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REG1A通过调控Wnt/β-catenin信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的促进作用
被引量：
2
1
作者
李小燕
张维
何杰
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期444-453,共10页
目的:探讨再生基因1A(REG1A)对肺腺癌细胞增殖和迁移的促进作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控,并阐明可能的作用机制。方法:利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库下载符合本研究要求的515例肺腺癌组织和59例癌旁正常组织的基因表达谱,...
目的:探讨再生基因1A(REG1A)对肺腺癌细胞增殖和迁移的促进作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控,并阐明可能的作用机制。方法:利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库下载符合本研究要求的515例肺腺癌组织和59例癌旁正常组织的基因表达谱,根据REG1A表达水平的中位值,分为低和高表达REG1A组,采用R 3.6.1软件对2组基因进行差异基因分析,根据差异基因进行基因本体(GO)功能注释,采用GSEA 4.1.0软件筛查差异基因富集的京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路。筛查出得分最高的信号通路[无翅型MMTV整合位点(Wnt)信号通路],采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blotting法检测人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和肺腺癌细胞A549、LC-2、HCC515和PC14中REG1A mRNA及蛋白表达水平。采用脂质体转染法将shREG1A和shNC质粒转染A549细胞,将REG1A敲减后的细胞,采用氯化锂(LiCl)处理,将细胞分为shNC组、shREG1A组、shREG1A+PBS组和shREG1A+LiCl组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖活性,采用Transwell实验检测各组细胞的迁移情况,RT-qPCR和Western blotting法检测各组细胞中无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt-3a)、β-连环素(β-catenin)和原癌基因(c-Myc)mRNA及蛋白表达水平。结果:生物信息学分析,低和高表达REG1A组共有78个差异基因,其中上调的基因50个,下调的基因28个,上述基因主要富集在脂质转运体活性、内切核糖核酸酶活性和胃肠道上皮结构稳态的维持等生物学过程和分子功能上,富集的通路有Wnt信号通路、Janus激酶-信号转导与转录激活因子(JAK-STAT)信号通路和癌症信号通路,其中Wnt信号通路富集得分最高。RT-qPCR法和Western blotting检测,肺腺癌A549、LC-2、HCC515和PC14细胞中REG1A mRNA及蛋白表达水平均明显高于BEAS-2B细胞(P<0.05)。脂质体转染法敲减REG1A后,与shNC组比较,shREG1A组A549细胞中REG1A mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);shNC组、shREG1A组、shREG1A+PBS组和shREG1A+LiCl组细胞增殖活性及迁移细胞数差异有统计学意义(P<0.05),shREG1A组细胞增殖活性低于shNC组和shREG1A+LiCl组(P<0.05),shREG1A组迁移细胞数少于shNC组和shREG1A+LiCl组(P<0.05),shREG1A组与shREG1A+PBS组细胞增殖活性和迁移细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:REG1A在肺腺癌细胞中呈现高表达,可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路,促进A549细胞的增殖和迁移;敲减REG1A后,A549细胞增殖和迁移能力也受到抑制。
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关键词
肺腺癌
再生基因1a
细胞增殖
细胞迁移
生物信息学
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职称材料
题名
REG1A通过调控Wnt/β-catenin信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的促进作用
被引量：
2
1
作者
李小燕
张维
何杰
机构
成都医学院临床医学院
成都医学院第一附属医院内分泌科
成都医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期444-453,共10页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(81600388)。
文摘
目的:探讨再生基因1A(REG1A)对肺腺癌细胞增殖和迁移的促进作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控,并阐明可能的作用机制。方法:利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库下载符合本研究要求的515例肺腺癌组织和59例癌旁正常组织的基因表达谱,根据REG1A表达水平的中位值,分为低和高表达REG1A组,采用R 3.6.1软件对2组基因进行差异基因分析,根据差异基因进行基因本体(GO)功能注释,采用GSEA 4.1.0软件筛查差异基因富集的京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路。筛查出得分最高的信号通路[无翅型MMTV整合位点(Wnt)信号通路],采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及Western blotting法检测人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)和肺腺癌细胞A549、LC-2、HCC515和PC14中REG1A mRNA及蛋白表达水平。采用脂质体转染法将shREG1A和shNC质粒转染A549细胞,将REG1A敲减后的细胞,采用氯化锂(LiCl)处理,将细胞分为shNC组、shREG1A组、shREG1A+PBS组和shREG1A+LiCl组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞增殖活性,采用Transwell实验检测各组细胞的迁移情况,RT-qPCR和Western blotting法检测各组细胞中无翅型MMTV整合位点家族成员3a(Wnt-3a)、β-连环素(β-catenin)和原癌基因(c-Myc)mRNA及蛋白表达水平。结果:生物信息学分析,低和高表达REG1A组共有78个差异基因,其中上调的基因50个,下调的基因28个,上述基因主要富集在脂质转运体活性、内切核糖核酸酶活性和胃肠道上皮结构稳态的维持等生物学过程和分子功能上,富集的通路有Wnt信号通路、Janus激酶-信号转导与转录激活因子(JAK-STAT)信号通路和癌症信号通路,其中Wnt信号通路富集得分最高。RT-qPCR法和Western blotting检测,肺腺癌A549、LC-2、HCC515和PC14细胞中REG1A mRNA及蛋白表达水平均明显高于BEAS-2B细胞(P<0.05)。脂质体转染法敲减REG1A后,与shNC组比较,shREG1A组A549细胞中REG1A mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);shNC组、shREG1A组、shREG1A+PBS组和shREG1A+LiCl组细胞增殖活性及迁移细胞数差异有统计学意义(P<0.05),shREG1A组细胞增殖活性低于shNC组和shREG1A+LiCl组(P<0.05),shREG1A组迁移细胞数少于shNC组和shREG1A+LiCl组(P<0.05),shREG1A组与shREG1A+PBS组细胞增殖活性和迁移细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:REG1A在肺腺癌细胞中呈现高表达,可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路,促进A549细胞的增殖和迁移;敲减REG1A后,A549细胞增殖和迁移能力也受到抑制。
关键词
肺腺癌
再生基因1a
细胞增殖
细胞迁移
生物信息学
Keywords
Lung adenocarcinoma
Regenerating gene
1a
Cell proliferation
Cell migration
Bioinformatics
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
REG1A通过调控Wnt/β-catenin信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的促进作用
李小燕
张维
何杰
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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