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缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响
被引量:
3
1
作者
韩艳久
刘国辉
+1 位作者
欧阳柳
王小红
《生物医学工程与临床》
CAS
2015年第1期1-6,共6页
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶...
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。
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关键词
碱性成纤维
细胞
生长因子(bFGF)
血管
内皮
细胞
生长因子(VEGF)
内皮
祖细胞
集落
形成
单位
(
epcs
)
基质金属蛋白酶(MMP)
鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术
血管新生
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职称材料
比较两种内皮祖细胞增殖、抗凋亡和集落形成能力
被引量:
2
2
作者
段华新
卢光琇
程腊梅
《广州医学院学报》
2007年第4期57-61,共5页
比较两种内皮祖细胞的增殖潜能、抗凋亡和集落形成能力。方法:本研究用增殖曲线、倍增水平、倍增时间的计算及MTT增殖实验等方法比较两种内皮祖细胞的增殖特点;用单个细胞的集落形成实验比较两种细胞的集落形成能力;并用流式细胞术检...
比较两种内皮祖细胞的增殖潜能、抗凋亡和集落形成能力。方法:本研究用增殖曲线、倍增水平、倍增时间的计算及MTT增殖实验等方法比较两种内皮祖细胞的增殖特点;用单个细胞的集落形成实验比较两种细胞的集落形成能力;并用流式细胞术检测两种细胞凋亡发生率。结果:循环成血管细胞(CACs)只能达到4-6个倍增,而高增殖潜能内皮祖细胞(HPP-EPCs)能达到60多个倍增。HPP-EPCs的累计倍增水平是CACs的9.53倍。MTT实验的结果也支持HPP-EPCs增殖明显快于CACs。来自CACs的单个细胞不能形成集落。但是,HPP-EPCs的单个细胞中45%在14 d的培养期间形成了集落,并且来自二级集落的96个单个细胞中有5个三级集落形成。HPP-EPCs显示比CACs具有更强的抗凋亡能力。结论:HPP-EPCs比CACs具有更强的增殖能力、集落形成能力和抗凋亡能力。
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关键词
内皮
祖细胞
增殖能力
凋亡
集落
形成
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职称材料
题名
缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响
被引量:
3
1
作者
韩艳久
刘国辉
欧阳柳
王小红
机构
华中科技大学 同济医学院附属协和医院骨科
出处
《生物医学工程与临床》
CAS
2015年第1期1-6,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(81141077)
文摘
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位(EPCs)增殖、分化、成熟,以及血管化的影响。方法制备分别含有b FGF/VEGF和不含b FGF/VEGF的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)水凝胶,分为A、B 2组。同时包埋EPCs,流式细胞仪检测培养7 d后的细胞存活率,倒置显微镜观察EPCs的生长及长入水凝胶的情况并计数,分析b FGF、VEGF对EPCs存活率的影响。培养7 d后用定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测总RNA量,并检测PECAM1、CD34、KDR、Angiopoietin-2、pcdh12基因的表达。然后用酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测2组去水凝胶的培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并用荧光法检测水凝胶的降解速度,b FGF、VEGF对EPCs释放MMP的影响。最后以鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术检测含有b FGF、VEGF的水凝胶体外诱导血管新生的作用。结果 A组水凝胶,消化7 d后,流式细胞仪检测发现39.43%的EPCs尚存,B组4.14%;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。水凝胶表面种植EPCs可观察到的细胞数A组为378.333 3,B组为302.333 3;两组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测2组中MMP-2、MMP-9的表达,发现水凝胶中MMP-2和MMP-9随时间推移在72 h内持续释放,A组较B组释放浓度显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光法检测水凝胶的降解发现,从第1天开始,A组水凝胶降解百分比急速升高,之后增长速度减缓,而B组呈继续增长之势,差异有统计学意义。定量RT-PCR检测发现A组较B组基因Ct值高,且差异有统计学意义(P<0.05)。CAM技术检测发现A组(空白组)、B组(不含b FGF、VEGF组)、C组(含b FGF、VEGF组)的新生血管总数分别为9、25、36;两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外研究证实,缓释的b FGF、VEGF不仅能促进水凝胶中EPCs增殖、分化、成熟,以及血管化,还能刺激血管新生。
关键词
碱性成纤维
细胞
生长因子(bFGF)
血管
内皮
细胞
生长因子(VEGF)
内皮
祖细胞
集落
形成
单位
(
epcs
)
基质金属蛋白酶(MMP)
鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术
血管新生
Keywords
basic fibroblast growth factor (bFGF)
vascular endothelial growth factor (VEGF)
endothelial progenitorceils colony (
epcs
)
matrix metalloproteinases(MMP)
chick chorioallantoic membrane(CAM) technique
angiogenesis
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
比较两种内皮祖细胞增殖、抗凋亡和集落形成能力
被引量:
2
2
作者
段华新
卢光琇
程腊梅
机构
广州医学院附属市一人民医院血液科
中南大学生殖与干细胞工程研究所人类干细胞国家工程研究中心
出处
《广州医学院学报》
2007年第4期57-61,共5页
基金
国家863项目基金(2003AA205181)
国家973项目基金(00CB51010)
国家自然科学基金重点项目(30030070)
文摘
比较两种内皮祖细胞的增殖潜能、抗凋亡和集落形成能力。方法:本研究用增殖曲线、倍增水平、倍增时间的计算及MTT增殖实验等方法比较两种内皮祖细胞的增殖特点;用单个细胞的集落形成实验比较两种细胞的集落形成能力;并用流式细胞术检测两种细胞凋亡发生率。结果:循环成血管细胞(CACs)只能达到4-6个倍增,而高增殖潜能内皮祖细胞(HPP-EPCs)能达到60多个倍增。HPP-EPCs的累计倍增水平是CACs的9.53倍。MTT实验的结果也支持HPP-EPCs增殖明显快于CACs。来自CACs的单个细胞不能形成集落。但是,HPP-EPCs的单个细胞中45%在14 d的培养期间形成了集落,并且来自二级集落的96个单个细胞中有5个三级集落形成。HPP-EPCs显示比CACs具有更强的抗凋亡能力。结论:HPP-EPCs比CACs具有更强的增殖能力、集落形成能力和抗凋亡能力。
关键词
内皮
祖细胞
增殖能力
凋亡
集落
形成
Keywords
Endothelial progenitor cells
Proliferative potential
Colony forming
Apoptosis.
分类号
Q253 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
缓释的碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子对于水凝胶中内皮祖细胞集落形成单位的影响
韩艳久
刘国辉
欧阳柳
王小红
《生物医学工程与临床》
CAS
2015
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
比较两种内皮祖细胞增殖、抗凋亡和集落形成能力
段华新
卢光琇
程腊梅
《广州医学院学报》
2007
2
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职称材料
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