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全细胞膜片钳技术在神经元钙通道药理研究中的应用 被引量:3
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作者 林智颖 张静 +1 位作者 黄天文 陈晓春 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1327-1328,共2页
全细胞膜片钳技术是研究离子通道和药物对离子通道影响的最重要的技术之一,但是由于其对实验技术要求高,对实验标本制备和实验环境、实验用溶液等条件均有严格要求等原因致使其在实际运用中较为困难。本文报告了运用全细胞膜片钳技术进... 全细胞膜片钳技术是研究离子通道和药物对离子通道影响的最重要的技术之一,但是由于其对实验技术要求高,对实验标本制备和实验环境、实验用溶液等条件均有严格要求等原因致使其在实际运用中较为困难。本文报告了运用全细胞膜片钳技术进行神经元钙通道药理研究的一些经验。 展开更多
关键词 全细胞膜片钳技术 海马神经元 电压门控的钙通道 人参皂苷RB1 原代培养 Y管
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应用膜片钳技术研究豆腐果苷对hERG钾通道电生理功能的影响 被引量:3
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作者 贾元威 汪旻晖 +4 位作者 谢海棠 沈杰 张晓楠 司进辉 张翠锋 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第3期252-255,共4页
目的:探讨豆腐果苷对hERG钾离子电流的影响及潜在心脏毒性。方法:使用稳定转染hERG基因的CHO细胞,通过全细胞膜片钳技术检测不同浓度豆腐果苷对hERG通道电流活动的作用。结果:豆腐果苷对hERG钾通道的IC50约为47μmol/L,比临床常规剂量... 目的:探讨豆腐果苷对hERG钾离子电流的影响及潜在心脏毒性。方法:使用稳定转染hERG基因的CHO细胞,通过全细胞膜片钳技术检测不同浓度豆腐果苷对hERG通道电流活动的作用。结果:豆腐果苷对hERG钾通道的IC50约为47μmol/L,比临床常规剂量下人体内峰浓度高1 000倍以上。结论:临床常用剂量下,豆腐果苷发生与hERG通道抑制作用相关的心脏安全性问题的可能性非常小。 展开更多
关键词 豆腐果苷 HERG钾通道 全细胞膜片钳技术 心脏毒性
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松果体素抑制大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流
3
作者 程新萍 开远忠 +2 位作者 吴旭 刘雅静 周江宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期97-100,共4页
目的研究松果体素对培养的大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流(Igly)的调控。方法在培养的大鼠海马神经元上,采用全细胞膜片钳技术,研究松果体素对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果松果体素以浓度依赖的方式可逆地抑制Igly,并且... 目的研究松果体素对培养的大鼠海马神经元甘氨酸激活的全细胞电流(Igly)的调控。方法在培养的大鼠海马神经元上,采用全细胞膜片钳技术,研究松果体素对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果松果体素以浓度依赖的方式可逆地抑制Igly,并且这种抑制作用是非竞争性的,松果体素的抑制作用没有特异的亚基选择性。结论松果体素能以非竞争的方式直接抑制甘氨酸受体介导的电流,这种抑制作用可能对海马区域神经网络的兴奋性产生影响。 展开更多
关键词 松果体素 甘氨酸受体 全细胞膜片钳技术 海马神经元 大鼠 甘氨酸 海马
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泮库溴铵对大鼠颈上交感神经元全细胞N型钙通道电流的影响及其机制的探讨
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作者 颜涛 李士通 +1 位作者 庄心良 徐国辉 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期473-476,共4页
目的 研究泮库溴铵对大鼠颈上交感神经元细胞N型钙通道电流的影响。方法 酶 -机械法急性分离大鼠颈上交感神经元 (SCG)细胞。采用全细胞膜片钳技术 ,记录N型钙通道电流。通过自制“Y”型加药系统将以标准细胞外液稀释的泮库溴铵灌流... 目的 研究泮库溴铵对大鼠颈上交感神经元细胞N型钙通道电流的影响。方法 酶 -机械法急性分离大鼠颈上交感神经元 (SCG)细胞。采用全细胞膜片钳技术 ,记录N型钙通道电流。通过自制“Y”型加药系统将以标准细胞外液稀释的泮库溴铵灌流至细胞周围。记录灌流前、灌流 30s后和冲洗 30s后的N型钙电流。在细胞内液内加入非水解性G蛋白抑制剂GDP·βS ,然后再以 10 μmol/L泮库溴铵灌流后观察N型钙电流的变化。结果  1、4、10、4 0 μmol/L的泮库溴铵可以使钙电流分别增强 12 .6 %、2 4 .2 %、5 6 .6 %和 2 1.9% ,而 10 0和4 0 0 μmol/L的泮库溴铵则分别使N型钙电流减少 14 .1%和 2 5 .5 %。在电极内液中加入G蛋白的非水解性竞争性拮抗剂GDP·βS后 ,10 μmol/L的泮库溴铵对N型钙电流的增强作用消失。 结论 较低浓度的泮库溴铵通过抑制G蛋白调控机制增强交感神经元N型钙通道电流 。 展开更多
关键词 钙通道电流 交感神经元 灌流 大鼠 G蛋白 钙电流 全细胞膜片钳技术 记录 调控机制 兴奋作用
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淫羊藿总黄酮抑制大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流
5
作者 程新萍 朱峰 周可青 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期199-202,共4页
目的研究淫羊藿总黄酮对急性分离的大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流(IGly)的调控。方法在急性分离的大鼠脊髓背角神经元上,采用全细胞膜片钳方法,研究淫羊藿总黄酮对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果淫羊藿总黄酮呈浓度依... 目的研究淫羊藿总黄酮对急性分离的大鼠脊髓背角神经元甘氨酸激活的全细胞电流(IGly)的调控。方法在急性分离的大鼠脊髓背角神经元上,采用全细胞膜片钳方法,研究淫羊藿总黄酮对甘氨酸激活的全细胞电流的调控。结果淫羊藿总黄酮呈浓度依赖性地抑制IGly;淫羊藿总黄酮使甘氨酸的浓度-效应曲线平行右移;淫羊藿总黄酮没有改变甘氨酸受体的离子选择性。结论淫羊藿总黄酮对甘氨酸介导的反应产生抑制作用可能是由于降低了甘氨酸与其受体的亲和力。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 甘氨酸受体 全细胞膜片钳技术 脊髓背角神经元
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SO_2衍生物对大鼠神经元和心肌细胞几种离子通道的影响 被引量:13
6
作者 孟紫强 聂爱芳 +2 位作者 桑楠 杜正清 魏彩玲 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2006年第2期123-134,共12页
为了阐明大气污染物SO2对神经系统和心血管系统的毒作用机制,采用全细胞膜片钳技术研究了SO2衍生物(NaHSO3和Na2SO3,分子比为1∶3)对大鼠海马、背根节神经元和心肌细胞膜上钠、钾、钙离子通道的影响.结果显示:(1)SO2衍生物可显著增大大... 为了阐明大气污染物SO2对神经系统和心血管系统的毒作用机制,采用全细胞膜片钳技术研究了SO2衍生物(NaHSO3和Na2SO3,分子比为1∶3)对大鼠海马、背根节神经元和心肌细胞膜上钠、钾、钙离子通道的影响.结果显示:(1)SO2衍生物可显著增大大鼠海马CA1区神经元钠电流,不影响钠通道的激活过程,但可使钠电流的失活曲线向去极化方向移动,延迟钠通道的失活过程;另外,SO2衍生物可显著增大瞬间外向钾电流(IA)和延迟整流钾电流(IK),不影响IA的激活过程,使IK的激活过程向负电压方向移动,促进IK的激活过程,而使IA的失活曲线向正电压方向移动,延迟IA的失活过程.(2)SO2衍生物显著增大大鼠背根节神经元钠电流(TTX-S钠电流和TTX-R钠电流),可使两种钠电流的激活和失活曲线均向去极化方向移动,但对失活的影响大于对激活的影响,即延迟钠通道的失活过程;SO2衍生物显著增大背根节神经元瞬间外向钾电流(TOCs)和延迟整流钾电流(IK),不影响TOCs的激活过程,但可使IK的激活曲线向超极化方向移动,促进IK的激活.另外,还可使TOCs的失活曲线向去极化方向移动,即延迟TOCs的失活.(3)SO2衍生物可显著增大大鼠心肌细胞L-型钙电流(ICa,L),使ICa,L的激活和失活曲线均向去极化方向移动,但对失活的影响大于对激活的影响;SO2衍生物显著增大心肌细胞钠电流,不影响钠通道的激活过程,但可使钠电流的失活曲线向去极化方向移动,延迟钠通道的失活过程;SO2衍生物显著增大心肌细胞瞬间外向钾电流(Ito),使Ito的激活曲线向超极化方向移动,促进Ito的激活过程,但可使Ito的失活曲线向去极化方向移动,延迟Ito的失活过程;此外,SO2衍生物还可显著增大心肌细胞内向整流钾电流(IK1),但不影响其反转电位.结果表明,SO2衍生物可能通过影响神经元和心肌细胞膜上离子通道的活动而对中枢神经、传导神经以及心血管系统产生不利影响.提示大气SO2污染可能与神经系统和心血管系统疾病的发生有关. 展开更多
关键词 二氧化硫 全细胞膜片钳技术 离子通道 海马神经元 背根节神经元 心肌细胞
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牛磺酸镁对豚鼠心室肌细胞钾离子通道的影响 被引量:12
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作者 于雷 尹永强 +3 位作者 李欣 高卫真 康毅 娄建石 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期203-205,共3页
目的研究牛磺酸镁(taurine magnesium coordination compound,TMC)对正常豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨TMC抗心律失常的作用机制。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录豚鼠单个心室肌细胞IK、IK1的影响... 目的研究牛磺酸镁(taurine magnesium coordination compound,TMC)对正常豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨TMC抗心律失常的作用机制。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录豚鼠单个心室肌细胞IK、IK1的影响。结果应用200μmol·L-1TMC使豚鼠单个心室肌细胞IK在实验电压+70mV时,从给药前(8.67±1.04)pA/pF减少到(6.31±1.16)pA/pF(n=5,P<0.01);TMC对IK1无影响。结论本实验表明TMC具有直接抑制心室肌细胞IK作用,减少IK可能会使动作电位时程(APD)和有效不应期(ERP)延长,这可能是其发挥抗心律失常作用的基础之一。 展开更多
关键词 牛磺酸镁 心律失常 离子通道 全细胞膜片钳技术
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救心复脉注射液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响 被引量:4
8
作者 方芳 宋涛 +4 位作者 谢立新 梁宋平 刘美丽 周宏灏 方云祥 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期521-524,共4页
目的 :探讨救心复脉注射液 (枳实提取液 )有效成分辛弗林 (311)、N 甲基酪胺 (4 17)对豚鼠心室肌细胞膜L型钙通道电流 (ICa L)的影响。方法 :用酶解法分离单个心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察辛弗林、N 甲基酪胺对豚鼠心室肌细... 目的 :探讨救心复脉注射液 (枳实提取液 )有效成分辛弗林 (311)、N 甲基酪胺 (4 17)对豚鼠心室肌细胞膜L型钙通道电流 (ICa L)的影响。方法 :用酶解法分离单个心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察辛弗林、N 甲基酪胺对豚鼠心室肌细胞膜ICa L的影响。结果 :用辛弗林 (10 ,2 5 ,5 0 ,10 0mmol/L)时能增大ICa L,增加率分别为 8.2 7% ,2 7.2 9% ,4 1.0 1%和 4 8.74 % (P <0 .0 5 )。用N 甲基酪胺 (10 ,2 5 ,5 0 ,10 0mmol/L)时能增大ICa L,增加率分别为 10 .0 5 % ,30 .12 % ,4 3.0 5 %和 5 1.90 % (P <0 .0 5 )。辛弗林和N 甲基酪胺只改变电流幅度 ,不改变I V曲线形状。结论 :辛弗林和N 甲基酪胺有浓度依赖性的增大豚鼠心室肌细胞ICa L。 展开更多
关键词 辛弗林 豚鼠 注射液 心室肌细胞膜 L型钙电流 改变 影响 全细胞膜片钳技术 L型钙通道 依赖性
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颈上交感神经节细胞P2X_3受体介导心肌痛伤害性信息作用的电生理研究 被引量:4
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作者 李桂林 梁尚栋 +3 位作者 徐昌水 高云 许宝华 张春平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期193-198,共6页
目的观察心肌缺血致心肌痛伤害性剌激后颈上神经节(superior cervical ganglion,SCG)细胞P2X3受体在心肌痛伤害性信息传递中的作用。方法用全细胞膜片钳技术记录心肌缺血组和对照组大鼠新鲜分离的SCG神经元P2X受体激动剂激活电流及P2X3... 目的观察心肌缺血致心肌痛伤害性剌激后颈上神经节(superior cervical ganglion,SCG)细胞P2X3受体在心肌痛伤害性信息传递中的作用。方法用全细胞膜片钳技术记录心肌缺血组和对照组大鼠新鲜分离的SCG神经元P2X受体激动剂激活电流及P2X3受体特异性拮抗剂A-317491对P2X受体激动剂激活电流的作用。结果①大部分受检细胞对ATP(1~1000μmol.L-1)敏感,ATP-激活电流(IATP)显示快失敏和慢失敏两种形式的内向电流,心肌缺血组IATP明显高于同一浓度时对照组的IATP。②在心肌缺血组SCG细胞,P2X3受体选择性激动剂α、β亚甲三磷酸腺苷(α,β-meATP)产生激活电流,而在对照组SCG细胞只有极少数细胞有此反应,且电流幅度小。③P2X3受体特异性拮抗剂A-317491(100nmol.L-1)对心肌缺血组和对照组ATP(100μmol.L-1)-激活电流均出现抑制作用,且同一浓度的A-317491对心肌缺血组IATP的抑制作用较对照组IATP的作用更为明显。A-317491(100nmol.L-1)使心肌缺血组和对照组SCG细胞α,β-meATP(10μmol.L-1)-激活电流减小,对心肌缺血组的抑制作用更明显。④心肌缺血组和对照组SCG细胞ATP(100μmol.L-1)-激活电流的I-U曲线反转电位不变,均接近0mV。结论心肌缺血后P2X受体激动剂在SCG神经元激活电流增大,P2X3受体特异性拮抗剂A-317491可抑制P2X受体激动剂激活的电流。因此,颈上交感神经节细胞的P2X3受体可能参与心肌痛伤害性感受信息的传递。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 P2X3 受体 心肌痛 颈上神经节 A-317491 全细胞膜片钳技术
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龙血素B抑制大鼠背根神经节细胞辣椒素诱发的电流反应 被引量:11
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作者 王灿 陈素 刘向明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期211-214,共4页
目的探讨龙血素B对大鼠背根神经节细胞辣椒素诱发的辣椒素受体电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术在急性分离的大鼠背根神经节细胞上观察龙血素B对辣椒素诱发的辣椒素受体电流的影响。结果①在-60mV的钳制电位下,辣椒素受体拮抗剂辣... 目的探讨龙血素B对大鼠背根神经节细胞辣椒素诱发的辣椒素受体电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术在急性分离的大鼠背根神经节细胞上观察龙血素B对辣椒素诱发的辣椒素受体电流的影响。结果①在-60mV的钳制电位下,辣椒素受体拮抗剂辣椒卓平可以完全抑制辣椒素受体电流;②不同浓度的龙血素B溶液对辣椒素诱发的受体电流具有浓度依赖的抑制作用;2.0、4.0、8.0和16.0μmol.L-1的龙血素B溶液对辣椒素诱发的受体电流峰值的抑制率分别为15.36%±2.12%、36.41%±2.43%、76.26%±2.16%和96.69%±3.21%(n=10,P<0.05),半数抑制浓度(IC50)为4.9μmol.L-1,Hill系数为2.29。结论龙血素B可以明显抑制辣椒素诱发的辣椒素受体电流,影响痛觉信息的传入,这可能是以龙血素B为重要成分的中药血竭产生镇痛作用的机制之一。 展开更多
关键词 龙血素B 辣椒素 全细胞膜片钳技术 背根神经节
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过氧化氢对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流的影响 被引量:4
11
作者 邓春玉 林曙光 +4 位作者 钱卫民 吴书林 单志新 杨敏 余细勇 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第8期867-870,共4页
目的:研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(Ica,L)的影响。方法:用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流,观察5mmol·L-1H2O2引起单个大鼠心室肌细胞Ica,L改变。结果:在5mmo... 目的:研究过氧化氢(H2O2)对单个大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(Ica,L)的影响。方法:用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞;用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流,观察5mmol·L-1H2O2引起单个大鼠心室肌细胞Ica,L改变。结果:在5mmol·L-1H2O2作用下,大鼠心室肌细胞Ica,L峰值电流密度从4.89±0.52pA/pF增加至9.80±0.65pA/pF(P<0.05,n=10),电流-电压曲线下移,但激活电位、峰电位和翻转电位无明显改变;H2O2对Ica,L激活时间常数-电压曲线无明显影响,但可使其灭活时间常数-电压曲线明显向上移;H2O2对Ica,L稳态激活曲线无明显改变,但可使其稳态失活曲线明显左移,V0.5从(-26.85±5.3)mV左移至(-37.20±4.5)mV(P<0.05,n=5)。结论:H2O2可以增加大鼠心肌细胞Ica,L,且使其失活明显减慢。 展开更多
关键词 过氧化氢 L-型钙通道电流 心肌细胞 全细胞膜片钳技术
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河蟹眼柄神经内分泌细胞Glu受体研究 被引量:2
12
作者 孙金生 高春蕾 相建海 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期647-652,共6页
作者采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经内分泌细胞对 0 0 1— 10mmol/L谷氨基酸 (Glu)的反应 ,并结合药理学方法进行了Glu受体研究。结果表明 ,Glu激活A型和B型细胞离子型Cl... 作者采用全细胞膜片钳技术测定了中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)眼柄视神经节端髓X器官 (MTXO)神经内分泌细胞对 0 0 1— 10mmol/L谷氨基酸 (Glu)的反应 ,并结合药理学方法进行了Glu受体研究。结果表明 ,Glu激活A型和B型细胞离子型Cl-通道蛋白受体 ,诱导快速激活、快速失活的配体门控Cl-通道电流 (IGlu)。依据内外液的Cl-浓度比例引发去极化或超极化反应 ,继续施加Glu ,细胞快速出现脱敏反应 ;去除Glu后 ,细胞约需 2 0s恢复对Glu的敏感状态。IGlu幅值呈浓度依赖性 ,量 效关系曲线呈线形 ,激活阈值为 0 0 1mmol/L ,约 5mmol/L达到饱和。河蟹眼柄神经内分泌细胞IGlu明显受到Cl-通道阻断剂picrotoxin(0 5mmol/L)抑制 ;对离子型Glu受体激动剂Quisqualate、Kainate、NMDA、AMPA不敏感。Ibotenicacid(IA)可模拟Glu诱导快速激活、快速脱敏的Cl-电流 ,并与Glu产生交互脱敏作用。Glu和GABA对河蟹眼柄神经内分泌细胞无交叉脱敏和交叉激活作用 ,甘氨酸 (Gly)没有诱导细胞产生任何反应 ,提示中枢神经系统通过Glu和GABA两套系统实现对眼柄神经内分泌系统的精确调控。 展开更多
关键词 河蟹 眼柄 神经内分泌细胞 中华绒螫蟹 L谷氨基酸 受体 全细胞膜片钳技术
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2型糖尿病患者血清对大鼠心肌细胞钾离子通道的影响 被引量:1
13
作者 王丽宏 艾静 +5 位作者 李强 杨梅 张巾超 杜智敏 何树庄 杨宝峰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期805-805,共1页
关键词 血清处理 钾离子通道 2型糖尿病 心肌细胞 糖尿病患 大鼠 内向整流钾通道 全细胞膜片钳技术
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心肌细胞的急性分离及瞬时外向钾电流的记录 被引量:2
14
作者 张丹 王鑫 +1 位作者 王晞 徐超 《医学研究生学报》 CAS 2010年第8期792-794,共3页
目的在利用全细胞膜片钳技术研究离子通道时,分离出结构功能完整、生理状态良好、耐钙的单个心肌细胞至关重要,文中主要探讨心肌细胞分离及瞬时外向钾电流记录的影响因素。方法使用改良的体外心脏恒温灌流,酶解消化得到单个心肌细胞,并... 目的在利用全细胞膜片钳技术研究离子通道时,分离出结构功能完整、生理状态良好、耐钙的单个心肌细胞至关重要,文中主要探讨心肌细胞分离及瞬时外向钾电流记录的影响因素。方法使用改良的体外心脏恒温灌流,酶解消化得到单个心肌细胞,并采用全细胞膜片钳技术记录瞬时外向钾电流。结果用全细胞膜片钳技术可获得生理状态良好的心肌细胞,并成功的记录到瞬时外向钾电流。结论全细胞膜片钳技术方法简便、稳定,细胞存活率高,并且易于进行全细胞膜片钳实验。 展开更多
关键词 心肌细胞 分离 瞬时外向钾电流 全细胞膜片钳技术
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降纤酶对大鼠急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞动作电位和L型钙电流的影响 被引量:1
15
作者 喻荣辉 刘念 +2 位作者 周强 李泱 王琳 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期24-28,共5页
 目的 探讨降纤酶对大鼠急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞动作电位和 L型钙电流的影响。方法 制成大鼠急性心肌梗死模型, 分两组, 一组对照, 另一组腹腔注射降纤酶0. 2 U/ (100g·d), 共 7 d, 酶解分离梗死周边区心室肌细胞,...  目的 探讨降纤酶对大鼠急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞动作电位和 L型钙电流的影响。方法 制成大鼠急性心肌梗死模型, 分两组, 一组对照, 另一组腹腔注射降纤酶0. 2 U/ (100g·d), 共 7 d, 酶解分离梗死周边区心室肌细胞, 采用全细胞膜片钳技术记录其动作电位和 ICa,L。结果 降纤酶组梗死周边区心室肌细胞 ERP/APD90增大, 受抑制的 ICa,L有所恢复, 峰电流密度显著增大, I V曲线下移, 失活曲线右移, 失活后再恢复速度加快。结论 降纤酶使急性心肌梗死后梗死周边区心室肌细胞ERP/APD90增大, ICa,L有所恢复, 因此具有减少急性心肌梗死后室性心律失常和改善心功能的作用。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 心室肌细胞 降纤酶 动作电位 大鼠 L型钙电流 影响 峰电流 全细胞膜片钳技术 恢复
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β_2受体对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流调控的信号转导途径 被引量:1
16
作者 杨蕙 伍卫 邓春玉 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期454-457,526,共5页
【目的】研究β2肾上腺素受体(β2受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞... 【目的】研究β2肾上腺素受体(β2受体)对心肌梗死大鼠心肌细胞钠钙交换电流(INCX)调控作用的信号转导途径。【方法】雄性健康Wistar大鼠30只,随机分为正常对照和心肌梗死(MI)组,制作MI模型。采用经典的酶分离心肌细胞方法,应用全细胞膜片钳技术记录INCX,予以β2受体激动剂salbutamol、cAMP激动剂forskolin、抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS、PKA抑制剂H89及Gi蛋白抑制剂后记录INCX的变化。【结果】在正常和梗死后4周心肌细胞,forskolin可使INCX电流密度升高108.9%和70.3%(P<0.05),抑制性cAMP类似物Rp-cAMPS可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P<0.05),PTX能增大salbutamol的作用,INCX电流密度较单独予以salbutamol升高36.8%和50.6%(P<0.05),H89可抑制salbutamol升高INCX电流密度的作用(P<0.05)。【结论】β2受体激动可能通过Gi-cAMP-PKA途径参与调节INCX。 展开更多
关键词 Β2肾上腺素受体 心肌梗死 钠钙交换电流 信号转导 全细胞膜片钳技术
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大麻素对人和小鼠视网膜神经节细胞GABA电流的调控差异 被引量:1
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作者 罗雪 刘诗亮 +3 位作者 江梦南 沈雨濛 胡单萍 沈吟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1188-1192,共5页
目的比较人和小鼠视网膜内源性大麻素类受体1(cannabinoid receptor,CB1)的表达差异,观察大麻素受体激动剂WIN55212-2对不同种属视网膜神经节细胞GABA电流的调控作用。方法采用冰冻切片免疫荧光染色,观察CB1受体在视网膜中的表达。制备... 目的比较人和小鼠视网膜内源性大麻素类受体1(cannabinoid receptor,CB1)的表达差异,观察大麻素受体激动剂WIN55212-2对不同种属视网膜神经节细胞GABA电流的调控作用。方法采用冰冻切片免疫荧光染色,观察CB1受体在视网膜中的表达。制备视网膜薄片,行全细胞膜片钳记录。在神经节细胞上给予100μmol/L GABA快速加药诱导出电流IGABA,而后观察孵育大麻素受体激动剂WIN55212-2时GABA诱导的IGABA及同时孵育WIN 55212-2和大麻素受体拮抗剂SR141716A的电流IGABA。结果人和小鼠视网膜CB1受体的分布有所不同,人的内核层、外核层、神经节细胞层有显著的CB1表达,但小鼠CB1受体主要表达在内网状层、外网状层上;膜片钳结果显示不管是在人还是在小鼠的视网膜上,孵育WIN55212-2后的GABA诱导电流幅度均有显著减小。不同的是,在人视网膜神经节细胞上,WIN55212-2明显减慢了GABA电流的反应速度,表现在电流达峰时间明显延长,恢复时间缩短(P<0.05)。WIN55212-2对小鼠视网膜神经节细胞GABA的反应速度无明显差别(P>0.05)。结论CB1受体在人和小鼠视网膜中有差异性分布,对神经节细胞的GABA电流影响也不同。孵育WIN55212-2可抑制人和小鼠神经节细胞GABA电流幅度,但仅对人的神经节细胞的GABA电流的动力学速度有影响。 展开更多
关键词 人视网膜 大麻素受体 神经节细胞 全细胞膜片钳技术
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Ghrelin对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响 被引量:1
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作者 杨波 张道亮 +2 位作者 胡有志 肖金凤 周承志 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2014年第10期832-835,共4页
目的:研究一种具有生长激素释放活性的脑肠肽(Ghrelin)对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响。方法:采用酶解消化法获得大鼠单个心室肌细胞,通过全细胞膜片钳技术研究不同浓度(10 nmol/L、100 nmol/L及1μmol/L)Ghrelin对L型钙电流的影响。... 目的:研究一种具有生长激素释放活性的脑肠肽(Ghrelin)对大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响。方法:采用酶解消化法获得大鼠单个心室肌细胞,通过全细胞膜片钳技术研究不同浓度(10 nmol/L、100 nmol/L及1μmol/L)Ghrelin对L型钙电流的影响。结果:10 nmol/L、100 nmol/L及1μmol/L Ghrelin依次抑制大鼠心室肌细胞L型钙电流峰电位,抑制率分别为:8.95%±2.13%、31.18%±4.78%及64.63%±8.57%,(P<0.05);I-V曲线上移,通道半数失活电压从(-1.34±1.9)mV分别降至(-8.04±1.32)mV、(9.76±1.17)mV及(-11.81±0.73)mV(P<0.05),并延长失活后恢复时间由给药前τ值63.23±9.32,分别增至98.95±10.74、109.56±13.42和127.39±16.13,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Ghrelin通过加快L型钙电流的失活及延长失活后恢复时间,具有浓度依赖性地抑制L型钙电流。 展开更多
关键词 L-型钙电流 全细胞膜片钳技术
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虎纹捕鸟蛛毒素虎纹毒素-Ⅲ对美洲蜚蠊神经细胞电压门控离子通道的影响(英文) 被引量:1
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作者 王瑞兰 梁宋平 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期126-132,共7页
HWTX-III是从中国虎纹捕鸟蛛Ornithoctonus huwena粗毒中分离纯化到的一种昆虫神经多肽。通过应用全细胞膜片钳技术研究了HWTX-III对美洲蜚蠊Periplaneta americana神经细胞电压门控离子通道的影响。发现HWTX-III特异性地抑制美洲蜚蠊... HWTX-III是从中国虎纹捕鸟蛛Ornithoctonus huwena粗毒中分离纯化到的一种昆虫神经多肽。通过应用全细胞膜片钳技术研究了HWTX-III对美洲蜚蠊Periplaneta americana神经细胞电压门控离子通道的影响。发现HWTX-III特异性地抑制美洲蜚蠊背侧不成对中间(dorsal unpaired median,DUM)神经细胞的电压门控钠通道(IC_(50)≈1.106μmol/L),而对电压门控钾通道没有明显的影响。HWTX-III通过一种新型的不同于其他蜘蛛毒素的机制抑制昆虫电压门控钠通道,它不影响通道的激活与失活动力学,也不明显地漂移稳态失活曲线。HWTX-III对昆虫神经细胞电压门控钠通道的特异性与新型作用机制为研究电压门控钠通道分子结构的多样性以及开发新的安全的杀虫剂提供有用的工具。 展开更多
关键词 虎纹捕鸟蛛 虎纹毒素-Ⅲ 美洲蜚蠊 背侧不成对中间神经细胞 钠离子通道 全细胞膜片钳技术
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大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞钙通道亚型研究
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作者 陈智 刘继红 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期188-190,共3页
目的 研究大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞钙离子通道的亚型。方法 利用全细胞膜片钳技术 ,在维持电压 - 70m V的条件下 ,给予细胞 4 0 ms,从 - 6 0 m V到 +6 0 m V的序列除级方波 ,阶跃 10 m V,引导出钙通道电流 (ICa) ,观察不同类型钙通道... 目的 研究大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞钙离子通道的亚型。方法 利用全细胞膜片钳技术 ,在维持电压 - 70m V的条件下 ,给予细胞 4 0 ms,从 - 6 0 m V到 +6 0 m V的序列除级方波 ,阶跃 10 m V,引导出钙通道电流 (ICa) ,观察不同类型钙通道阻滞剂对 ICa的影响。结果 用 10 μmol/ L 硝苯地平 (NIF)、 1μm ol/ Lω- conotoxin GVIA和 10 0 nmol/Lω- agatoxin IVA灌洗细胞 10 m in,对 ICa有明显的抑制作用 ,抑制率分别为 (44 .6± 2 .0 ) %、 (31.3± 2 .0 ) %和 (2 0 .6± 2 .0 ) %。结论 在大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞中 ,L 型钙通道是主要的 ,同时也存在 N型和 P/ 展开更多
关键词 肾上腺髓质嗜铬细胞 钙通道亚型 全细胞膜片钳技术 L型钙通道 N型钙通道 P/Q型钙通道 大鼠
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