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力学刺激与VEGF作用下PDLSCs向内皮细胞分化和血管形成能力的研究
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作者 牛静 石笑 +3 位作者 赵萤 王君俊 赵寅华 张旻 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第S01期314-314,共1页
目的明确周期性动态压力对PDLSCs增殖活性及内皮向分化的影响;研究动态压力与VEGF诱导液的协同作用对PDLSCs向内皮细胞分化和血管形成能力的影响。方法首先通过免疫磁珠分选法分离培养PDLSCs并对获得的PDLSCs进行鉴定;然后对PDLSCs予以... 目的明确周期性动态压力对PDLSCs增殖活性及内皮向分化的影响;研究动态压力与VEGF诱导液的协同作用对PDLSCs向内皮细胞分化和血管形成能力的影响。方法首先通过免疫磁珠分选法分离培养PDLSCs并对获得的PDLSCs进行鉴定;然后对PDLSCs予以不同的周期性动态压力,检测内皮向分化标志基因VEGFR-2、Ang-2 mRNA和VEGFR-2、Ang-2、VEGFA、IGF-1蛋白的表达。用多浓度的VEGF诱导液分别对PDLSCs进行内皮向分化诱导。 展开更多
关键词 力学刺激 动态压力 PDL 分化诱导 增殖活性 分离培养 内皮细胞分化 协同作用
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人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究
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作者 李丽 马海英 +1 位作者 马玲 于艳秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2002-2002,共1页
关键词 内皮细胞分化 间充质干细胞 人胎盘 种子细胞来源 诱导分化 再生医学 细胞接种 内皮细胞形态 PLACENTA 组织块种植法
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3种口腔颌面部来源的间充质干细胞成血管内皮分化潜能的比较研究 被引量:6
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作者 谢静 赵玉鸣 +7 位作者 饶南荃 汪晓彤 方滕姣子 李晓霞 翟越 李静芝 葛立宏 王媛媛 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期900-906,共7页
目的:研究来自口腔颌面部的脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)、牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)和颌骨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)的增殖能力及成... 目的:研究来自口腔颌面部的脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)、牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)和颌骨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)的增殖能力及成血管内皮细胞分化潜能,为血管组织工程再生种子细胞的选择提供依据。方法:取临床乳牙和恒牙牙髓组织及颌骨组织并采用酶消化法分离培养相应的间充质干细胞,流式细胞技术检测间充质干细胞相关表面抗原的表达。采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞的增殖能力。通过Matrigel三维培养技术诱导间充质干细胞成血管内皮细胞分化,并通过管腔计数及real-time PCR技术比较3种间充质干细胞的成血管内皮细胞分化能力。采用鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)技术观察3种不同间充质干细胞新生血管能力。结果:3种干细胞均阳性表达CD73、CD90、CD105、CD146,阴性表达CD34、CD45,符合间充质干细胞表面标记物的表达规律。SHED和DPSC的CD146表达率多于BMSC,CCK-8法检测显示SHED的增殖能力最强。诱导后的3种细胞均可在Matrigel基质胶上形成管腔样结构,诱导后SHED和BMSC形成的血管总长度大于DPSC,SHED形成的管腔数多于BMSC和DPSC。real-time PCR结果显示几种成血管相关的细胞因子在不同细胞间表达存在差别。诱导后SHED的CD31、VEGFR2、vWF表达显著高于另外两种细胞。BMSC的VEGFR1表达量高于其他组,SHED高于DPSC。VEGF的表达在4组之间差异无统计学意义。3种细胞在CAM上计数新生血管数目显示较空白对照组差异无统计学意义,SHED组血管总长度较空白对照和BMSC大。结论:SHED、DPSC及BMSC均能向成血管内皮细胞方向诱导分化且在Matrigel培养基上形成血管和管腔,SHED具有更强的分化和形成管腔的能力,同时SHED较BMSC及DPSC具有更强的增殖能力。 展开更多
关键词 脱落乳牙牙髓干细胞 牙髓干细胞 颌骨骨髓间充质干细胞 血管内皮细胞分化 细胞增殖
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M1型巨噬细胞极化在内皮细胞转分化及慢性移植肾失功中的作用 被引量:3
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作者 张翔 王子杰 +8 位作者 郑明 韩前广 黄正楷 易小敏 陶俊 韩志坚 谭若芸 居小兵 顾民 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1296-1303,1309,共9页
目的:探究M1型巨噬细胞极化在内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelium-to-myofibroblast transition,EndMT)及慢性肾移植失功(chronic allograft dysfunction,CAD)中的作用。方法:从GEO公共数据库中下载GSE21374转录组测序数据,并使用C... 目的:探究M1型巨噬细胞极化在内皮细胞向间充质细胞转分化(endothelium-to-myofibroblast transition,EndMT)及慢性肾移植失功(chronic allograft dysfunction,CAD)中的作用。方法:从GEO公共数据库中下载GSE21374转录组测序数据,并使用Cibersort软件分析CAD患者移植肾中的免疫细胞的浸润状态。收集本中心CAD患者的移植肾切除标本,使用免疫荧光、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和蛋白质印迹法(Western blot,WB)等方法观察M1型巨噬细胞在移植肾组织中的浸润情况。体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)诱导Raw264.7巨噬细胞向M1极化。Transwell小室构建M1型巨噬细胞和主动脉内皮细胞的共培养模型。使用PCR、WB和细胞免疫荧光观察共培养模型中内皮细胞的CD31与α-SMA的表达情况。结果:基于GEO公共数据库,发现单核-巨噬细胞明显浸润于CAD移植肾组织中(P<0.05);在本中心的CAD患者移植肾标本中,CD68(+)iNOS(+)M1型巨噬细胞亦明显浸润于肾小球及间质中,且M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA表达量明显增加(P<0.05)。在细胞共培养模型中发现,M1型巨噬细胞可明显促进内皮细胞发生EndMT过程。结论:M1型巨噬细胞明显浸润于CAD患者的移植肾组织中,并可能通过诱导内皮细胞发生EndMT促进CAD的进展。 展开更多
关键词 巨噬细胞极化 内皮细胞向间充质细胞分化 慢性移植肾失功 肾脏移植
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敲低Runt相关转录因子3(RUNX3)抑制低氧诱导的内皮细胞间质转分化 被引量:4
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作者 刘艳华 李宾公 +4 位作者 王裕勤 王得龙 邹晋 柯旋 郝艳琴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1627-1631,共5页
目的探讨敲减Runt相关转录因子3(RUNX3)对低氧诱导人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)向间质转分化的影响及具体机制。方法低氧条件下培养HCMEC,使用RUNX3干扰慢病毒敲减HCMEC中的RUNX3基因,应用反转录PCR检测内皮细胞间质转分化(EndoMT)相关... 目的探讨敲减Runt相关转录因子3(RUNX3)对低氧诱导人心脏微血管内皮细胞(HCMEC)向间质转分化的影响及具体机制。方法低氧条件下培养HCMEC,使用RUNX3干扰慢病毒敲减HCMEC中的RUNX3基因,应用反转录PCR检测内皮细胞间质转分化(EndoMT)相关基因CD31、血管内皮钙黏素(VE-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP-1)以及RUNX3的mRNA表达,应用Western blot法检测CD31、α-SMA、RUNX3、转化生长因子β2(TGF-β2)、Smad2/3、p-Smad2/3以及Notch-1、Hes1、Hey1蛋白表达,免疫荧光细胞化学染色检测CD31、α-SMA的表达和定位。结果低氧能够诱导HCMEC发生EndoMT;低氧时TGF-β2、Smad2/3、p-Smad2/3以及Notch-1、Hes1、Hey1蛋白均上调;而RUNX3敲减后TGF-β2以及Notch-1蛋白水平增高,然而Smad2/3、p-Smad2/3以及Hes1、Hey1蛋白水平均不同程度下调。结论 RUNX3敲减可减轻低氧诱导的EndoMT,可能是通过部分抑制TGF-β及Notch信号通路。 展开更多
关键词 内皮细胞间质转分化 Runt相关转录因子3(RUNX3) 转化生长因子β(TGF-β) NOTCH 低氧
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ERK1/2信号通路的活化参与人脐静脉内皮细胞向间充质转分化的过程 被引量:1
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作者 刘萍 邓元俊 +6 位作者 裴广畅 许楚瓯 常晓燕 曾锐 姚颖 徐钢 韩敏 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期505-510,共6页
目的建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)向间充质转分化的模型并探讨其可能的信号转导途径。方法以HUVECs为研究对象,分组如下:对照组、转化生长因子-β1(TGF-β1)模型组、TGF-β1+DMSO组以及TGF-β1+抑制剂干预组。TGF-β1模型组应用5ng/mL ... 目的建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)向间充质转分化的模型并探讨其可能的信号转导途径。方法以HUVECs为研究对象,分组如下:对照组、转化生长因子-β1(TGF-β1)模型组、TGF-β1+DMSO组以及TGF-β1+抑制剂干预组。TGF-β1模型组应用5ng/mL TGF-β1刺激HUVECs 72h;TGF-β1+DMSO组应用5ng/mL TGF-β1及1μL/mL DMSO刺激HUVECs 72h;TGF-β1+抑制剂干预组分别应用p38MAPK抑制剂SB203580(5mmol/L)或ERK抑制剂U0126(10mmol/L)或JNK抑制剂SP600125(5mmol/L)干预TGF-β1诱导的内皮细胞,倒置显微镜观察内皮细胞形态,应用免疫荧光法检测VE-钙粘蛋白(VE-cadherin)和α-肌动蛋白(α-SMA)在细胞内的分布情况;并应用Western blot法检测VE-cadherin和α-SMA的蛋白表达情况。结果 TGF-β1(5ng/mL)刺激HUVECs 72h后,内皮细胞形态由卵圆形铺路石状向梭形转变,与0h相比,VE-cadherin蛋白表达显著下调(P<0.05),α-SMA蛋白表达显著上调(P<0.05)。抑制ERK1/2信号转导通路,可维持HUVECs内皮细胞表型以及VE-cadherin在内皮细胞的表达,抑制α-SMA蛋白表达,与TGF-β1模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);抑制p38MAPK和JNK通路,与TGF-β1模型组相比,HUVECs表型、VE-cadherin和α-SMA蛋白表达未见明显差异。结论 TGF-β1可诱导内皮细胞向间充质转分化,应用U0126抑制ERK1/2信号途径可抑制内皮细胞转分化的进展,提示ERK1/2的活化可能是该过程重要的信号转导途径。 展开更多
关键词 转化生长因子-β1 人脐静脉内皮细胞 内皮细胞向间充质转分化 胞外信号调节激酶
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干细胞临床扩增的一种最佳添加剂
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作者 马海英 李丽 +2 位作者 马玲 魏文娟 于艳秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2000-2000,共1页
关键词 内皮细胞分化 传代时间 细胞增殖能力 脐血清 人胎盘 胎牛血清 增殖活力 细胞周期 细胞表面标记 免疫表型
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瓜蒌薤白半夏汤加减治疗冠心病心绞痛痰浊痹阻证对于心肌血运重建的影响 被引量:57
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作者 单自琴 许剑婕 《世界中医药》 CAS 2017年第1期53-56,60,共5页
目的:探讨瓜蒌薤白半夏汤加减治疗冠心病心绞痛痰浊痹阻证对于心肌血运重建的影响。方法:选择2013年6月至2015年12月在我院住院的182例冠心病心绞痛痰浊痹阻证患者,采用简单随机分组法分为对照组和观察组各91例,对照组给予常规西药治疗... 目的:探讨瓜蒌薤白半夏汤加减治疗冠心病心绞痛痰浊痹阻证对于心肌血运重建的影响。方法:选择2013年6月至2015年12月在我院住院的182例冠心病心绞痛痰浊痹阻证患者,采用简单随机分组法分为对照组和观察组各91例,对照组给予常规西药治疗,在此基础上治疗组加用瓜蒌薤白半夏汤加减治疗,都治疗观察14 d。结果:治疗后观察组的总有效率(97.8%)明显高于对照组86.8%)(P<0.05)。观察组与对照组治疗后的硝酸甘油用量分别为(6.87±2.45)mL和(8.45±2.87)mL,都明显低于治疗前的(12.84±3.09)mL和(12.67±2.89)mL(P<0.05),同时观察组治疗后的硝酸甘油用量也明显少于对照组(P<0.05)。2组治疗后的加压后肱动脉内径扩张率都明显增加,在组内与组间对比差异都有统计学意义(P<0.05),2组治疗前后的静息状态肱动脉内径在组内与组间对比差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后的左室前壁中间段的b值与k值分别为(5.45±0.76)db和(1.88±0.25)S',而对照组分别为(5.02±0.56)db和(1.80±0.21)S',观察组都明显高于对照组(P<0.05),且2组的组内对比差异都有统计学意义(P<0.05)。结论:瓜蒌薤白半夏汤加减治疗冠心病心绞痛痰浊痹阻证能逆转内皮细胞分化功能,促进心肌血运重建的改善,从而减少硝酸甘油的用量,提高总体治疗效果。 展开更多
关键词 瓜蒌薤白半夏汤 冠心病心绞痛 痰浊痹阻证 心肌血运重建 内皮细胞分化功能
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