小鼠的肺部组织切片,进行油红O染色、HE染色和免疫组化实验,观察单纯高脂饮食对小鼠肺组织形态学的影响;提取小鼠肺组织RNA,检测Api6在病变小鼠肺组织中的表达.结果:与普通饮食组小鼠肺组织相比,油红O染色可见高脂饮食组小鼠肺组织有明显的脂质沉积;HE染色和增殖期细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色可见高脂饮食组肺组织肺泡间隔增宽,肺组织炎性细胞浸润,同时增殖期细胞明显增多;Api6在高脂饮食组小鼠肺组织中的表达明显升高.结论:高脂饮食可直接导致小鼠肺组织脂质蓄积和炎性损伤,Api6可能在其发病机制中发挥一定的作用.
关键词
细胞
凋亡抑制因子6
(Api
6
)
高脂饮食
脂代谢异常
肺
Keywords
Api
6
high cholesterol diet
mice
lung
分类号
Q343 [生物学—遗传学]
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职称材料
题名
高脂、炎症状态下Api6在巨噬细胞中的表达研究
被引量:
1
2
作者
刘丹
张勇
李越
龚雪
练雪梅
机构
重庆医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室
重庆医科大学脂质研究中心、感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期488-493,共6页
基金
国家自然科学基金项目(编号:NSFC30600660)
教育部留学回国人员科研启动基金(教外司留2007-1108号)
文摘
目的:凋亡抑制因子6(Apoptosis inhibitor 6,Api6)是清道夫受体富含半胱氨酸残基家族新成员,在免疫反应、肿瘤发生中发挥着重要的作用;但作为清道夫受体,Api6在脂质代谢中的作用尚未得到深入研究。方法:本文采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和氧化低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)刺激细胞建立炎症和高脂模型,定量RT-PCR检测初步探讨了Api6在体外培养的2种单核/巨噬细胞株:RAW264.7细胞和THP-1细胞中的表达水平。结果:研究发现200ng/ml的LPS和100μg/ml的oxLDL处理可以导致体外培养的2种巨噬细胞出现异常的脂质蓄积,清道夫受体SRA在RAW264.7细胞和THP-1细胞中的表达分别上调了6倍、2.5倍和6倍、44倍。但同样处理条件下,Api6在RAW264.7细胞的表达没有明显上调;而炎症和高脂同时存在时,Api6在THP-1细胞中的表达却上调了2.7倍。结论:不同处理条件下,Api6的表达水平与肝核受体(Nuclearreceptor liver Xreceptor,LXR)受体α亚型的表达水平明显相关;由于缺乏LXRα受体,体外培养的小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞Api6基础表达量较低,因此可以作为载体细胞,用以建立过表达Api6的细胞模型深入研究Api6在脂质代谢中的作用。
关键词
凋亡抑制因子6
核受体LXR
RAW2
6
4.7细胞
THP-1细胞
Keywords
Apoptosis inhibitor
6
Liver Xreceptor
Raw2
6
4.7cell
THP-1 cell
分类号
R364.2 [医药卫生—病理学]
在线阅读
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职称材料
题名
Api6在高脂高胆固醇饮食引起肺部炎症中所发挥作用的研究
3
作者
张恋
方严
陈婷
陈可
练雪梅
机构
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室脂质研究中心
重庆医科大学公共卫生与管理学院营养与食品卫生学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期853-858,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.NSFC30600660
No.30911130188)
+2 种基金
重庆市自然科学基金资助项目(No.CSTC
2011BB5128)
教育部新世纪优秀人才支持计划(No.NCET-10-0997)
文摘
的:研究凋亡抑制园子6(Api6)在高脂高胆固醇饮食所致C57BL/6J小鼠肺部炎症反应中的作 用。方法:6-8周龄的C57BLl6J雄性小鼠喂养于SPF环境中,随机分成2组,分别给予普通饮食和高脂高胆固醇 饮食喂养。喂养16周后收集肺组织并采用免疫组织化学和ELISA法鉴定肺组织的炎症状态。实时定量PCR和Western blotting鉴定Api6 mRNA与蛋白的表达水平,流式细胞术检测小鼠支气管肺泡灌洗液细胞凋亡情况。体外培养H噬细胞RAW264.7,流式细胞术检测Api6对氧化型低密度脂蛋白( oxLDL)引起的细胞凋亡的影响。结果:高脂高胆固醇饮食喂养小鼠16周后,C57BL/6J小鼠肺组织出现以巨噬细胞蓄积以及肿瘤坏死因子α和单核细胞趋化蛋白1升高为主的炎症反应。与普通饮食组相比,高脂高胆固醇饮食喂养小鼠肺组织的Api6mRNA和蛋白表 达水平都显著上调(P〈0.01),同时支气管肺泡灌洗液中的巨噬细胞凋亡水平明显下降(P〈0.01)。体外实验证实500μg/L的重组Api6处理RAW264.7细胞可显著抑制oxLDL引起的细胞凋亡(P〈0.05)。结论:高脂高胆固醇饮食可致C57BL/6J小鼠肺组织巨噬细胞蓄积,其机制可能与Api6抑制巨噬细胞的凋亡有关。
关键词
高脂高胆固醇饮食
凋亡抑制因子6
细胞
凋
亡
氧化型低密度脂蛋白
巨噬细胞
Keywords
High-fat high-cholesterol diet
Apoptosis inhibitor
6
Apoptosis
Oxidized low-density lipopro-tein
Macrophages
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
人Api6融合蛋白原核表达系统的构建
4
作者
方严
练雪梅
机构
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室脂质研究中心
重庆医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第9期1069-1072,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30600660)
文摘
目的:本研究拟采用蛋白原核表达的方法,诱导表达人Api6(Apoptosis inhibitor 6)融合蛋白,为进一步研究Api6在凋亡抑制、脂质代谢和肿瘤发生中的作用奠定基础。方法:利用PCR技术扩增人Api6基因,将其克隆至原核表达载体ppSUMO,构建重组质粒ppSUMO-Api6;重组质粒转化原核表达宿主菌E.coli Rosetta感受态;采用蛋白原核表达的方法,不同诱导前菌液浓度,不同温度、不同异丙基硫化半乳糖苷(Isopropy1-β-D-thiogalaotopyrano-side,IPTG)浓度、不同诱导时间,筛选诱导表达Api6重组蛋白的最优条件;Western blot鉴定其表达情况。结果:成功构建重组质粒ppSUMO-Api6;成功诱导Api6重组蛋白的原核表达,表达的最优条件为:OD600=0.5~0.8的重组菌,16℃、0.5 mmol/L IPTG诱导16 h。结论:含有人Api6 cDNA全长序列的重组质粒ppSUMO-Api6,经转化原核表达宿主菌E.coli Rosetta感受态细胞,在诱导前菌液OD600=0.5~0.8、16℃、0.5 mmol/LIPTG、诱导16 h这一优化的诱导条件下,重组菌ppSUMO-Api6-Rosetta可诱导重组蛋白ppSUMO-Api6的原核表达。
关键词
凋亡抑制因子6
原核表达
融合蛋白
Keywords
Api
6
prokaryotic expression
fusion protein
分类号
R151.2 [医药卫生—营养与食品卫生学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞凋亡抑制因子6(Api6)在高脂肺损伤中的作用研究
龚雪
沈炼桔
刘丹
叶秀峰
唐任宽
练雪梅
《西南大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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职称材料
2
高脂、炎症状态下Api6在巨噬细胞中的表达研究
刘丹
张勇
李越
龚雪
练雪梅
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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职称材料
3
Api6在高脂高胆固醇饮食引起肺部炎症中所发挥作用的研究
张恋
方严
陈婷
陈可
练雪梅
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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职称材料
4
人Api6融合蛋白原核表达系统的构建
方严
练雪梅
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
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