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内生解淀粉芽孢杆菌TB2液体发酵条件的研究 被引量:21
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作者 郭龙涛 邱思鑫 +1 位作者 蔡学清 胡方平 《热带作物学报》 CSCD 2010年第2期259-264,共6页
采用单因素试验和正交试验对具有广谱拮抗作用的内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,最佳培养基组份为:玉米淀粉1.0%、豆粉1.0%、(NH4)2SO40.5%、MgSO4·7H2O0.1%、FeSO4·7H2O0.03%、K2HP... 采用单因素试验和正交试验对具有广谱拮抗作用的内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,最佳培养基组份为:玉米淀粉1.0%、豆粉1.0%、(NH4)2SO40.5%、MgSO4·7H2O0.1%、FeSO4·7H2O0.03%、K2HPO4·3H2O0.02%、KH2PO40.01%;培养条件为:初始pH值为7.5,温度35℃,接种量3%,装液量50mL/250mL三角瓶,摇床转速200r/min,发酵周期22~26h。优化条件下发酵水平活菌数达到8.52×1010cfu/mL。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌TB2 发酵 单因素试验 正交试验
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内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株活性物质诱导辣椒果抗疫病的生化机理 被引量:19
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作者 邱思鑫 阮宏春 +1 位作者 宋美仙 胡方平 《热带作物学报》 CSCD 2010年第10期1813-1820,共8页
利用内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株的活性物质喷施辣椒果后0、24、48、72 h接种辣椒疫霉病菌进行防治辣椒疫病试验,结果表明,TB2菌株的活性物质对辣椒果疫病的发生有一定控制作用,活性物质处理间隔24 h后再接种病菌,其防病效果得到显著提... 利用内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株的活性物质喷施辣椒果后0、24、48、72 h接种辣椒疫霉病菌进行防治辣椒疫病试验,结果表明,TB2菌株的活性物质对辣椒果疫病的发生有一定控制作用,活性物质处理间隔24 h后再接种病菌,其防病效果得到显著提高。生化机制研究表明,TB2的活性物质处理可使辣椒果的可溶性蛋白含量、丙二(MDA)含量、超氧阴离子自由基(O.-2)产生速率及过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性发生显著变化。病菌处理的辣椒果,可溶性蛋白含量、MDA含量和O.-2产生速率及POD、SOD、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸氨解酶(PAL)活性均会显著升高,且其最大值高于活性物质处理果的相应最大值。活性物质和病菌共同处理的辣椒果,POD和PAL的活性可上升到高于病菌单独处理的峰值,但MDA含量和O.-2产生速率及SOD和CAT活性均较低,与对照的接近,表现出相对稳定状态。由此推断,TB2的活性物质诱导辣椒果抗疫病与POD、PAL等酶的活性相关。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌 辣椒 疫霉病 诱导抗性
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内生解淀粉芽孢杆菌TB2内切β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆和原核表达分析 被引量:7
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作者 范晓静 邱思鑫 胡方平 《热带作物学报》 CSCD 2008年第4期443-449,共7页
以内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株基因组为模板,克隆了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶基因的ORF。测序结果表明该ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸,分子量为55.07 ku,等电点为7.83。Blast同源性分析结果表明,该序列与GenBank登录的1株枯草芽孢杆... 以内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株基因组为模板,克隆了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶基因的ORF。测序结果表明该ORF全长1 500 bp,编码499个氨基酸,分子量为55.07 ku,等电点为7.83。Blast同源性分析结果表明,该序列与GenBank登录的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis M28332)纤维素酶核苷酸序列的同源性最高(98%),其氨基酸同源性也达98%,已被GenBank收录(Accession number)。用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切目的片段和表达载体pET-29a(+)后相连接,构建重组表达载体pET-glu,并导入BL21细菌中表达。酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在59 ku左右有融合蛋白带,该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.4,为中性纤维素酶。实验结果为进一步研究内生解淀粉芽孢杆菌TB2纤维素酶的功能和应用打下了基础。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌 β-1 4-内切葡聚糖酶基因 克隆 大肠杆菌表达
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内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3发酵条件的优化 被引量:1
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作者 解丽娟 肖蕾 +1 位作者 伍善东 程伟 《湖南农业科学》 2022年第9期10-13,21,共5页
为了获得内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3最大发酵生物量,通过单因素试验和正交试验对内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3的培养基和培养条件进行了优化。结果表明:内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3的最佳培养基配方为甘露醇10.0 g/L、淀粉20.0 g/L、酵母粉2.0 g/... 为了获得内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3最大发酵生物量,通过单因素试验和正交试验对内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3的培养基和培养条件进行了优化。结果表明:内生解淀粉芽孢杆菌L-4-3的最佳培养基配方为甘露醇10.0 g/L、淀粉20.0 g/L、酵母粉2.0 g/L、黄豆粉1.0 g/L、KHPO4.0 g/L、NaCl 4.0 g/L、MgSO·7HO 3.0 g/L;发酵培养的最佳条件为初始pH值7.2,装液量8%(500 mL三角瓶装液40 mL),接种量2.0 %,温度32℃,转速180 r/min,时间68 h。经50 L发酵罐验证,优化后的发酵活菌数达到20.8×10^(8) CFU/mL。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌 培养基 发酵条件 优化
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解淀粉芽孢杆菌G9R-3脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌机理及防效评价 被引量:7
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作者 周维 田丹丹 +5 位作者 杨扬 韦弟 李朝生 覃柳燕 刘挺燕 黄素梅 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1810-1816,共7页
[目的]G9R-3是从抗病香蕉品种“桂蕉9号”健康植株根部中分离得到的一株具有较强抑制香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。开展其脂肽类化合物抑制香蕉... [目的]G9R-3是从抗病香蕉品种“桂蕉9号”健康植株根部中分离得到的一株具有较强抑制香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。开展其脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌活性机理及防效评价研究,为利用该菌株大田防控香蕉枯萎病提供参考。[方法]结合基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析脂肽类化合物类型,采用Landy培养基发酵并使用大孔树脂抽提法提取菌株脂肽类物质,结合室内平板、台盼蓝染色、盆栽灌根接种进行活性检测与防效评价。[结果]该菌株产生的脂肽类化合物种类包括表面活性素Surfactin、泛革素Fengycin和伊枯草菌素iturins 3个种类。活性检测表明,当粗提物浓度为300μg/mL时对香蕉枯萎病菌Foc4菌丝生长抑制率达58.91%,孢子萌发抑制率达69.80%。室内盆栽防效评价试验表明,浓度为1 mg·mL-1 G9R-3脂肽类粗提物香蕉枯萎病防效可达76.53%。[结论]G9R-3产生的脂肽类化合物具有防控香蕉枯萎病的潜力,其生防基质为破坏Foc4细胞膜并引起菌丝肿大和畸形,并抑制其孢子萌发。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌G9R-3 脂肽类化合物 抑菌机理 防效评价
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