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改良快速冷冻载体冻融人类稀少精子的实验研究 被引量:3
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作者 陈国勇 李文 《发育医学电子杂志》 2020年第2期122-128,共7页
目的探讨人类稀少精子冷冻改良快速冷冻载体的实验研究,为重度少弱精子症患者的精子冷冻保存提供参考。方法2018年12月至2019年8月,在联勤保障部队第九〇〇医院生殖中心就诊的男性不育症患者:根据精液质量分为正常精液组和少弱精液组,... 目的探讨人类稀少精子冷冻改良快速冷冻载体的实验研究,为重度少弱精子症患者的精子冷冻保存提供参考。方法2018年12月至2019年8月,在联勤保障部队第九〇〇医院生殖中心就诊的男性不育症患者:根据精液质量分为正常精液组和少弱精液组,每个实验样本选取3份精液分别进行充分混合,将混合精液稀释至浓度为(1~2)×10~6/ml,实验共计选取81份正常精液标本混匀稀释形成27个正常精液样本,选取54份少弱精液标本混匀稀释形成18个少弱精子样本。根据不同的冷冻载体各分3组进行精子冷冻:薄片精子冷冻管组(A组),麦管微量体积冷冻组(B组),改良快速冷冻载体组(C组),均采用商品化精子冷冻试剂1∶1混匀,熏蒸法后快速冷冻。比较3种载体冷冻复苏后,精子的活动力、存活率、DNA碎片指数和正常形态变化、精子顶体酶活性等指标变化,以评估改良快速冷冻载体的冷冻效率及安全性。统计学方法采用t检验、ANOVA分析、LSD多重比较。结果正常精液组的3种冷冻方法都会造成精子质量下降。正常精液组的C组的复苏后精子活动力、存活率均高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05)。正常精液组:C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C 3组复苏后精子正常形态率均低于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.05)。少弱精液组:A、B两组复苏后精子DNA碎片指数均高于冷冻前,差异有统计学意义(P<0.01);C组精子DNA碎片指数高于冷冻前,但差异无统计学意义(P=0.068),C组复苏精子DNA碎片指数略低于A和B组,但差异无统计学意义(P>0.05),A、B、C 3组冷冻精子复苏后正常形态率均低于冷冻前,差异无统计学意义(P>0.05)。正常精液组:冷冻前精子顶体酶活性为(123.6±12.8)IU/10~6个精子,复苏后A、B、C 3组顶体酶活性均有下降,分别为(74.7±15.6)、(84.7±13.5)、(91.2±16.2)IU/10~6个精子,差异有统计学意义(F=37.896,P<0.001),从对于精子顶体影响看,B、C组优于A组,差异有统计学意义(P=0.043、P=0.001)。结论改良快速冷冻载体对于稀少精子冷冻保存有一定优势,值得进一步探讨研究。 展开更多
关键词 稀少精子 冷冻保存 冷冻载体 复苏率
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新型卵母细胞载体降温速率的实验研究 被引量:3
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作者 李维杰 王利红 +3 位作者 刘宝林 周新丽 楼伟 吴国荣 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期114-118,共5页
降温速率是决定细胞低温保存效果的关键,而冷冻载体的形式和使用方式对细胞的降温速率有重要影响。本文采用数字示波器、线径80μm的T型热电偶建立高速测温系统,研究了一种新型封闭式卵母细胞冷冻载体以不同的方式从空气插入液氮的降温... 降温速率是决定细胞低温保存效果的关键,而冷冻载体的形式和使用方式对细胞的降温速率有重要影响。本文采用数字示波器、线径80μm的T型热电偶建立高速测温系统,研究了一种新型封闭式卵母细胞冷冻载体以不同的方式从空气插入液氮的降温速率,结果发现载体的降温主要通过对流换热实现;载体横卧时,载体的气孔方向与液氮垂直时降温速率高于气孔与液氮相切时的降温速率;将载体直接插入液氮时的降温速度大于插入后左右摆动的操作方法的降温速率;当采用载体倒置插入时,降温速度高于采用载体正置和横卧的降温速率。当采用载体倒置直接插入时,降温速率最高,可以达到54572±1338 K/min,有利于卵母细胞的玻璃化保存。 展开更多
关键词 冷冻载体 降温速率 液氮 莱顿弗罗斯特效应
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雄性生殖细胞冷冻保存研究进展 被引量:1
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作者 王丽 姜宏 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2013年第6期478-480,共3页
随着单精子及精子细胞卵胞浆内显微受精技术的发展,雄性生殖细胞冷冻保存技术已成为辅助生殖技术的重要内容,为男性因素不育患者的临床助孕提供了物质保障基础。目前,雄性生殖细胞冷冻方法包括程序化冷冻和玻璃化冷冻;冷冻保护剂可有效... 随着单精子及精子细胞卵胞浆内显微受精技术的发展,雄性生殖细胞冷冻保存技术已成为辅助生殖技术的重要内容,为男性因素不育患者的临床助孕提供了物质保障基础。目前,雄性生殖细胞冷冻方法包括程序化冷冻和玻璃化冷冻;冷冻保护剂可有效降低细胞的冷冻损伤,根据其特性分为渗透性保护剂和非渗透性保护剂两大类;冷冻载体中冷冻环、冷冻叶片等应用较广泛。雄性生殖细胞冷冻的效果与冷冻方法、冷冻保护剂和冷冻载体等密切相关。 展开更多
关键词 低温保存 精液保存 精子 精细胞 精子注射 细胞质内 玻璃化冷冻 冷冻载体 冷冻保护剂
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