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全反式和顺式虾青素对胰腺α-淀粉酶的抑制效果差异及其机制
被引量：
1
1
作者
邹晓君
郑钦生
+5 位作者
赵凯欣
冯裕杰
肖杰
贺丽苹
曹庸
刘晓娟
《食品科学》
北大核心
2025年第15期35-46,共12页
通过光碘-乙醇初提-柱层析相结合方法制备高纯度顺式虾青素,以虾青素与降血糖关键调控α-淀粉酶相互作用为切入点,采用酶活性抑制实验、光谱技术和分子对接技术揭示虾青素异构体抑制猪胰腺α-淀粉酶(porcine pancreaticα-amylase,PPAA...
通过光碘-乙醇初提-柱层析相结合方法制备高纯度顺式虾青素,以虾青素与降血糖关键调控α-淀粉酶相互作用为切入点,采用酶活性抑制实验、光谱技术和分子对接技术揭示虾青素异构体抑制猪胰腺α-淀粉酶(porcine pancreaticα-amylase,PPAA)活性能力的差异及其分子机制。结果表明,本实验成功制备并鉴定高纯度9-顺式(95.07%)和13-顺式(90.87%)虾青素,顺式虾青素比全反式虾青素具有更强的抑制PPAA活性效果(P<0.05)。虾青素异构体与PPAA的相互作用均对Trp残基微环境造成轻微影响,不会明显改变蛋白构象。分子对接结果显示,虾青素异构体的结合位点均位于PPAA的催化口袋,与酶竞争性抑制剂阿卡波糖的结合位点相同,并且与酶催化中心的关键氨基酸残基Asp197、Glu233和Asp300具有相互作用,从而表明全反式和顺式虾青素通过竞争性结合酶催化位点的方式抑制PPAA活性。荧光猝灭结果表明,虾青素异构体与PPAA发生结合时均为静态猝灭。进一步研究发现,虾青素异构体与PPAA的主要相互作用力均为范德华力、氢键和疏水作用力,并且均与Glu233残基形成氢键,但顺式虾青素的氢键键长更短,表明其具有更强的氢键作用力。与此同时,与全反式相比,顺式虾青素具有更高的结合亲和力、更多的相互作用氨基酸残基和更低的热力学参数,表明其与PPAA具有更强的结合能力,使得顺式虾青素比全反式虾青素具有更强的酶活性抑制效果。研究结果有助于揭示虾青素异构体的降血糖活性差异和潜在机制,对于开发降血糖的新型功能性食品和药品具有重要的应用价值。
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关键词
虾
青素
全反式虾青素
顺
式
虾
青素
胰腺α-淀粉酶
抑制机制
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职称材料
高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素的含量
被引量：
6
2
作者
孔凡华
徐佳佳
+5 位作者
郭倩
白沙沙
李东
方从容
邱楠楠
崔亚娟
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期214-220,共7页
该研究建立了高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素含量的分析方法。利用单因素实验,对虾青素油中虾青素的提取试剂、酶解时间进行选择,确定最佳前处理条件为37℃恒温水浴振荡酶解60 min,石油醚提取。色谱条件:YMC^(TM)C_(30)色谱柱(250 ...
该研究建立了高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素含量的分析方法。利用单因素实验,对虾青素油中虾青素的提取试剂、酶解时间进行选择,确定最佳前处理条件为37℃恒温水浴振荡酶解60 min,石油醚提取。色谱条件:YMC^(TM)C_(30)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为甲醇-甲基叔丁基醚梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长472 nm。结果表明,全反式虾青素在0.10~4.00μg/mL范围内与峰面积有良好线性关系,精密度的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.36%,表明精密度高,平均回收率为93.58%,回收率的RSD为2.84%,表明添加回收率高,相对标准偏差小,实验建立方法测得虾青素油中虾青素的含量为92.9%,是碱性皂化测得结果的2.11倍,所建立的方法可以准确定量虾青素油中虾青素的含量。
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关键词
高效液相色谱法
虾
青素
油
虾
青素
全反式虾青素
9-顺-
虾
青素
13-顺-
虾
青素
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职称材料
题名
全反式和顺式虾青素对胰腺α-淀粉酶的抑制效果差异及其机制
被引量：
1
1
作者
邹晓君
郑钦生
赵凯欣
冯裕杰
肖杰
贺丽苹
曹庸
刘晓娟
机构
华南农业大学食品学院
出处
《食品科学》
北大核心
2025年第15期35-46,共12页
基金
国家自然科学基金面上项目(32172195)
广州市重点研发计划项目(SL2022B03J00806)。
文摘
通过光碘-乙醇初提-柱层析相结合方法制备高纯度顺式虾青素,以虾青素与降血糖关键调控α-淀粉酶相互作用为切入点,采用酶活性抑制实验、光谱技术和分子对接技术揭示虾青素异构体抑制猪胰腺α-淀粉酶(porcine pancreaticα-amylase,PPAA)活性能力的差异及其分子机制。结果表明,本实验成功制备并鉴定高纯度9-顺式(95.07%)和13-顺式(90.87%)虾青素,顺式虾青素比全反式虾青素具有更强的抑制PPAA活性效果(P<0.05)。虾青素异构体与PPAA的相互作用均对Trp残基微环境造成轻微影响,不会明显改变蛋白构象。分子对接结果显示,虾青素异构体的结合位点均位于PPAA的催化口袋,与酶竞争性抑制剂阿卡波糖的结合位点相同,并且与酶催化中心的关键氨基酸残基Asp197、Glu233和Asp300具有相互作用,从而表明全反式和顺式虾青素通过竞争性结合酶催化位点的方式抑制PPAA活性。荧光猝灭结果表明,虾青素异构体与PPAA发生结合时均为静态猝灭。进一步研究发现,虾青素异构体与PPAA的主要相互作用力均为范德华力、氢键和疏水作用力,并且均与Glu233残基形成氢键,但顺式虾青素的氢键键长更短,表明其具有更强的氢键作用力。与此同时,与全反式相比,顺式虾青素具有更高的结合亲和力、更多的相互作用氨基酸残基和更低的热力学参数,表明其与PPAA具有更强的结合能力,使得顺式虾青素比全反式虾青素具有更强的酶活性抑制效果。研究结果有助于揭示虾青素异构体的降血糖活性差异和潜在机制,对于开发降血糖的新型功能性食品和药品具有重要的应用价值。
关键词
虾
青素
全反式虾青素
顺
式
虾
青素
胰腺α-淀粉酶
抑制机制
Keywords
astaxanthin
all-E-astaxanthin
Z-astaxanthin
pancreaticα-amylase
inhibition mechanism
分类号
TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素的含量
被引量：
6
2
作者
孔凡华
徐佳佳
郭倩
白沙沙
李东
方从容
邱楠楠
崔亚娟
机构
国家食品安全风险评估中心
北京市营养源研究所
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第6期214-220,共7页
基金
十三五国家重点研发计划(2016YFD0400600)。
文摘
该研究建立了高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素含量的分析方法。利用单因素实验,对虾青素油中虾青素的提取试剂、酶解时间进行选择,确定最佳前处理条件为37℃恒温水浴振荡酶解60 min,石油醚提取。色谱条件:YMC^(TM)C_(30)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为甲醇-甲基叔丁基醚梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长472 nm。结果表明,全反式虾青素在0.10~4.00μg/mL范围内与峰面积有良好线性关系,精密度的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.36%,表明精密度高,平均回收率为93.58%,回收率的RSD为2.84%,表明添加回收率高,相对标准偏差小,实验建立方法测得虾青素油中虾青素的含量为92.9%,是碱性皂化测得结果的2.11倍,所建立的方法可以准确定量虾青素油中虾青素的含量。
关键词
高效液相色谱法
虾
青素
油
虾
青素
全反式虾青素
9-顺-
虾
青素
13-顺-
虾
青素
Keywords
high performance liquid chromatography(HPLC)
astaxanthin oil
astaxanthin
all trans astaxanthin
9-cis-astaxanthin
13-cis-astaxanthin
分类号
O657.72 [理学—分析化学]
TS225.24 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
全反式和顺式虾青素对胰腺α-淀粉酶的抑制效果差异及其机制
邹晓君
郑钦生
赵凯欣
冯裕杰
肖杰
贺丽苹
曹庸
刘晓娟
《食品科学》
北大核心
2025
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
高效液相色谱法测定虾青素油中虾青素的含量
孔凡华
徐佳佳
郭倩
白沙沙
李东
方从容
邱楠楠
崔亚娟
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021
6
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职称材料
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