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显微切割联合全自动Western blot在小鼠大脑标记神经元微量蛋白定量中的应用
被引量：
1
1
作者
杨楠
谭思维
+2 位作者
彭艳
周元国
宁亚蕾
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第20期1846-1850,共5页
目的构建及评价收集特定部位的标记神经元,对这类神经元的微量蛋白水平采用定量的方法,并将此方法初步应用于小鼠颅脑创伤后海马亚区神经元中。方法硫堇染色未固定处理的冰冻切片脑组织神经元,激光显微切割收集海马CA1区和DG区神经元,...
目的构建及评价收集特定部位的标记神经元,对这类神经元的微量蛋白水平采用定量的方法,并将此方法初步应用于小鼠颅脑创伤后海马亚区神经元中。方法硫堇染色未固定处理的冰冻切片脑组织神经元,激光显微切割收集海马CA1区和DG区神经元,全自动毛细管Western blot检测收集细胞的磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)蛋白水平。结果全自动毛细管Western blot对低浓度蛋白的检测下限低于传统Western blot 1个数量级,其线性相关系数为98. 85%,日内和日间精密度分别为2. 50%和4. 09%。本方法应用于颅脑创伤小鼠脑组织,发现伤后1 d海马DG区神经元p-PKA显著增高(P <0. 01),CA1区无变化。结论本方法基于激光显微切割和全自动毛细管Western blot,能够实现精确收集指定神经元并准确定量微量蛋白,成功应用于目标神经元蛋白定量,具有在细胞类型众多且混杂分布的组织中进行细胞和分子水平研究的应用前景。
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关键词
激光显微切割
全自动毛细管western
blot
蛋白质定量
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职称材料
乳及乳制品中乳铁蛋白的全自动高通量毛细管凝胶电泳检测方法研究
被引量：
10
2
作者
孙娜娜
刘金虎
+2 位作者
杨孟迪
徐丹
徐秦峰
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2021年第9期52-56,共5页
全自动毛细管凝胶电泳是一种简单、快速的DNA片段定性定量分析方法。本研究利用乳铁蛋白和DNA序列的特异性结合,建立了一种操作简便、分析时间短、高通量的全自动毛细管凝胶电泳检测乳铁蛋白的方法。实验中根据全自动毛细管凝胶电泳后游...
全自动毛细管凝胶电泳是一种简单、快速的DNA片段定性定量分析方法。本研究利用乳铁蛋白和DNA序列的特异性结合,建立了一种操作简便、分析时间短、高通量的全自动毛细管凝胶电泳检测乳铁蛋白的方法。实验中根据全自动毛细管凝胶电泳后游离DNA序列的峰面积是否减少以及减少程度实现乳铁蛋白的定性定量检测。结果表明:该方法特异性、准确性良好。采用预制胶卡夹,解决了人工制胶的繁琐步骤和毛细管区带电泳检测乳铁蛋白需要涂层抑制非特异性吸附的问题,自动化程度高,适用于乳及其制品中乳铁蛋白的快速准确定量检测。
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关键词
全自动
毛细管
凝胶电泳
高通量
乳铁蛋白检测
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职称材料
题名
显微切割联合全自动Western blot在小鼠大脑标记神经元微量蛋白定量中的应用
被引量：
1
1
作者
杨楠
谭思维
彭艳
周元国
宁亚蕾
机构
陆军军医大学(第三军医大学)第三附属医院(野战外科研究所)分子生物学中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第20期1846-1850,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(81571888)
重庆市基础与前沿研究计划项目(CSTC2014jcyjA10072)
文摘
目的构建及评价收集特定部位的标记神经元,对这类神经元的微量蛋白水平采用定量的方法,并将此方法初步应用于小鼠颅脑创伤后海马亚区神经元中。方法硫堇染色未固定处理的冰冻切片脑组织神经元,激光显微切割收集海马CA1区和DG区神经元,全自动毛细管Western blot检测收集细胞的磷酸化蛋白激酶A(p-PKA)蛋白水平。结果全自动毛细管Western blot对低浓度蛋白的检测下限低于传统Western blot 1个数量级,其线性相关系数为98. 85%,日内和日间精密度分别为2. 50%和4. 09%。本方法应用于颅脑创伤小鼠脑组织,发现伤后1 d海马DG区神经元p-PKA显著增高(P <0. 01),CA1区无变化。结论本方法基于激光显微切割和全自动毛细管Western blot,能够实现精确收集指定神经元并准确定量微量蛋白,成功应用于目标神经元蛋白定量,具有在细胞类型众多且混杂分布的组织中进行细胞和分子水平研究的应用前景。
关键词
激光显微切割
全自动毛细管western
blot
蛋白质定量
Keywords
laser microdissection
automated capillary electrophoresis
western
blotting
protein quantification
分类号
R329-33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R338.1 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
乳及乳制品中乳铁蛋白的全自动高通量毛细管凝胶电泳检测方法研究
被引量：
10
2
作者
孙娜娜
刘金虎
杨孟迪
徐丹
徐秦峰
机构
陕西科技大学食品与生物工程学院
出处
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2021年第9期52-56,共5页
基金
国家自然科学基金项目(22074085)
陕西省科技厅项目(2019NY-126,2021NY-174)。
文摘
全自动毛细管凝胶电泳是一种简单、快速的DNA片段定性定量分析方法。本研究利用乳铁蛋白和DNA序列的特异性结合,建立了一种操作简便、分析时间短、高通量的全自动毛细管凝胶电泳检测乳铁蛋白的方法。实验中根据全自动毛细管凝胶电泳后游离DNA序列的峰面积是否减少以及减少程度实现乳铁蛋白的定性定量检测。结果表明:该方法特异性、准确性良好。采用预制胶卡夹,解决了人工制胶的繁琐步骤和毛细管区带电泳检测乳铁蛋白需要涂层抑制非特异性吸附的问题,自动化程度高,适用于乳及其制品中乳铁蛋白的快速准确定量检测。
关键词
全自动
毛细管
凝胶电泳
高通量
乳铁蛋白检测
Keywords
automatic capillary gel electrophoresis
high throughput
lactoferrin detection
分类号
TS252.7 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
显微切割联合全自动Western blot在小鼠大脑标记神经元微量蛋白定量中的应用
杨楠
谭思维
彭艳
周元国
宁亚蕾
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
在线阅读
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职称材料
2
乳及乳制品中乳铁蛋白的全自动高通量毛细管凝胶电泳检测方法研究
孙娜娜
刘金虎
杨孟迪
徐丹
徐秦峰
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2021
10
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职称材料
已选择
0
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参考文献
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