瞬时感受器电位香草酸受体3促进胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭

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作者 李忠华 李慧峰 李晓蕾 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期394-397,共4页

目的 研究瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)通道蛋白对胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭的影响及分子机制。方法应用siRNA技术敲除U251细胞中TRPV3的表达,MTT方法检测细胞的增殖能力,Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属... 目的 研究瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)通道蛋白对胶质瘤U251细胞系增殖和侵袭的影响及分子机制。方法应用siRNA技术敲除U251细胞中TRPV3的表达,MTT方法检测细胞的增殖能力,Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果 敲除TRPV3表达后U251细胞增殖和侵袭能力下降,磷酸化的CaMKⅡ和cyclin D1的表达也受到抑制。结论 TRPV3通道蛋白能够促进胶质瘤U251细胞的增殖和侵袭能力。其机制是TRPV3通道开放,细胞外Ca2^+内流,cyclin D1过表达促进细胞的增殖。 展开更多

关键词 瞬时感受器电位香草酸受体3 胶质瘤 增殖 侵袭 细胞周期蛋白D1

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瞬时受体电位M7通道蛋白对大鼠肝星状细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 刘红 李俊 +2 位作者 黄成 黄艳 周德喜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期486-489,共4页

目的通过转染特异性siRNA,下调瞬时受体电位M7通道蛋白(TRPM7)在大鼠肝星状细胞系HSC-T6中的表达,研究其对HSC-T6凋亡的影响及内在机制。方法利用Li-pofectamineTM2000将特异性TRPM7-siRNA转染到HSC-T6内,分别运用流式细胞术检测HSCs凋... 目的通过转染特异性siRNA,下调瞬时受体电位M7通道蛋白(TRPM7)在大鼠肝星状细胞系HSC-T6中的表达,研究其对HSC-T6凋亡的影响及内在机制。方法利用Li-pofectamineTM2000将特异性TRPM7-siRNA转染到HSC-T6内,分别运用流式细胞术检测HSCs凋亡变化;Western blot检测TRPM7、Caspase-3蛋白的表达;RT-PCR检测TRPM7,Caspase-3、Bid mRNA的表达。结果 TRPM7-siRNA明显抑制TRPM7 mRNA和蛋白的表达。与正常组或对照组相比,转染组细胞凋亡率、凋亡蛋白Caspase-3及凋亡基因Bid的表达均明显上调。结论特异性TRPM7-siRNA能明显抑制TRPM7表达,诱导HSCs凋亡,其机制可能与其诱导凋亡基因Bid表达上调有关。 展开更多

关键词 瞬时受体电位M7通道 肝星状细胞 细胞凋亡 SIRNA CASPASE-3 BID

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瞬时受体电位M2抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧细胞的保护作用 被引量：1

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作者 黄卓群 余夏飞 +5 位作者 刘星宇 马康 黄敏华 李芳芳 杨巍 牛建国 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期106-112,共7页

目的:探讨瞬时受体电位M2(TRPM2)抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧(OGD/R)细胞模型的保护作用。方法:采用SH-SY5Y细胞系制备OGD/R损伤模型。将细胞随机分为空白对照组、模型对照组和A10组。细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;活性氧检测试剂... 目的:探讨瞬时受体电位M2(TRPM2)抑制剂A10对缺糖缺氧后复糖复氧(OGD/R)细胞模型的保护作用。方法:采用SH-SY5Y细胞系制备OGD/R损伤模型。将细胞随机分为空白对照组、模型对照组和A10组。细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;活性氧检测试剂盒检测细胞活性氧水平;四甲基罗丹明甲酯法检测线粒体膜电位;一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测凋亡细胞数量;蛋白质印迹法测定cleaved caspase 3蛋白表达。结果:相对于3、20、30、50和100μmol/L,10μmol/L浓度的A10具有较低的细胞毒性及较好的通道活性抑制作用。与模型对照组比较,A10组活性氧水平降低(P<0.05),线粒体膜电位降低程度改善(P<0.05),凋亡细胞数减少(P<0.05),凋亡相关蛋白cleaved caspase 3表达减少(P<0.05)。结论:A10可以通过抑制TRPM2通道功能、减少细胞外钙离子内流、降低细胞活性氧水平、稳定线粒体膜电位水平和减少细胞凋亡缓解OGD/R后细胞的损伤。 展开更多

关键词 瞬时受体电位M2通道 缺糖缺氧/复糖复氧 活性氧 线粒体膜电位 细胞凋亡 Cleaved caspase 3 SH-SY5Y细胞

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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型中TRPC3通路介导的神经自噬研究

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作者 薛梅 杨丽 +2 位作者 樊晓艳 李玲 钱金明 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期978-985,共8页

目的:探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型中TRPC3通路介导的神经自噬作用。方法:7日龄Sprague-Dawley(SD)雄性幼鼠随机分为4组,每组20只,分别为Sham组、HIBD组、HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组。HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组在诱导HIBD模型... 目的:探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型中TRPC3通路介导的神经自噬作用。方法:7日龄Sprague-Dawley(SD)雄性幼鼠随机分为4组,每组20只,分别为Sham组、HIBD组、HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组。HIBD+Vector组和HIBD+TRPC3组在诱导HIBD模型前24 h,分别将Vector或TRPC3注射到左侧脑室中。评估各组幼鼠脑梗死面积、神经系统评分、脑水肿体积、神经元凋亡和线粒体自噬。体外将小鼠海马神经元细胞系(HT22)分为以下6组:Control组、OGD/R组、OGD/R+TRPC3组、OGD/R+NC组、OGD/R+si-Pink1组和OGD/R+TRPC3+si-Pink1组。除Control组外,其他组使用氧气-葡萄糖剥夺/再灌注(Oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)方法建立体外脑缺血再灌注模型。通过线粒体膜电位的检测线粒体损伤情况。结果:与Sham组相比,HIBD组和HIBD+Vector组显示出较大的梗死面积、脑含水量、神经学评分和神经元凋亡(P<0.05)。HIBD+TRPC3组的梗死面积、脑含水量、神经学评分和神经元凋亡较HIBD+Vector组明显降低(P<0.05)。与Sham组相比,HIBD组和HIBD+Vector组线粒体自噬相关蛋白PTEN诱导假定激酶1(PTEN induced putative kinase 1,Pink1)、E3泛素连接酶(Parkin RBR E3 ubiquitin protein ligase,Parkin)和微管相关蛋白轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ的表达水平增加(P<0.05)。与HIBD+Vector组相比,HIBD+TRPC3组Pink1、Parkin和Lc3Ⅱ的表达水平进一步增加(P<0.05)。体外实验显示,TRPC3上调可以强烈增加Pink1、Parkin的表达和Lc3Ⅱ/Lc3Ⅰ比值,以及减少选择性自噬接头蛋白(sequestosome-1,p62)的表达。Pink1沉默可以部分阻止TRPC3对线粒体自噬的影响。TRPC3上调增加了健康线粒体的数量,减少了受损线粒体的数量,提高了HT-22细胞的生存率。然而,Pink1沉默阻止了TRPC3对线粒体功能和增殖能力的恢复。结论:TRPC3通过激活Pink1/Parkin通路介导的线粒体自噬,在HIBD早期阶段中发挥了重要的保护作用。 展开更多

关键词 新生儿 缺血缺氧性脑病 典型的瞬时受体电位3 线粒体自噬

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TRPC3对OIR小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞生物学行为的调控作用

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作者 张越 刘晓静 +10 位作者 甄宇涵 姚瑶 邵斌 徐嫚鸿 王艳辉 刘志强 王伟 毛爱玲 张宝月 张铭连 陈志敏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期331-338,共8页

目的探讨瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3(TRPC3)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞(HREC)生物学行为的调控作用。方法选取健康SPF级7日龄C57BL/6小鼠32只,采用随机数字表法分为对照组和OIR组,每组16只,其... 目的探讨瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3(TRPC3)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞(HREC)生物学行为的调控作用。方法选取健康SPF级7日龄C57BL/6小鼠32只,采用随机数字表法分为对照组和OIR组,每组16只,其中对照组不做特殊处理,OIR组小鼠诱导OIR模型。出生后第17天(PN17)采用视网膜铺片免疫荧光染色验证模型构建是否成功。将体外培养HREC分为正常对照组、转染试剂组和si-TRPC3组,其中正常对照组不做特殊处理,转染试剂组和si-TRPC3组分别采用转染试剂和转染试剂+si-TRPC3转染。采用实时荧光定量PCR法检测TRPC3 mRNA相对表达量;采用Western blot法检测TRPC3、转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)和超氧化物歧化酶(SOD)蛋白相对表达量。另将HREC分为正常对照组、血管内皮生长因子(VEGF)组、si-TRPC3组和Pyr3(TRPC3通道抑制剂)组,分别用完全培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基(si-TRPC3转染72 h)和含有20 ng/ml VEGF重组蛋白+1μmol/L Pyr3的培养基培养48 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测HREC增生能力;分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞横向和纵向迁移能力。结果PN17时OIR组小鼠视网膜出现病理性新生血管团簇强荧光染色。OIR组小鼠视网膜TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量分别为2.057±0.244和1.517±0.290,明显高于对照组的0.983±0.033和0.874±0.052,差异均有统计学意义(t=6.165、3.094,均P<0.05)。si-TRPC3组TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和转染试剂组,Nrf2和SOD蛋白相对表达量明显高于正常对照组和转染试剂组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CCK-8实验结果显示,VEGF组细胞吸光度(A)值明显高于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组细胞A值明显低于VEGF组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,VEGF组细胞横向迁移率高于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组细胞横向迁移率低于VEGF组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Transwell实验结果显示,VEGF组染色细胞数明显多于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组染色细胞数明显少于VEGF组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论OIR模型小鼠视网膜中TRPC3表达水平升高,下调TRPC3可抑制HREC增生和迁移能力,其机制与Nrf2氧化应激通路激活有关。 展开更多

关键词 视网膜疾病 氧化应激 瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3 人视网膜血管内皮细胞

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P2X3与TRPV1在疼痛机制中的相互作用 被引量：6

6

作者 俞婕 杜俊英 方剑乔 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第8期868-871,共4页

疼痛作为最常见的临床症状之一,严重影响患者的生活质量。瞬时感受器电位受体TRPV1与嘌呤类受体P2X3均参与多种病理性疼痛信号的传导,具有多种活化形式。两者间的相互作用报道较少。文中就TRPV1与P2X3参与疼痛信号传导的相互作用进行综... 疼痛作为最常见的临床症状之一,严重影响患者的生活质量。瞬时感受器电位受体TRPV1与嘌呤类受体P2X3均参与多种病理性疼痛信号的传导,具有多种活化形式。两者间的相互作用报道较少。文中就TRPV1与P2X3参与疼痛信号传导的相互作用进行综述,为疼痛的治疗研究提供新的途径。 展开更多

关键词 疼痛 P2X3 瞬时感受器电位受体1 相互作用

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β-淀粉样蛋白诱导的阿尔茨海默病大鼠模型中BDNF与TRPC3的关系 被引量：3

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作者 张利华 张丽艳 +2 位作者 张小康 徐超龙 周义 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期217-221,共5页

目的探讨经典瞬时受体电位通道蛋白3(TRPC3)与脑源性神经营养因子(BDNF)在阿尔茨海默病(AD)大鼠模型海马组织中的表达及其相互关系。方法将SD大鼠随机分为PBS组、AD组和AD+BDNF组。采用β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)侧脑室注射,制备AD模型。B... 目的探讨经典瞬时受体电位通道蛋白3(TRPC3)与脑源性神经营养因子(BDNF)在阿尔茨海默病(AD)大鼠模型海马组织中的表达及其相互关系。方法将SD大鼠随机分为PBS组、AD组和AD+BDNF组。采用β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)侧脑室注射,制备AD模型。BDNF在造模14 d后经侧脑室导管注入。Morris水迷宫实验测定大鼠的空间学习记忆能力。实时PCR和Western blotting分别检测海马组织中TRPC3和BDNF m RNA和蛋白的表达情况。结果 Morris水迷宫实验表明,AD组大鼠第5天逃避潜伏期较PBS组延长(P<0.05);AD+BDNF组大鼠的逃避潜伏期较AD组缩短(P<0.05)。实时PCR及Western blotting结果表明,与PBS组相比,TRPC3和BDNF m RNA和蛋白在AD组表达均降低(P<0.05);与AD组相比,TRPC3 m RNA和蛋白在AD+BDNF组表达均增高(P<0.05)。结论 BDNF和TRPC3在AD大鼠海马组织表达降低;外源性BDNF可能通过上调TRPC3表达,从而改善Aβ1-42导致的AD大鼠空间学习记忆障碍,起到保护神经元的作用。 展开更多

关键词 经典瞬时受体电位通道蛋白3 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 脑源性神经营养因子

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去窦弓神经对自发性高血压大鼠主动脉TRPC3及TRPC6表达的影响 被引量：4

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作者 何杰 陈明 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1037-1040,共4页

目的:研究去窦弓神经(Sinoaortic denervated,SAD)对自发性高血压大鼠(Spontaneous hypertensive rat,SHR)主动脉瞬时受体电位通道C3(Transient receptor potential canonical 3,TRPC3)及TRPC6亚型表达的影响,探讨TRPC3及TRPC6与血压变... 目的:研究去窦弓神经(Sinoaortic denervated,SAD)对自发性高血压大鼠(Spontaneous hypertensive rat,SHR)主动脉瞬时受体电位通道C3(Transient receptor potential canonical 3,TRPC3)及TRPC6亚型表达的影响,探讨TRPC3及TRPC6与血压变异(Blood pressure variability,BPV)的关系。方法:14只10周龄雄性SHR随机分为SAD组和假手术组,各7只。术后8周在清醒、自由活动状态下测定两组大鼠24 h动脉血压及BPV,采用逆转录多聚酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测主动脉组织TRPC3及TRPC6信使核糖核苷酸(Messenger ribonucleic acid,mRNA)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)与免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)检测其蛋白的表达。结果:术后8周,两组大鼠24 h平均收缩压(Systolic blood pressure,SBP)和舒张压(Diastolic blood pressure,DBP)比较无显著性差异;SAD组24 h收缩压变异(Systolic blood pressure variability,SBPV)显著高于假手术组大鼠(P<0.05),SAD组24 h舒张压变异(Diastolic blood pressure variability,DBPV)亦显著高于假手术组大鼠(P<0.01),主动脉组织TRPC3及TRPC6的mRNA和蛋白表达均显著高于假手术组大鼠(P<0.01),差异均有统计学意义。结论:SAD组大鼠SBPV和DBPV升高,同时TRPC3及TRPC6的mRNA和蛋白表达升高,提示TRPC3及TRPC6的升高与其BPV升高密切相关,TRPC3及TRPC6可能参与BPV的调控。 展开更多

关键词 去窦弓神经 瞬时受体电位通道C3、C6 血压变异

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吡唑化合物pyr3干预对压力负荷诱导的大鼠左心室肥厚的影响 被引量：3

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作者 田小芍 陈明 刘春霞 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期226-229,共4页

目的：探讨瞬时受体电位通道C亚族3亚型（TRPC3）的选择性阻滞剂吡唑化合物Ethyl-1-（4-f2，3，3一trichloroacrylamide）phenyl）-5-（trifluoromethyl）-1H—pyrazole-4-carboxylate（pyr3）的体内干预对压力负荷大鼠左心室肥厚（LvH... 目的：探讨瞬时受体电位通道C亚族3亚型（TRPC3）的选择性阻滞剂吡唑化合物Ethyl-1-（4-f2，3，3一trichloroacrylamide）phenyl）-5-（trifluoromethyl）-1H—pyrazole-4-carboxylate（pyr3）的体内干预对压力负荷大鼠左心室肥厚（LvH）程度的影响。方法：采用腹主动脉缩窄手术建立左心压力负荷模型。30只200—240g雄性SD大鼠随机分为五组（n=6）：假手术对照组、手术对照组、假手术后全程给药组、手术后后期给药组，手术后全程给药组。6周后，计算各组大鼠左心室质量指数、左心室心肌细胞横径，逆转录多聚酶连反应（RT—PCR）、免疫组织化学和蛋白免疫印迹检测TRPC3和钙调神经磷酸酶A13信使核糖核酸（mRNA）和蛋白的表达水平。结果：与假手术对照组相比，手术对照组左心室肥厚相关指标（左心室质量指数和左心室心肌细胞横径）及TRPC3、钙调神经磷酸酶AB蛋白和mRNA的表达显著升高；假手术后全程给药组左心室肥厚相关指标无显著变化，而TRPC3和钙调神经磷酸酶AB蛋白及mRNA的表达量显著升高，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。与手术对照组比较，手术后全程给药组左心室肥厚相关指标、TRPC3及钙调神经磷酸酶A13蛋白和mRNA表达均明显降低（P均〈0．05）；手术后后期给药组左心室肥厚相关指标及钙调神经磷酸酶AB蛋白和mRNA的表达下降，差异均有统计学意义（P均〈0．05），而TRPC3的蛋白和mRNA表达未见显著降低。结论：pyr3体内干预能够一定程度上阻止压力负荷导致的大鼠左心室肥厚，降低压力负荷大鼠左心室TRPC3和钙调神经磷酸酶AB表达的上调。 展开更多

关键词 Ethyl-1-(4-(2 3 3-trichloroacrylamide)phenyl)-5-(trifluoromethyl)-1H—pyrazole-4-carboxylate 压力负荷 左心室肥厚 瞬时受体电位通道C亚族3亚型 钙调神经磷酸酶Aβ

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TRPC3参与α-突触核蛋白引起的线粒体损伤 被引量：2

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作者 卢勇泉 陈敏 +3 位作者 高歌 段春礼 鲁玲玲 杨慧 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第6期857-862,共6页

目的探讨经典型瞬时受体电位通道3(transient receptor potential canonical channel 3,TRPC3)是否参与α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)引起的线粒体损伤。方法在α-syn过表达原代培养神经元、α-syn转基因及敲除小鼠模型,利用免疫... 目的探讨经典型瞬时受体电位通道3(transient receptor potential canonical channel 3,TRPC3)是否参与α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)引起的线粒体损伤。方法在α-syn过表达原代培养神经元、α-syn转基因及敲除小鼠模型,利用免疫印迹和免疫荧光技术检测TRPC3和α-syn在线粒体内的定位和表达;在原代培养神经元,运用MTT和乳酸脱氢酶法检测细胞活力和受损情况,JC-1法检测线粒体膜电势,观察敲减TRPC3对α-syn过表达引起的线粒体损伤和细胞损伤的影响。结果 TRPC3和α-syn共同表达于线粒体,过表达α-syn增加TRPC3在线粒体的分布,敲除α-syn则下调TRPC3在线粒体的分布。敲减TRPC3明显减轻过表达α-syn引起的线粒体膜电势下降和细胞毒性。结论 TRPC3可能参与过表达α-syn引起的线粒体损伤。 展开更多

关键词 帕金森病 神经元 Α-突触核蛋白 瞬时受体电位通道3 线粒体

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NLRP3在TRPC3介导癫痫的过程中表达升高 被引量：1

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作者 卢敏 杨虹 贺细菊 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期650-654,共5页

目的研究经典型瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)在促发癫痫过程中对焦亡相关因子NLRP3表达的影响,探讨TRPC3在癫痫发病过程中的作用机制。方法 HEK293细胞系转染TRPC3,采用钙影像技术检测TRPC3... 目的研究经典型瞬时受体电位通道蛋白3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)在促发癫痫过程中对焦亡相关因子NLRP3表达的影响,探讨TRPC3在癫痫发病过程中的作用机制。方法 HEK293细胞系转染TRPC3,采用钙影像技术检测TRPC3介导钙离子内流的作用;采用免疫组织化学法检测癫痫患者手术切除海马标本中NLRP3的表达情况;制作海人酸(KA)癫痫大鼠模型,利用TRPC3特异性抑制剂Pyr3阻断TRPC3,观察动物行为学改变,以免疫组织化学法和Western blot技术检测动物海马组织中NLRP3的表达水平。结果 TRPC3可通过ROCE和SOCE途径介导钙离子内流进入细胞;癫痫患者和癫痫模型大鼠海马组织内NLRP3水平显著升高;阻断TRPC3后模型大鼠癫痫发作减轻,且NLRP3表达水平降低。结论 TRPC3促进癫痫发病的过程与激活炎性体NLRP3有关。 展开更多

关键词 经典型瞬时受体电位通道蛋白3 癫痫 焦亡 炎性体 NLRP3

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阿尔茨海默病小鼠模型中TRPC3通过上调ZO-1和LRP-1蛋白表达清除β淀粉样蛋白沉积 被引量：5

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作者 张舒蕾 张丽艳 +2 位作者 李珍慧 安一鸣 高翔宇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1116-1120,共5页

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)小鼠模型中经典瞬时受体电位通道3 (TRPC3)和血脑屏障(BBB)在β淀粉样蛋白(Aβ)沉积清除中的关系。方法 将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、二酰基甘油类似物(OAG)组和吡啶化合物(Pyr3)组,每组15只。侧脑... 目的 探讨阿尔茨海默病(AD)小鼠模型中经典瞬时受体电位通道3 (TRPC3)和血脑屏障(BBB)在β淀粉样蛋白(Aβ)沉积清除中的关系。方法 将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、二酰基甘油类似物(OAG)组和吡啶化合物(Pyr3)组,每组15只。侧脑室注射Aβ1-42建立AD小鼠模型。OAG组和Pyr3组小鼠分别连续21 d腹腔注射TRPC3激动剂OAG和抑制剂Pyr3。应用Morris水迷宫实验检测小鼠行为学,伊文思蓝(EB)染色检测小鼠BBB通透性,Western blotting检测小鼠紧密连接蛋白(ZO-1)、Aβ转运受体低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (LRP-1)表达水平,ELISA测定小鼠海马和血清Aβ1-42浓度。结果 与假手术组比较,模型组小鼠学习记忆能力下降(P <0.001),EB含量增加(P <0.05),ZO-1、LRP-1蛋白表达下降(均P <0.01),脑组织和血清Aβ浓度均升高(P <0.01,P <0.05);与模型组比较,OAG组小鼠的学习记忆能力明显改善(P <0.05),EB含量下降(P <0.05),ZO-1、LRP-1蛋白表达增加(均P <0.05),脑组织Aβ浓度下降(P <0.05),血清Aβ浓度升高(P <0.05)。结论 AD小鼠中,TRPC3可能通过恢复BBB通透性和功能,上调ZO-1和LRP-1蛋白表达,加快脑组织对Aβ沉积的清除,从而改善AD行为学症状。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 经典瞬时受体电位通道3 低密度脂蛋白受体相关蛋白1 Β淀粉样蛋白

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β淀粉样蛋白诱导的阿尔茨海默病小鼠模型中BDNF通过上调TRPC3发挥神经保护作用 被引量：5

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作者 李爽 张丽艳 +2 位作者 李雪建 周义 金戈 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1086-1090,共5页

目的通过给予脑源性神经营养因子(BDNF)特异性受体酪氨酸激酶受体B(TrkB)激动剂7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)、经典瞬时受体电位通道蛋白3(TRPC3)激动剂二酰基甘油类似物(OAG)和抑制剂吡唑化合物(Pyr3),研究BDNF对阿尔茨海默病(AD)小鼠的神... 目的通过给予脑源性神经营养因子(BDNF)特异性受体酪氨酸激酶受体B(TrkB)激动剂7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)、经典瞬时受体电位通道蛋白3(TRPC3)激动剂二酰基甘油类似物(OAG)和抑制剂吡唑化合物(Pyr3),研究BDNF对阿尔茨海默病(AD)小鼠的神经保护作用以及BDNF与TRPC3的相互关系。方法将费城癌症研究所小鼠随机分为对照组、AD组、AD+7,8-DHF组、AD+OAG组和AD+7,8-DHF+Pyr3组,每组16只。小鼠侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ)1-42制备AD小鼠模型;Morris水迷宫实验评估小鼠的空间学习记忆能力;Western blotting检测海马突触相关蛋白(synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α)和TRPC3蛋白的表达;ELISA检测海马Aβ1-42的沉积程度。结果与AD组相比,AD+7,8-DHF组和AD+OAG组小鼠学习记忆能力增强,Aβ沉积减轻,synapsin-Ⅰ、CaMKⅡ-α和TRPC3蛋白的表达增加;与AD+7,8-DHF组相比,AD+7,8-DHF+Pyr3组上述指标变化趋势相反。结论BDNF通过上调TRPC3蛋白表达减轻Aβ异常沉积,进而改善AD小鼠的神经突触和认知功能。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 经典瞬时受体电位通道蛋白3 脑源性神经营养因子 Β淀粉样蛋白

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PI3K/AKT通路与TRPC6通道在AngⅡ诱导足细胞损伤中的相互作用 被引量：7

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作者 王先鹤 吴慢 +1 位作者 邓芳 高慧 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第6期882-887,共6页

目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球足细胞损伤过程中的作用及其可能机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,分别利用AngⅡ、氯沙坦、PI3K/AKT... 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球足细胞损伤过程中的作用及其可能机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,分别利用AngⅡ、氯沙坦、PI3K/AKT通路抑制剂(LY294002)、TRPC6通道阻滞剂(SKF96365)进行处理,将细胞分为空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+氯沙坦组、氯沙坦组、AngⅡ+LY294002组、LY294002组、AngⅡ+SKF96365组、SKF96365组,采用qRT-PCR检测各分组细胞TRPC6 mRNA的变化。采用Western blot检测各分组细胞AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、TRPC6蛋白质表达的变化。采用Hoechst 33258染色法检测各组足细胞凋亡情况。结果与空白对照组相比,AngⅡ组AKT磷酸化水平降低,TRPC6的表达升高,足细胞凋亡增加(P<0.05)。与AngⅡ组相比:AngⅡ+SKF96365组AKT磷酸化水平升高,TRPC6的表达下降,足细胞凋亡减少(P<0.05);AngⅡ+LY294002组AKT磷酸化水平减少,足细胞凋亡增加(P<0.05);AngⅡ+氯沙坦组AKT磷酸化水平升高,TRPC6的表达下降,足细胞凋亡减少(P<0.05)。结论AngⅡ可能通过激活TRPC6通道进而抑制PI3K/AKT通路的激活而导致足细胞损伤。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 足细胞 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6

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温度敏感Ca^(2+)通透TRPV3通道的结构与功能 被引量：2

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作者 孙嘉 蘧雅璇 王克威 《生理科学进展》 CAS 2023年第1期4-12,共9页

瞬时受体电位香草酸3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)是Ca^(2+)通透的非选择阳离子通道,可被>33℃温度激活。TRPV3在皮肤屏障修复、瘙痒和炎症等疾病的发展过程中扮演重要的角色,其点突变导致以过度角化、瘙痒和... 瞬时受体电位香草酸3(transient receptor potential vanilloid 3,TRPV3)是Ca^(2+)通透的非选择阳离子通道,可被>33℃温度激活。TRPV3在皮肤屏障修复、瘙痒和炎症等疾病的发展过程中扮演重要的角色,其点突变导致以过度角化、瘙痒和脱发为特征的罕见人类遗传病—Olmsted综合征。研究表明,TRPV3是瘙痒和皮肤疾病的潜在治疗靶点,特异性抑制TRPV3可能具有应用前景。本文就TRPV3结构与功能及其病理特别是皮肤疾病相关病理的最新研究进展作一综述。 展开更多

关键词 瞬时受体电位香草酸3 瘙痒 奥姆斯特综合征 2-氨基乙氧基二苯硼酸盐 香芹酚

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阻断TRPC3通道加重新生大鼠缺氧缺血性脑损伤

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作者 赵琪 涂柳 +1 位作者 王岩 陈笛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期470-477,共8页

经典瞬时受体电位3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)通道是胎儿期和围生期中枢神经系统中广泛表达的非特异性阳离子通道,参与体内众多生理和病理过程。有研究证明,TRPC3通道是细胞内钙稳态的重要调节者,调节包括细胞... 经典瞬时受体电位3(transient receptor potential canonical 3,TRPC3)通道是胎儿期和围生期中枢神经系统中广泛表达的非特异性阳离子通道,参与体内众多生理和病理过程。有研究证明,TRPC3通道是细胞内钙稳态的重要调节者,调节包括细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)通路在内的多条钙敏感胞内信号转导通路的活性,最终影响神经元的生存或死亡。但TRPC3通道在新生动物缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型中的作用及其机制尚未见报道。本研究取新生7 d的SD大鼠,采用右侧颈总动脉结扎和缺氧(8%O2)2.5 h制备HIBD模型,观察腹腔注射选择性TRPC3阻断剂pyr3(5 mg/kg和20 mg/kg)对缺氧缺血处理后,急性期和长期神经行为学及脑组织损伤程度的影响。神经功能缺损评分和平衡木实验结果显示,用pyr3特异性阻断TRPC3可恶化缺氧缺血大鼠的神经行为学障碍;脑组织含水量检测、TTC染色和患/健侧脑重比等结果显示,pyr3可加重脑水肿,增加脑组织梗死区体积和加重脑萎缩程度。Western印迹实验显示,缺氧缺血可以导致患侧脑组织ERK1/2磷酸化水平一过性升高,阻断TRPC3可以显著抑制ERK1/2的磷酸化,并可上调促凋亡蛋白BAX和下调抗凋亡蛋白BCL-2的表达。上述结果证明,阻断TRPC3通道可以加重新生大鼠的缺氧缺血性脑损伤,其机制可能与其对ERK信号通路活性的调节作用有关,因此可能成为HIBD治疗的潜在作用靶点。 展开更多

关键词 缺氧缺血性脑损伤 经典瞬时受体电位3 细胞外信号调节激酶 凋亡

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敲除TRPC1基因抑制心肌纤维化发生的机制研究 被引量：1

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作者 黄猛珣 陈天苗 +4 位作者 童全秀 王艳 侯勇 张现格 王联发 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第8期806-811,共6页

目的研究瞬时受体电位通道-1(TRPC1)对心肌梗死小鼠心肌纤维化的影响及其可能机制。方法野生型小鼠与TRPC1^(-/-)小鼠各20只,分为4组,野生对照组(WT对照组):只穿线,不结扎;野生实验组(WT实验组),结扎冠状动脉左前降支并缝合;TRPC1^(-/-... 目的研究瞬时受体电位通道-1(TRPC1)对心肌梗死小鼠心肌纤维化的影响及其可能机制。方法野生型小鼠与TRPC1^(-/-)小鼠各20只,分为4组,野生对照组(WT对照组):只穿线,不结扎;野生实验组(WT实验组),结扎冠状动脉左前降支并缝合;TRPC1^(-/-)对照组,只穿线,不结扎;TRPC1^(-/-)实验组,结扎冠状动脉左前降支并缝合。每组各10只。处死后分离得到左心室组织。使用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫蛋白印记(Westernblot)方法检测并比较四组小鼠心肌组织中TRPC1 mRNA和蛋白表达,以及蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)包括ERK1和ERK2、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达的差异。结果RT-PCR检测和Westernblot检测表明:WT实验组TRPC1 mRNA和蛋白均较WT对照组表达量增多(P<0.05),p-AKT、p-GSK-3β、p-ERK蛋白表达量明显减低(P<0.05);TRPC1^(-/-)实验组TRPC1 mRNA表达量和蛋白均较WT实验组降低(P<0.05),p-AKT、p-GSK-3β、p-ERK蛋白表达量明显增多(P<0.01)。WT实验组与WT对照组相比,WT实验组的Collagen-1、α-SMA表达明显增加(P<0.01);WT对照组与TRPC1^(-/-)对照组相比,WT对照组的Collagen-1、α-SMA表达明显增加(P<0.01);TRPC1^(-/-)对照组与TRPC1^(-/-)实验组相比,TRPC1^(-/-)实验组Collagen-1表达量增加(P<0.01);WT实验组与TRPC1^(-/-)实验组相比,WT实验组的Collagen-1、α-SMA表达明显增加(P<0.01)。结论心肌梗死后加重心肌纤维化(MF),敲除TRPC1基因后显著抑制了MF的发生,其可能是通过Akt/GSK3β及ERK信号通路起到抑制MF的作用。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道 心肌梗死 基因敲除 心肌纤维化 蛋白激酶B 糖原合成酶激酶3Β 细胞外调节蛋白激酶

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VEGF及TRPC6的表达与糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的相关机制 被引量：15

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作者 朱晓娜 王玉环 +2 位作者 吴娟娟 董鹏 张敏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期296-304,共9页

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)有无相关性及其相互作用的可能机制。方法随机取正常SD大鼠8只作为正常对照组,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg建立糖尿病肾病大鼠模型40只,并随机分为5组,每组8... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)有无相关性及其相互作用的可能机制。方法随机取正常SD大鼠8只作为正常对照组,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg建立糖尿病肾病大鼠模型40只,并随机分为5组,每组8只。正常对照组及糖尿病肾病组不干预,其余4组分别给予SU5416 10 mg/kg、5 mg/kg(2次/周)以及LY294002 2 mg/kg、1 mg/kg(1次/d)腹腔注射干预8周。检测大鼠血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白生化指标变化情况,观察糖尿病肾病大鼠肾脏组织的病理改变,同时采用Realtime PCR及Western blot观察VEGF、Nephrin、TRPC6 m RNA表达及蛋白质的变化。结果与正常对照组相比,糖尿病肾病组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白升高,Nephrin的表达下降,VEGF及TRPC6的表达升高(P<0.05)。SU5416干预后24 h尿蛋白及尿素氮下降,Nephrin表达升高,VEGF表达无明显变化,TRPC6表达下降(P<0.05)。LY294002干预后24 h尿蛋白下降,Nephrin及VEGF表达无明显变化,TRPC6表达下降(P<0.05)。结论VEGF对TRPC6的调控作用可能是通过PI3K/Akt通路实现的。抑制VEGFR-2和/或者阻断PI3K/Akt信号通路可阻断VEGF对TRPC6的这种调控作用。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 足细胞 血管内皮生长因子 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 磷脂酰肌醇3激酶

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TRPC1缺失对小鼠脑神经细胞生存的影响 被引量：2

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作者 幸仁忠 刘建军 +1 位作者 许华 杨细飞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期686-690,共5页

目的:研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)缺失对小鼠海马神经元生存的影响。方法:选用6月龄TRPC1基因敲除小鼠及其对照小鼠,通过神经元特异性标志物Neu N免疫染色、尼氏染色及TUNEL染色检测TRPC1敲除小鼠海马CA1、CA3及齿状回(DG)神经细胞的... 目的:研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)缺失对小鼠海马神经元生存的影响。方法:选用6月龄TRPC1基因敲除小鼠及其对照小鼠,通过神经元特异性标志物Neu N免疫染色、尼氏染色及TUNEL染色检测TRPC1敲除小鼠海马CA1、CA3及齿状回(DG)神经细胞的变化情况。通过Western blot检测TRPC1基因敲除小鼠促凋亡因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)及凋亡相关蛋白cleaved caspase-3的表达水平。结果:Neu N免疫荧光和尼氏染色发现,TRPC1基因敲除小鼠海马CA1、CA3及DG区神经细胞显著减少;TUNEL染色检测发现TRPC1基因敲除小鼠以上区域神经细胞凋亡显著增加;Western blot结果显示,与对照小鼠相比,TRPC1基因敲除小鼠海马组织CHOP及cleaved caspase-3的水平均显著升高。结论:TRPC1基因缺失可导致小鼠海马神经元数量显著减少,其机制可能与TRPC1缺失促进神经细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 瞬时受体电位通道1 神经元 C/EBP同源蛋白 CASPASE-3

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APETx2对感染后肠易激综合征小鼠内脏敏感性的作用及机制 被引量：3

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作者 肖红云 李欢 +3 位作者 闫波 潘颖 田平平 袁丽萍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期953-958,共6页

目的探讨酸敏感离子通道3特异性拮抗剂(APETx2)对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的调控作用及其机制。方法采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型。通过测量首次排黑便的时间和6 h内收集的粪便颗粒数评估胃肠道运输功能;腹壁... 目的探讨酸敏感离子通道3特异性拮抗剂(APETx2)对感染后肠易激综合征(PI-IBS)小鼠内脏敏感性的调控作用及其机制。方法采用旋毛虫感染NIH小鼠建立PI-IBS模型。通过测量首次排黑便的时间和6 h内收集的粪便颗粒数评估胃肠道运输功能;腹壁回撤反射(AWR)评分评估小鼠内脏敏感性;免疫组织化学法检测结肠组织中降钙素基因相关肽(CGRP)蛋白表达;通过实时定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、CGRP mRNA表达。蛋白质印迹法(Western blot)检测脑组织中酸敏感离子通道3(ASIC3)、CGRP、瞬时受体电位香草素1(TRPV1)蛋白表达。结果与对照组比较,PI-IBS组首次排黑便时间显著降低,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著升高,结肠组织中CGRP蛋白表达显著升高,BDNF、CGRP mRNA显著升高,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著升高;与PI-IBS组比较,APETx2组首次排黑便时间显著延长,6 h内的粪便颗粒数,AWR评分均显著降低,结肠组织中CGRP蛋白表达显著降低,BDNF、CGRP mRNA表达显著降低,脑组织中CGRP、ASIC3、TRPV1的蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论APETx2可通过下调BDNF、CGRP、ASIC3、TRPV1的表达,减轻PI-IBS小鼠的内脏敏感性并调节胃肠道运动。APETx2可能为治疗IBS提供一个新的治疗选择。 展开更多

关键词 感染后肠易激综合征 APETx2 酸敏感离子通道3 降钙素基因相关肽 脑源性神经营养因子 瞬时受体电位香草素1

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