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两组冷冻保护剂对猪合子期胚胎玻璃化冷冻效果的研究
1
作者 屠平光 范雅婷 +3 位作者 楼芳芳 章啸君 胡旭进 项云 《浙江畜牧兽医》 2025年第2期1-3,共3页
为评价两组玻璃化冷冻保护剂对猪合子期胚胎的冷冻效果,本研究以胞浆内单精子注射技术(ICSI)获得合子期胚胎为实验对象,随机分为20%乙二醇(EG)+20%丙二醇(PROH)组与20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO)组。比较观察两组玻璃化冷冻保护剂... 为评价两组玻璃化冷冻保护剂对猪合子期胚胎的冷冻效果,本研究以胞浆内单精子注射技术(ICSI)获得合子期胚胎为实验对象,随机分为20%乙二醇(EG)+20%丙二醇(PROH)组与20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO)组。比较观察两组玻璃化冷冻保护剂对猪合子期胚胎冷冻后胚胎的复苏效果。结果表明,玻璃化冻融后两组在胚胎形态完整率和存活率上无显著差异,但在胚胎卵裂率和囊胚率上EG+PROH组显著高于EG+DMSO(P<0.05)。研究结果为:对猪合子期胚胎玻璃化冷冻,选用EG+PROH作为冷冻保护剂可获得较好的后期发育效果。 展开更多
关键词 玻璃化冷冻 冷冻保护剂 合子期胚胎 猪
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冷冻保护剂对反复冻融牛肉的品质及微观结构的影响 被引量：3
2
作者 徐静 陶宇婷 +3 位作者 丁珊珊 刘琳欣 潘磊庆 武杰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期209-216,共8页
冷冻保护剂是一种被广泛接受的食品添加剂,可以减少冷冻食品的解冻损失,保持食品结构。该文以牛肉为研究对象,测定了海藻糖、蔗糖和卡拉胶对牛肉在不同冻融次数处理下的解冻损失、蒸煮损失、水分分布、质构和微观结构等指标的影响,探讨... 冷冻保护剂是一种被广泛接受的食品添加剂,可以减少冷冻食品的解冻损失,保持食品结构。该文以牛肉为研究对象,测定了海藻糖、蔗糖和卡拉胶对牛肉在不同冻融次数处理下的解冻损失、蒸煮损失、水分分布、质构和微观结构等指标的影响,探讨了冷冻保护剂对反复冻融牛肉品质的保护作用。结果表明,添加冷冻保护剂可以降低牛肉的解冻损失、抑制pH增长,维持牛肉的水分和肌原纤维结构。与对照组解冻损失(36.22%)相比,经5次冻融后卡拉胶与海藻糖(CT)组、卡拉胶与蔗糖(CS)组及海藻糖与蔗糖(TS)组解冻损失分别为35.75%、35.05%和28.94%。TS组具有最低的解冻损失,水分维持能力最强。此外TS组水分迁移也较少,具有最佳的多次冻融保护效果。CT组的pH值(5.94)和硫代巴比妥酸值(0.60 mg/kg)最低,脂质氧化抑制效果最强。经5次冻融后,添加冷冻保护剂的牛肉,尤其是添加TS和CS牛肉结构更紧密。该研究结果有助于更好地了解糖类在冷冻牛肉中的冷冻保护作用,并且为冷冻保护剂在食品工业中的应用提供参考。 展开更多
关键词 海藻糖 蔗糖 卡拉胶 冷冻保护作用 品质特性 微观结构
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溶藻弧菌冷冻保护剂配方与冻干工艺研究
3
作者 邵新飞 阙莉文 +4 位作者 黄郁葱 蔡佳 黄瑜 王蓓 简纪常 《广东农业科学》 CAS 2024年第6期117-127,共11页
【目的】研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)真空冷冻干燥保护剂配方与优化冻干工艺条件,并探究冷冻干燥对菌株毒力及药物敏感性的影响,为菌种在冷冻干燥保藏上的应用提供理论依据。【方法】采用真空冷冻干燥技术,以溶藻弧菌HY9901为... 【目的】研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)真空冷冻干燥保护剂配方与优化冻干工艺条件,并探究冷冻干燥对菌株毒力及药物敏感性的影响,为菌种在冷冻干燥保藏上的应用提供理论依据。【方法】采用真空冷冻干燥技术,以溶藻弧菌HY9901为研究对象,通过单因素试验及正交试验,探究L-谷氨酸钠、海藻糖、脱脂乳、葡萄糖、甘露醇、甘氨酸6种单一保护剂对菌株活性的影响,筛选最佳冷冻保护剂复配配方,并研究菌液浓度、预冻时间、预冻温度及复水介质4个因素对菌株冻干工艺的影响,优化溶藻弧菌冻干工艺条件。同时,通过储藏试验、半数致死量(LD_(50))试验和药敏试验,探究冻干菌株的活性变化规律及其生物特性。【结果】6种单一保护剂对溶藻弧菌冻干的保护效果存在显著差异,其效果从强到弱依次为:L-谷氨酸钠、海藻糖、脱脂乳、葡萄糖、甘露醇、甘氨酸;菌株最佳冷冻干燥保护剂复配配方为海藻糖50 g/L+L-谷氨酸钠50 g/L+脱脂乳50 g/L,其存活率为62.12%,与单一保护剂的保护效果差异显著;冻干工艺最适条件:菌液浓度1×10~8~10~9 CFU/mL、预冻时间3 h、预冻温度-80℃、复水介质为PBS或50 g/L脱脂乳,此条件下菌株存活率可达到最大值(63.72%)。最佳冻干条件下,菌株储藏60 d期间,其活性无显著差异;菌株冻干前后的LD_(50)分别为1.22×10~8、1.20×10~8 CFU/mL,LD_(50)无显著差异。菌株在冻干前后的药敏抑菌圈直径无显著差异,对氟苯尼考、氯霉素、环丙沙星等药物均表现敏感;对新霉素、卡那霉素均表现中度敏感;对丁胺卡那、哌拉西林等药物均表现耐药。【结论】溶藻弧菌HY9901的冷冻干燥复配配方为海藻糖50 g/L+L-谷氨酸钠50 g/L+脱脂乳50 g/L,冻干工艺条件为菌液浓度1×10~8~10~9 CFU/mL、预冻时间3 h、预冻温度-80℃、复水介质为PBS或50 g/L脱脂乳,该配方及工艺合理可行,具有良好的储藏性及生物稳定性。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 冷冻干燥 冷冻保护剂 冻干工艺 毒力 药敏试验
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冷冻保护剂及预冷时间对河蟹精子体外冷冻保存的影响 被引量：15
4
作者 陈东华 李艳东 +4 位作者 贾林芝 厉小波 王立人 曲迪 王群 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期579-585,共7页
本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮... 本文以甘油、二甲亚砜(DMSO)为冷冻保护剂,采用两步降温法,以精子存活率和DNA损伤程度为检验其冷冻效果的评价指标,研究了冷冻保护剂和预冷时间对河蟹Eriocheir sinensis精子冷冻保存效果的影响。胰蛋白酶消化法获得河蟹游离精子,液氮冷冻保存8h以上,精子保存密度为107个/mL,伊红染色法检测精子存活率,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测精子DNA损伤。实验共设置10个组,分别为不同浓度的单一冷冻保护剂(每种保护剂的体积百分比分别为5%、10%、12.5%、15%)和两种保护剂组合(两种保护剂在同一实验组中的体积百分比含量均为5%、10%)。结果显示,12.5%甘油的保存效果最佳,精子存活率达到62.60%。在此基础上,以10%甘油作为冷冻保护剂,设置5、10、20、30、40min 5个时间梯度,研究了预冷时间对精子冷冻保存效果的影响。结果显示预冷时间的长短对精子冷冻保存效果的影响显著,当预冷时间低于20min时,精子大量死亡,且精子DNA严重损伤;当预冷时间超过30min时,精子存活率明显提高,精子DNA损伤明显减弱。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 河蟹 精子 冷冻保存 冷冻保护剂 二甲亚砜 甘油 单细胞凝胶电泳
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渗透性冷冻保护剂对山羊精子的冷冻保护效果 被引量：12
5
作者 席利萌 罗军 +4 位作者 杨地坤 王维 孙爽 史怀平 马雪瑶 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第8期27-32,共6页
【目的】探索渗透性冷冻保护剂甘油、乙二醇、二甲基亚砜（DMSO）、二甲基乙酰胺（DMA）对山羊精子的冷冻保护效果。【方法】采用假阴道法采集繁殖性能正常、健康、年龄2～4岁的6只西农萨能奶山羊种公羊精液，以Tris卵黄为基础稀释液，... 【目的】探索渗透性冷冻保护剂甘油、乙二醇、二甲基亚砜（DMSO）、二甲基乙酰胺（DMA）对山羊精子的冷冻保护效果。【方法】采用假阴道法采集繁殖性能正常、健康、年龄2～4岁的6只西农萨能奶山羊种公羊精液，以Tris卵黄为基础稀释液，分别添加体积分数为6%的甘油、3%和6%的乙二醇、3%和6%的DMSO、3%和6%的DMA，测定冷冻解冻后精子活率、顶体完整性、质膜完整率、线粒体完整性、谷胱甘肽还原酶活性和丙二醛（MDA）浓度，对比不同冷冻保护剂对山羊精子冷冻保护效果。【结果】 甘油（6%）和乙二醇（3%，6%）组解冻后精子活率均极显著（P＜0.01）高于DMSO（3%，6%）和DMA（3%，6%）处理组；甘油（6%）、DMA（6%）和乙二醇（3%）组的线粒体完整性极显著（P＜0.01）高于其他组；甘油（6%）和乙二醇（3%，6%）组的质膜完整率极显著（P＜0.01）高于其他组；从顶体完整性、谷胱甘肽还原酶活性和MDA浓度等指标看，甘油（6%）和乙二醇（3%，6%）组极显著（P＜0.01）优于其他组。【结论】 稀释液中添加乙二醇（3%，6%）和甘油（6%）都能明显提高山羊冷冻精子品质，其中3%乙二醇可以替代甘油作为山羊精液冷冻保护剂从而发挥更好的抗冷冻保护作用。 展开更多
关键词 山羊 冷冻保护剂 精液 冷冻保存
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冷冻方法和冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响 被引量：10
6
作者 王洪亮 高元奇 +2 位作者 孙妍 薛百功 刘睿智 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期605-607,共3页
目的:探讨冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响。方法:16例男性不育患者精液分别于冷冻前、加入甘油卵黄枸橼酸钠(GYC)和甘油两种冷冻液以快速和慢速冷冻6个月后,采用伊红染色分析精子活率和尾部低渗肿胀率。结果... 目的:探讨冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响。方法:16例男性不育患者精液分别于冷冻前、加入甘油卵黄枸橼酸钠(GYC)和甘油两种冷冻液以快速和慢速冷冻6个月后,采用伊红染色分析精子活率和尾部低渗肿胀率。结果:冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显低于冷冻前(P<0.001,P<0.05);GYC和甘油两种冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异无显著性(P>0.05);速冻和缓慢冷冻对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异亦无显著性(P>0.05)。结论:冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显降低,不同冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率无影响。 展开更多
关键词 精液保存 精子尾 低渗肿胀率 冷冻保护剂 精子活率
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玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔卵母细胞纺锤体的影响 被引量：7
7
作者 蔡学泳 陈贵安 +2 位作者 廉颖 郑晓英 彭红梅 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期566-570,共5页
目的：探讨玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔第二次减数分裂中期卵母细胞纺锤体的影响。方法：以冷冻环为载体，单用乙二醇(ethylene glycol，EG)或乙二醇与二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide，DMSO)联合作冷冻保护剂，用直投... 目的：探讨玻璃化冷冻方法中冷冻保护剂及制冷速度对家兔第二次减数分裂中期卵母细胞纺锤体的影响。方法：以冷冻环为载体，单用乙二醇(ethylene glycol，EG)或乙二醇与二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide，DMSO)联合作冷冻保护剂，用直投液氮或使用玻璃化冷冻仪高速制冷冷冻家兔卵母细胞；解冻2h 后固定并免疫荧光法染色纺锤丝及染色体；用共聚焦扫描显微镜观察纺锤体形态。结果：在单用 EG 以及 EG 和 DMSO 联合直投液氮的方案中，纺锤体损伤较严重，但在 EG 和 DMSO 联合应用并采用玻璃化冷冻仪提高制冷速度的方案中，纺锤体形态正常的比例与对照组相似 结论：玻璃化冷冻方法中采用冷冻保护剂联合及采用玻璃化冷冻仪高速制冷对保持解冻后家兔卵母细胞纺锤体形态效果最好。 展开更多
关键词 冷冻保护剂 纺锤体 联合 家兔 玻璃化冷冻 单用 卵母细胞 体形 减数分裂 DMSO
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不同冷冻保护剂对犬精子冻存的影响 被引量：7
8
作者 张志平 张君涛 +2 位作者 丁佩佩 牛森 林峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期122-124,共3页
本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油... 本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油浓度为4%时,平均冷冻复苏率最高;冷冻平衡时间为1 h最佳。因此,犬精液在冷冻保存时,甘油浓度为4%,平衡60 min,可获得平均39.21%±0.013%的冷冻复苏率,且比较稳定。 展开更多
关键词 犬 冷冻精液 冷冻保护剂 甘油 乙二醇
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细胞及玻璃化冷冻保护剂显微实验研究 被引量：5
9
作者 马学虎 孙冰冰 +1 位作者 刘天庆 崔占峰 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期517-521,共5页
利用低温冷冻显微实验平台,测定了DMSO和甘油两种保护剂的凝固点和玻璃化条件.采用4种不同的冷冻方案对SD大鼠的成骨细胞进行了低温冷冻保存研究.实验结果表明冷冻保护剂的凝固点温度随保护剂浓度和降温速率变化而变化,玻璃化的产生需... 利用低温冷冻显微实验平台,测定了DMSO和甘油两种保护剂的凝固点和玻璃化条件.采用4种不同的冷冻方案对SD大鼠的成骨细胞进行了低温冷冻保存研究.实验结果表明冷冻保护剂的凝固点温度随保护剂浓度和降温速率变化而变化,玻璃化的产生需要很高的保护剂浓度或很快的降温速率.保护剂的性能、冷冻和解冻程序及冻存时间是影响冷冻细胞比活的关键因素.所得结论对研究不同的细胞系、不同尺度组织的最佳低温冷冻保存方案具有指导意义. 展开更多
关键词 低温保存 玻璃化 冷冻保护剂 成骨细胞
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长双歧杆菌BBMN68冷冻保护剂筛选与优化 被引量：6
10
作者 刘松玲 蒋菁莉 +3 位作者 刘爱萍 郭慧媛 冷小京 任发政 《农业机械学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期140-144,共5页
为提高长双歧杆菌BBMN68的冷冻保藏效果,以冷冻存活率和菌株活力为评价指标,分别评价了4个类型的18种冷冻保护剂。结果表明,脱脂乳、海藻糖、果糖、甘油、维生素C、L-Glu能对BBMN68有效保护。采用二次回归正交设计,对筛选得到的6种保护... 为提高长双歧杆菌BBMN68的冷冻保藏效果,以冷冻存活率和菌株活力为评价指标,分别评价了4个类型的18种冷冻保护剂。结果表明,脱脂乳、海藻糖、果糖、甘油、维生素C、L-Glu能对BBMN68有效保护。采用二次回归正交设计,对筛选得到的6种保护剂进行复配,得到复配保护剂的最优配方（质量分数）为：甘油3%、海藻糖5%、果糖5%、脱脂乳8%、维生素C 0.05%、L-Glu 0.05%。在复配保护剂的作用下,-80℃保藏期间BBMN68菌数稳定,活菌对数值始终保持在10.51g（cfu/mL）;冷冻浓缩物作为直投发酵剂应用于酸奶中,在21 d内菌数变化不大,始终保持在10~7 cfu/mL以上。 展开更多
关键词 长双歧杆菌BBMN68 冷冻保护剂 发酵剂 优化
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两种冷冻保护剂对精子冷冻保护的效果比较 被引量：4
11
作者 向祖琼 胡明广 +3 位作者 曹文雷 李铮 郑菊芬 王益鑫 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期318-319,共2页
精液冷冻保护剂可以为三类,即单纯甘油型、甘油复合型以及无甘油型,其中甘油复合型由于效果较好,得到广泛应用.甘油复合型中根据其复合成分的不同,还可分为不同类型,如含有Tes-Tris、卵黄等的冷冻保护剂(TYB),含有卵黄、柠檬酸盐的冷冻... 精液冷冻保护剂可以为三类,即单纯甘油型、甘油复合型以及无甘油型,其中甘油复合型由于效果较好,得到广泛应用.甘油复合型中根据其复合成分的不同,还可分为不同类型,如含有Tes-Tris、卵黄等的冷冻保护剂(TYB),含有卵黄、柠檬酸盐的冷冻保护剂(egg yolk-citrate medium, ECM),另外如含有人血清白蛋白(HSA)及HEPES的冷冻保护剂(human sperm preservation medium, HSPM).此前有学者[1]研究表明,ECM对精子冷冻的保护效果略差于HSPM.由于我们沿用的是自制ECM型的冷冻保护剂,因此,我们拟通过比较本所自制的ECM与商品化的HSPM,来探讨这两种冷冻保护剂的对精子的保护效果.已有研究[2]证实,精子的活动率和活力与精子的生育力明显相关,所以我们采用的比较参数是应用两种冷冻保护液后,其冻融精子活动率、活力及复苏率的变化. 展开更多
关键词 冷冻保护剂 效果比较 精子冷冻 甘油 ECM 不同类型 单纯 卵黄 精液冷冻 复合型
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冷冻保护剂对猪精液的冷冻保护作用 被引量：5
12
作者 王春伟 高璞 +3 位作者 苏泽智 李青旺 杨公社 胡建宏 《家畜生态学报》 北大核心 2013年第7期88-90,共3页
论文通过阐述猪精液冷冻保护过程中冷冻保护剂与精子之间的相互作用,揭示渗透性保护剂和非渗透性保护剂的作用机制,指出目前猪精液冷冻保存的局限性,同时展望了猪精液冻存的研究趋势,为猪精液的冷冻保存研究和应用提供参考。
关键词 猪精液 冷冻保护剂 发展趋势
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猪精液冷冻保护剂研究进展 被引量：5
13
作者 李晟 易康乐 +1 位作者 燕海峰 陈铁桥 《家畜生态学报》 北大核心 2012年第5期112-116,共5页
冷冻保护剂作为精液冷冻稀释液中的添加剂,能防止和减少细胞在冷冻及复苏过程中造成的损伤,确保细胞复苏后有较高存活率。论文就国内外猪精液渗透性和非渗透性精液冷冻保护剂的作用机理、应用进展等研究进行了综述。
关键词 猪 精液 冷冻保护剂
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不同冷冻保护剂对黑熊成纤维细胞冷冻效果的影响 被引量：4
14
作者 袁慧敏 张旭成 +5 位作者 王贺 高璐 刘佳丽 方南洙 李钟淑 李福俊 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第1期242-243,共2页
选用含有不同浓度的3种冷冻保护剂:二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甘油(GC),对黑熊耳皮肤成纤维细胞进行冷冻保存,筛选出最佳冷冻保护剂和最佳浓度。用台盼蓝对解冻复苏的细胞进行染色,分析细胞活力,以细胞活率和24 h贴壁率评价冻存效... 选用含有不同浓度的3种冷冻保护剂:二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甘油(GC),对黑熊耳皮肤成纤维细胞进行冷冻保存,筛选出最佳冷冻保护剂和最佳浓度。用台盼蓝对解冻复苏的细胞进行染色,分析细胞活力,以细胞活率和24 h贴壁率评价冻存效果。结果表明:二甲基亚砜添加浓度7.5%和10%差异不显著,与其他组差异显著;甘油添加浓度10%和15%差异不显著,与其他组差异显著;乙二醇添加浓度15%显著高于其他组。研究结果显示,二甲基亚砜浓度为7.5%对黑熊耳部成纤维细胞冷冻效果最好。 展开更多
关键词 黑熊 皮肤成纤维细胞 冷冻保护剂
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微流体装置线性去除猪MII期卵母细胞冷冻保护剂的实验研究 被引量：2
15
作者 周新丽 杨云 +4 位作者 戴建军 张德福 邵文琪 衣星越 陶乐仁 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期442-448,共7页
低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂,目前常用的分步法去除步骤繁琐,容易丢失细胞,而且会对细胞造成致命的渗透损伤。为减小细胞渗透损伤,设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置,研究微流控线性法去除猪MII期卵母... 低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂,目前常用的分步法去除步骤繁琐,容易丢失细胞,而且会对细胞造成致命的渗透损伤。为减小细胞渗透损伤,设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置,研究微流控线性法去除猪MII期卵母细胞低温保护剂时在不同时间(6、8、10 min)下卵母细胞的体积变化,以及对卵母细胞存活率与发育率的影响;并与传统的去除方法(一步法和分步法)进行比较。结果表明,采用微流体装置线性去除冷冻保护剂,8 min为实验中的最优去除时间;线性法能够明显减小细胞的渗透损伤,其最大归一化渗透膨胀体积为1.12±0.07,卵母细胞的存活率、卵裂率及囊胚率分别达到83.6%、72.4%、21.5%,均显著高于一步法和分步法(P<0.05)。因此,微流控线性去除冷冻保护剂能够显著减小细胞的渗透损伤,为卵母细胞低温保存技术提供新思路。 展开更多
关键词 微流体 混合 卵母细胞 冷冻保护剂 渗透损伤
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无卵黄型人类精液冷冻保护剂试验与临床初步应用 被引量：2
16
作者 朱伟杰 刘学高 +3 位作者 李庆琨 王春湘 文任乾 李世勤 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 1990年第3期71-75,共5页
不含卵黄的“改良 Tyrode’s液—甘油”型冷冻保护剂(简称 T—G 保护剂)与含卵黄的“甘油—卵黄—柠檬酸钠”型冷冻保护剂的试验比较表明,两者的精子复苏率、膜低渗肿胀率、Kremer’s 精子宫颈粘液穿透试验、去透明带地鼠卵穿透试验没... 不含卵黄的“改良 Tyrode’s液—甘油”型冷冻保护剂(简称 T—G 保护剂)与含卵黄的“甘油—卵黄—柠檬酸钠”型冷冻保护剂的试验比较表明,两者的精子复苏率、膜低渗肿胀率、Kremer’s 精子宫颈粘液穿透试验、去透明带地鼠卵穿透试验没有显著性差异(P>0.05);T-G 保护剂的甘油浓度分别为15%、10%,6%时,精子复苏率没有显著性差异(P>0.05);应用 T-G 保护剂冷冻保护的精液,人工授精已使1名丈夫无精子症的妇女受孕,并足月分娩1男婴,生长发育正常,提示 T-G 保护剂能有效地保护精子的受精能力。此外,对“TES-Tris-甘油-卵黄”型冷冻保护剂去除卵黄后的效果观察,精子的复苏率显著低于对照组(P<0.01)。 展开更多
关键词 人类精液 冷冻保存 冷冻保护刺
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湖羊精液稀释液及冷冻保护剂的筛选 被引量：16
17
作者 曹访 郭良勇 +3 位作者 殷雨洋 蒋永清 李玉峰 王卫星 《江苏农业科学》 2019年第23期201-203,共3页
试验旨在研究不同稀释液对湖羊精液的4℃保存效果,同时探讨不同种类及浓度的冷冻保护剂对湖羊精液冷冻保存效果的影响。选择6种常见的绵羊精液稀释液配方,检测湖羊精液稀释后精子活力变化,分析精子存活时间及生存指数;另选取6种常见的... 试验旨在研究不同稀释液对湖羊精液的4℃保存效果,同时探讨不同种类及浓度的冷冻保护剂对湖羊精液冷冻保存效果的影响。选择6种常见的绵羊精液稀释液配方,检测湖羊精液稀释后精子活力变化,分析精子存活时间及生存指数;另选取6种常见的精子冷冻保护剂,分3组浓度(5%、10%、15%)添加,检测细管冻精解冻后的精子活率。结果表明,6种稀释液对湖羊精液的4℃保存效果存在显著差异,其中F稀释液保存效果最佳。冷冻保护剂的种类和添加比例对湖羊精液的冷冻保存效果都存在影响,稀释液中添加5%的丙三醇对湖羊精液的冷冻保存效果最佳。 展开更多
关键词 湖羊 精液 精子活力 稀释液 冷冻保护剂 筛选
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冷冻保护剂对犊牛睾丸组织标志性酶活性的保护作用 被引量：2
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作者 洪洁赟 王春伟 +4 位作者 尚华 扶晓波 吕妍 赵军 胡建宏 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期29-37,共9页
为了探讨犊牛睾丸组织适宜的冷冻保存体系,设计以甘油、DMSO、乙二醇、海藻糖、BSA和睾丸液作为主要成分的6种冷冻保护液,以碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)和β-D葡萄糖苷酶(β-D-Glucosidase)的酶活性作为测定指标... 为了探讨犊牛睾丸组织适宜的冷冻保存体系,设计以甘油、DMSO、乙二醇、海藻糖、BSA和睾丸液作为主要成分的6种冷冻保护液,以碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)和β-D葡萄糖苷酶(β-D-Glucosidase)的酶活性作为测定指标,以新鲜犊牛睾丸组织的4种酶活性为空白对照,使用6种冷冻保护液将睾丸组织于液氮中冷冻保存7d,然后37℃水浴解冻并无菌培养24h,再制备成φ=10%的睾丸组织匀浆液并测定4种酶活性,最后分析6种冷冻保护液对犊牛睾丸组织标志性酶活性的冷冻保护效果。结果表明,含ρ=0.015g/mL牛血清白蛋白(BSA)的冷冻保护液冷冻7d后,睾丸组织AKP、ACP、LDH和β-D葡萄糖苷酶的活性分别为599.99、129.11、1 891.53和489.98U/g,均显著优于其他组(P<0.05);含ρ=0.04g/mL海藻糖的冷冻保护液冷冻7d后,AKP、ACP、LDH和β-D葡萄糖苷酶活性分别为454.88、114.63、1 862.79和457.8U/g,其保护效果次于0.015g/mL BSA组,但均显著优于其他组(P<0.05);经DMSO、乙二醇和睾丸液冷冻7d后,4种标志性酶的活性均低于0.015g/mL BSA组和0.04g/mL海藻糖组,甘油组冷冻保护液的效果最差。因此,含ρ=0.015g/mL BSA和ρ=0.04g/mL海藻糖的冷冻保护液能够较好地保护犊牛睾丸组织的酶活性,是犊牛睾丸组织适宜的冷冻保护剂。 展开更多
关键词 犊牛睾丸组织 冷冻保存 冷冻保护剂 酶活性
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冷冻保护剂添加-去除过程对猪MII期卵母细胞损伤研究 被引量：2
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作者 杨云 周新丽 +4 位作者 戴建军 张德福 邵文琪 衣星越 陶乐仁 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期106-111,共6页
在卵母细胞的低温保存过程中,冷冻保护剂的添加与去除是一个必不可少的步骤,但高浓度的冷冻保护剂会对细胞造成渗透损伤和毒性损伤。为研究冷冻保护剂添加与去除过程对猪MII期卵母细胞的损伤,本文采用传统的方法(一步法、两步法)来添加... 在卵母细胞的低温保存过程中,冷冻保护剂的添加与去除是一个必不可少的步骤,但高浓度的冷冻保护剂会对细胞造成渗透损伤和毒性损伤。为研究冷冻保护剂添加与去除过程对猪MII期卵母细胞的损伤,本文采用传统的方法(一步法、两步法)来添加和去除冷冻保护剂,探究冷冻液、解冻液、稀释液对细胞存活率的影响。实验结果表明:在冷冻保护剂添加-去除过程中,卵母细胞的渗透损伤主要发生在卵母细胞从冷冻液转移至解冻液,以及保护剂去除阶段;解冻液浓度与平衡时间对卵母细胞存活率有很大影响;卵母细胞保护剂的去除与添加过程是相关的,解冻液浓度和平衡时间的选择依赖于细胞在冷冻液中的浓度和平衡时间。此研究结果将为猪MII期卵母细胞的低温保存方案提供参考。 展开更多
关键词 低温保存 冷冻保护剂 渗透损伤 卵母细胞
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不同冷冻保护剂对羔羊睾丸组织冷冻效果的影响 被引量：2
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作者 朱庆超 郭奇奇 +4 位作者 王艳华 姜雪梅 方乾 李浩 胡建宏 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1762-1767,共6页
为探讨非渗透性冷冻保护剂与渗透性冷冻保护剂配伍对羔羊睾丸组织冷冻效果的影响,以φ=10%DMSO、φ=10%EG、φ=10%DMSO+5g/L BSA和φ=10%EG+5g/L BSA为冷冻保护剂,测定冷冻前后羔羊睾丸组织的细胞活率、曲细精管完整率、睾酮浓度、抑制... 为探讨非渗透性冷冻保护剂与渗透性冷冻保护剂配伍对羔羊睾丸组织冷冻效果的影响,以φ=10%DMSO、φ=10%EG、φ=10%DMSO+5g/L BSA和φ=10%EG+5g/L BSA为冷冻保护剂,测定冷冻前后羔羊睾丸组织的细胞活率、曲细精管完整率、睾酮浓度、抑制素质量浓度以及碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性。结果表明,φ=10%DMSO+5g/L BSA组的细胞活率、曲细精管完整率、睾酮浓度、抑制素的质量浓度及AKP和ACP活性均显著高于其他处理组,但显著低于对照组(新鲜组织);φ=10%EG+5g/L BSA组与φ=10%DMSO组的AKP和ACP活性差异不显著,但均显著高于φ=10%EG组。说明φ=10%DMSO中添加5g/L的BSA能有效改善羔羊睾丸组织的冷冻效果。 展开更多
关键词 羔羊 睾丸组织 冷冻保存 冷冻保护剂
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