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农杆菌真空渗透法转化棉花花粉的初步研究
被引量：
8
1
作者
张燕红
黄乐平
+1 位作者
周小云
王冬梅
《棉花学报》
CSCD
北大核心
2008年第5期354-358,共5页
以陆地棉花粉为受体,利用农杆菌真空渗透法将外源Susy基因转入新陆早19,对转化因素作了初步研究。结果表明,花粉在45%蔗糖浓度的花粉悬浮液中能维持适当渗透压,破损率最低;在-80Pa压力下,菌液OD600值在0.6～1.2范围内,真空渗入时间在15...
以陆地棉花粉为受体,利用农杆菌真空渗透法将外源Susy基因转入新陆早19,对转化因素作了初步研究。结果表明,花粉在45%蔗糖浓度的花粉悬浮液中能维持适当渗透压,破损率最低;在-80Pa压力下,菌液OD600值在0.6～1.2范围内,真空渗入时间在15～25min内,能维持较低花粉破损率及较高瞬间转化率;对自然花粉、农杆菌浸染的花粉及农杆菌真空渗透的花粉,分别进行GUS瞬时检测,未抽真空的花粉未被染色,而辅助真空处理的花粉部分变成蓝色,后将其授粉于已去雄的柱头上,观察到花粉管的伸长,说明抽真空后部分花粉仍有活力。
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关键词
农
杆菌
真空
渗透法
陆地棉
花粉
转化
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职称材料
一种基于植物瞬时表达研制新冠病毒重组蛋白疫苗的方法
被引量：
4
2
作者
王弘瑞
赵丽娟
+1 位作者
房明丽
杨明
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第20期2512-2516,共5页
目的:探究一种以植物烟草为瞬时表达载体快速且高效研制和表达SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的方法。方法:培育植物烟草,当烟草生长到第6周时,叶片生长到接近手掌大小,可用于下一步的农杆菌渗透。构建包含SARS-CoV-2 S重组质粒的农杆菌。培养...
目的:探究一种以植物烟草为瞬时表达载体快速且高效研制和表达SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的方法。方法:培育植物烟草,当烟草生长到第6周时,叶片生长到接近手掌大小,可用于下一步的农杆菌渗透。构建包含SARS-CoV-2 S重组质粒的农杆菌。培养含目的基因的农杆菌,来获得农杆菌渗透液。选择待渗透的目标叶片,用针头轻轻在叶片上刺穿一个小孔,然后将制备好的农杆菌渗透液注入叶片,使其慢慢吸收渗透液。需要从渗透后的烟叶中提取和纯化SARS-CoV-2 S重组蛋白,并进行初步鉴定。对SARS-CoV-2 S重组蛋白进行纯化与鉴定,并对纯化的SARS-CoV-2 S重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果:采用植物烟草成功地表达SARS-CoV-2 S重组蛋白,其分子量约为53.2 kD,Western blot结果显示His-tag抗体可以识别SARS-CoV-2 S重组蛋白。结论:基于植物的瞬时表达系统可作为SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的快速研制方法。
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关键词
COVID-19
植物生产疫苗
瞬时表达系统
本氏烟草
农杆菌渗透法
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职称材料
题名
农杆菌真空渗透法转化棉花花粉的初步研究
被引量：
8
1
作者
张燕红
黄乐平
周小云
王冬梅
机构
新疆农科院核生所
出处
《棉花学报》
CSCD
北大核心
2008年第5期354-358,共5页
基金
新疆自治区科技厅高技术研究发展计划项目(200311108)
文摘
以陆地棉花粉为受体,利用农杆菌真空渗透法将外源Susy基因转入新陆早19,对转化因素作了初步研究。结果表明,花粉在45%蔗糖浓度的花粉悬浮液中能维持适当渗透压,破损率最低;在-80Pa压力下,菌液OD600值在0.6～1.2范围内,真空渗入时间在15～25min内,能维持较低花粉破损率及较高瞬间转化率;对自然花粉、农杆菌浸染的花粉及农杆菌真空渗透的花粉,分别进行GUS瞬时检测,未抽真空的花粉未被染色,而辅助真空处理的花粉部分变成蓝色,后将其授粉于已去雄的柱头上,观察到花粉管的伸长,说明抽真空后部分花粉仍有活力。
关键词
农
杆菌
真空
渗透法
陆地棉
花粉
转化
Keywords
agrobacterium-mediated vacuum infiltration
upland cotton
pollen
transformation
分类号
S562 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
一种基于植物瞬时表达研制新冠病毒重组蛋白疫苗的方法
被引量：
4
2
作者
王弘瑞
赵丽娟
房明丽
杨明
机构
吉林大学基础医学院分子生物学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第20期2512-2516,共5页
基金
吉林大学白求恩计划科研项目(2018B16)。
文摘
目的:探究一种以植物烟草为瞬时表达载体快速且高效研制和表达SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的方法。方法:培育植物烟草,当烟草生长到第6周时,叶片生长到接近手掌大小,可用于下一步的农杆菌渗透。构建包含SARS-CoV-2 S重组质粒的农杆菌。培养含目的基因的农杆菌,来获得农杆菌渗透液。选择待渗透的目标叶片,用针头轻轻在叶片上刺穿一个小孔,然后将制备好的农杆菌渗透液注入叶片,使其慢慢吸收渗透液。需要从渗透后的烟叶中提取和纯化SARS-CoV-2 S重组蛋白,并进行初步鉴定。对SARS-CoV-2 S重组蛋白进行纯化与鉴定,并对纯化的SARS-CoV-2 S重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果:采用植物烟草成功地表达SARS-CoV-2 S重组蛋白,其分子量约为53.2 kD,Western blot结果显示His-tag抗体可以识别SARS-CoV-2 S重组蛋白。结论:基于植物的瞬时表达系统可作为SARS-CoV-2重组蛋白疫苗的快速研制方法。
关键词
COVID-19
植物生产疫苗
瞬时表达系统
本氏烟草
农杆菌渗透法
Keywords
COVID-19
Plant-production vaccines
Transient expression system
Nicotiana benthamiana
Agrobacterium infiltration method
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
农杆菌真空渗透法转化棉花花粉的初步研究
张燕红
黄乐平
周小云
王冬梅
《棉花学报》
CSCD
北大核心
2008
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
一种基于植物瞬时表达研制新冠病毒重组蛋白疫苗的方法
王弘瑞
赵丽娟
房明丽
杨明
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
4
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