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嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立
被引量：
6
1
作者
吕沁风
郑伟
+3 位作者
罗鹏
吴忠华
李禾
沈建根
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期305-310,共6页
目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5...
目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。
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关键词
军团
病
杆菌
嗜肺
军团杆菌病/诊断
基因扩增
聚合酶链反应/方法
增强子元件(遗传学)
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职称材料
题名
嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立
被引量：
6
1
作者
吕沁风
郑伟
罗鹏
吴忠华
李禾
沈建根
机构
浙江大学医学院
浙江国际旅行卫生保健中心
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期305-310,共6页
文摘
目的:建立一种快速简便的嗜肺军团菌分子检测方法。方法:运用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),设计一套引物特异性识别嗜肺军团菌毒力基因——mip基因的6个特殊区域,在恒温条件下,对8株嗜肺军团菌和5株其它细菌进行检测,并与普通PCR方法进行比对,验证该方法的特异性和灵敏度。结果:所有嗜肺军团菌扩增产物均产生肉眼可见的白色沉淀,而其它不同菌株均不产生沉淀;加入荧光染料smart green后,嗜肺军团菌扩增产物均产生强绿色荧光,其它菌株呈弱荧光。与普通PCR(检出限约为57.6 pg,)比,LAMP扩增反应的灵敏度大100倍左右,基因组DNA检出限为576 fg,阳性水样检出限为8 cfu/ml。结论:LAMP技术可在简易的实验环境中快速、特异、灵敏地检测嗜肺军团菌。
关键词
军团
病
杆菌
嗜肺
军团杆菌病/诊断
基因扩增
聚合酶链反应/方法
增强子元件(遗传学)
Keywords
Legionella pneumophila
Legionellosis/diag
Gene amplification
Polymerase chain reaction/methods
Enhancerelements（genetics）
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
嗜肺军团菌环介导等温扩增检测法的建立
吕沁风
郑伟
罗鹏
吴忠华
李禾
沈建根
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
6
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