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慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因敲除被引量：1: 1; 作者徐天鹏吴思乐 +6 位作者温健韦义荣李思佳谢龙虞霖田宋中宝陆阳清《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2259-2266,共8页; 【目的】探索在慢羽鸡成纤维细胞中敲除ev21基因的可行性,净化鸡群内源性逆转录病毒,同时为快速培育缺失ev21基因的慢羽鸡配套系打下基础。【方法】根据ev21基因序列(KY235336)特点,分别在其5’和3’端各设计2个sgRNA,用于构建4种不同sg... 展开更多; 关键词慢羽鸡禽白血病病毒(ALV) ev21基因 CRISPR/Cas9 基因敲除; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡内源性白血病毒ev21与其侧翼区SNP位点的连锁关系被引量：2: 2; 作者葛琳涵白少川 +3 位作者李雪梅赵丽杰乔宁李兰会《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期101-107,共7页; 鸡内源逆转录病毒ev21的转录表达影响宿主机体健康。本试验通过PCR检测海兰褐、太行鸡、海兰灰和SPF鸡292份DNA样品的ev21阴阳性、羽型和性别,测序筛选ev21插入位点OS和US区的SNP位点,Mbo II酶切检测C>T突变的群体多样性,分析C>T... 展开更多; 关键词鸡内源性白血病病毒ev21 SNP 连锁转录因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

内源性禽白血病病毒ev/J基因克隆与分析: 3; 作者杨玉莹梁雄燕 +3 位作者秦爱建顾玉芳张莹钟蓓《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期3-7,共5页; 用位于内源性禽白血病病毒ev/J 5′和3′长末端序列(LTR)上的引物,对我国的灵山麻鸡、江汉鸡、肉鸡和SPF鸡正常基因组中内源性ev/J进行扩增,结果扩增出长约为4 kb、2.2 kb和2 kb 3种大小的片段。测序分析表明,这些片段分属于Ⅱ型和Ⅳ型e... 展开更多; 关键词内源性禽白血病病毒ev/J 基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

禽内源白血病病毒ev3、ev6和ev21对雏鸡免疫器官指数和血清指标的影响被引量：1: 4; 作者郭艳丽逯春香 +3 位作者王涛王德贺李兰会王麒《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第18期56-62,共7页; 试验旨在探究禽内源性白血病病毒ev3、ev6和ev21对雏鸡免疫性能的影响。试验利用PCR技术检测太行鸡、大午金凤雏鸡的羽型和ev3、ev6、ev21整合性,测定雏鸡的体重、免疫器官指数,利用ELISA技术检测雏鸡血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M... 展开更多; 关键词雏鸡禽内源性白血病病毒 ev3 ev6 ev21 免疫器官指数免疫球蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因敲除被引量：1: 1; 作者徐天鹏吴思乐温健韦义荣李思佳谢龙虞霖田宋中宝陆阳清; 机构广西大学动物科学技术学院/亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁市良凤农牧有限责任公司; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2259-2266,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31960157) 广西大学大学生创新创业训练计划项目(201910593306)。; 文摘【目的】探索在慢羽鸡成纤维细胞中敲除ev21基因的可行性,净化鸡群内源性逆转录病毒,同时为快速培育缺失ev21基因的慢羽鸡配套系打下基础。【方法】根据ev21基因序列(KY235336)特点,分别在其5’和3’端各设计2个sgRNA,用于构建4种不同sgRNA的打靶质粒,筛选出在5’和3’端打靶效率较高的sgRNA。然后基于CRISPR/Cas9基因编辑技术对ev21基因进行剪切,并通过同源重组方式以红色荧光蛋白(mCherry)的DNA片段(CAG-mCherry)替换ev21基因,实现对慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因定点敲除。【结果】在慢羽鸡成纤维细胞中能检测到ev21基因,构建的4种sgRNA(sgRNA1~sgRNA4)均能成功插入对应的打靶质粒中,经嘌呤霉素筛选及T7E1酶切检测,发现转染4种不同sgRNA打靶质粒后慢羽鸡成纤维细胞均有不同程度的死亡,其中又以sgRNA1和sgRNA3的基因敲除效率较高。同时针对同源位点左右同源臂构建表达mCherry的供体质粒,以其转染293T细胞12 h后均能表达出mCherry。以sgRNA1和sgRNA3打靶质粒及供体质粒共同转染慢羽鸡成纤维细胞,观察发现成纤维细胞内的mCherry持续表达,至转染后第30 d通过流式细胞仪分选收集红色荧光阳性成纤维细胞,并提取其总DNA进行PCR鉴定与基因测序,结果显示红色荧光阳性成纤维细胞中有目的片段(CAG-mCherry)插入,即以插入替换方式能实现对ev21基因的敲除。【结论】基于crispr/cas9基因编辑技术的基因敲除方法能成功敲除慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因,为培育缺失ev21基因的慢羽鸡品系提供技术支持。; 关键词慢羽鸡禽白血病病毒(ALV) ev21基因 CRISPR/Cas9 基因敲除; Keywords slow feathering chicken avian leukemia virus(ALV) ev21 gene CRISPR/Cas9 gene knockout; 分类号 S831.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡内源性白血病毒ev21与其侧翼区SNP位点的连锁关系被引量：2: 2; 作者葛琳涵白少川李雪梅赵丽杰乔宁李兰会; 机构河北农业大学动物科技学院华裕农业科技有限公司河北省牛羊胚胎工程技术研究中心; 出处《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期101-107,共7页; 基金河北省现代农业产业技术体系蛋肉鸡产业创新团队资金项目(HBCT2018150201) 河北省重点研发计划项目(19226320D、20326350D) 河北农业大学科研发展基金计划项目(JY2018037).; 文摘鸡内源逆转录病毒ev21的转录表达影响宿主机体健康。本试验通过PCR检测海兰褐、太行鸡、海兰灰和SPF鸡292份DNA样品的ev21阴阳性、羽型和性别,测序筛选ev21插入位点OS和US区的SNP位点,Mbo II酶切检测C>T突变的群体多样性,分析C>T突变与ev21整合的连锁关系;最后利用TRANSFAC®Professional预测C>T突变引起的转录因子变化。测序峰图发现,ev21插入位点上游278 bp处的C>T突变。OS和US共有610 bp酶切结果发现,快羽ev21阴性鸡为CC基因型,快羽ev21阳性鸡为CT基因型;慢羽除海兰灰和海兰褐祖代ev21阳性鸡为TT基因型外,其他均为CT基因型。OS特异1036 bp酶切显示ev21整合的OS区全部为T单倍型,C>T突变造成转录因子结合变化。研究表明ev21整合的OS区和未整合的US区的C>T突变有5种单倍型,ev21整合与T等位基因连锁。; 关键词鸡内源性白血病病毒ev21 SNP 连锁转录因子; Keywords chickens endogenous leukemia virus ev21 SNP linkage transcription factor; 分类号 S831.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名内源性禽白血病病毒ev/J基因克隆与分析: 3; 作者杨玉莹梁雄燕秦爱建顾玉芳张莹钟蓓; 机构长江大学动物科学学院扬州大学兽医学院; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期3-7,共5页; 文摘用位于内源性禽白血病病毒ev/J 5′和3′长末端序列(LTR)上的引物,对我国的灵山麻鸡、江汉鸡、肉鸡和SPF鸡正常基因组中内源性ev/J进行扩增,结果扩增出长约为4 kb、2.2 kb和2 kb 3种大小的片段。测序分析表明,这些片段分属于Ⅱ型和Ⅳ型ev/J以及另一类具有更大缺失的ev/J基因。ev/J在这几个品系鸡中分布并不完全相同,肉鸡和SPF鸡均具有Ⅱ型和Ⅳ型ev/J,江汉鸡只含Ⅱ型ev/J,而灵山麻鸡则含有另一类具有更大缺失的ev/J基因。此次获得的Ⅳ型ev/J序列不仅相互之间高度同源,而且其env基因与外源性ALV-J原型株HPRS-103env基因以及我国外源性ALV-J主要分离株env基因也高度同源,表明内源性ev/J在宿主正常基因组中高度保守。; 关键词内源性禽白血病病毒ev/J 基因克隆序列分析; Keywords endogenous avian leukemia virus ev/J gene cloning sequence analysis; 分类号 S852.659.3 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名禽内源白血病病毒ev3、ev6和ev21对雏鸡免疫器官指数和血清指标的影响被引量：1: 4; 作者郭艳丽逯春香王涛王德贺李兰会王麒; 机构河北农业大学动物科技学院张家口市畜牧技术推广站河北省畜牧兽医研究所; 出处《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第18期56-62,共7页; 基金河北省自然科学基金(项目编号:C2021204087) 河北省现代农业产业技术体系蛋肉鸡产业创新团队资金项目(项目编号:HBCT2018150201) 河北省鸡现代种业科技创新团队(项目编号:21326303D)。; 文摘试验旨在探究禽内源性白血病病毒ev3、ev6和ev21对雏鸡免疫性能的影响。试验利用PCR技术检测太行鸡、大午金凤雏鸡的羽型和ev3、ev6、ev21整合性,测定雏鸡的体重、免疫器官指数,利用ELISA技术检测雏鸡血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素10(IL-10)含量。结果显示,ev3在太行鸡的整合阳性率显著高于大午金凤鸡(P<0.05)。ev3整合阳性太行鸡的法氏囊指数显著高于阴性个体(P<0.05),体重显著低于阴性个体(P<0.05)。ev21阴性太行鸡体重显著高于阳性鸡(P<0.05)。太行鸡母鸡体重和免疫器官总重显著高于公鸡(P<0.05)。ev3阳性太行鸡血清IgG和IL-4含量显著高于ev3阴性鸡(P<0.05)。ev6阳性太行鸡血清IL-10含量显著低于ev6阴性鸡(P<0.05)。ev3阳性大午金凤鸡血清IgM含量显著低于ev3阴性鸡(P<0.05)。ev21阳性慢羽大午金凤公鸡血清IL-4含量显著高于ev21阴性快羽母鸡(P<0.05)。太行慢羽鸡和母鸡的血清IgG含量显著高于快羽鸡和公鸡(P<0.05)。ev21阴性太行快羽鸡血清IgG含量显著低于ev21阴性太行慢羽鸡和ev21阳性太行慢羽鸡(P<0.05)。研究表明,ev3整合提高了1日龄太行鸡的免疫性能,降低了其体重和大午金凤鸡血清IgM含量;ev6整合降低了太行鸡血清IL-10含量;ev21整合降低了1日龄太行鸡的体重,提高了大午金凤鸡血清IL-4含量。; 关键词雏鸡禽内源性白血病病毒 ev3 ev6 ev21 免疫器官指数免疫球蛋白; Keywords chickens avian endogenous leukosis virus ev3 ev6 ev21 immune organ index immunoglobulin; 分类号 S831 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因敲除	徐天鹏吴思乐温健韦义荣李思佳谢龙虞霖田宋中宝陆阳清	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	鸡内源性白血病毒ev21与其侧翼区SNP位点的连锁关系	葛琳涵白少川李雪梅赵丽杰乔宁李兰会	《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	内源性禽白血病病毒ev/J基因克隆与分析	杨玉莹梁雄燕秦爱建顾玉芳张莹钟蓓	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	禽内源白血病病毒ev3、ev6和ev21对雏鸡免疫器官指数和血清指标的影响	郭艳丽逯春香王涛王德贺李兰会王麒	《饲料研究》 CAS 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料