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抗IL-4全人源单链抗体的筛选和鉴定: 1; 作者曹新梅年四季 +2 位作者叶迎春王栩袁青《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1698-1701,共4页; 目的表达人白细胞介素4(IL-4),从全人源单链抗体(sc Fv)文库中筛选抗IL-4全人源sc Fv并鉴定其特异性。方法采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导p ET102/IL-4/BL21表达IL-4,进行纯化鉴定。利用全人源噬菌体抗体文库表达抗IL-4全人源s... 展开更多; 关键词白细胞介素4(IL-4) 全人源单链抗体筛选鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗TSLP全人源单链抗体的体外亲和力成熟被引量：1: 2; 作者先德群年四季 +2 位作者叶迎春徐文峰袁青《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1301-1305,共5页; 目的:对抗TSLP-scFv全人源单链抗体进行单点突变,以提高其亲和力。方法:本研究前期筛选了特异性好的抗TSLP-scFv,本研究利用Discovery Studio系统模拟TSLP和抗TSLP-scFv三维结构,进行分子对接,对结合表位氨基酸进行随机突变,选取可显著... 展开更多; 关键词抗TSLP-scFv 全人源单链抗体分子对接亲和力; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗金黄色葡萄球菌α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定被引量：1: 3; 作者李春吴桐 +4 位作者秦大莲于红谢翔李雪袁青《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1100-1104,共5页; 目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-HL)单链抗体。方法:IPTG低温诱导α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗α-HL全人源单链抗体(sc Fv)。将筛选并测序鉴定正确的15... 展开更多; 关键词 α-HL 全人源单链抗体噬菌体展示筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定: 4; 作者张登梅年四季 +3 位作者叶迎春杨燕于红袁青《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期65-68,共4页; 目的:筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL-13单链抗体,并进行可溶性表达和鉴定。方法:前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库,本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集,然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL-1... 展开更多; 关键词 IL-13 全人源单链抗体噬菌体展示; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗IL-4全人源单链抗体的筛选和鉴定: 1; 作者曹新梅年四季叶迎春王栩袁青; 机构四川医科大学免疫学教研室四川医科大学医学病原生物学与免疫学实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1698-1701,共4页; 基金四川省青年基金(2012JQ0018) 四川省卫生厅项目(130259) 泸州市科技局项目(2012-177); 文摘目的表达人白细胞介素4(IL-4),从全人源单链抗体(sc Fv)文库中筛选抗IL-4全人源sc Fv并鉴定其特异性。方法采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导p ET102/IL-4/BL21表达IL-4,进行纯化鉴定。利用全人源噬菌体抗体文库表达抗IL-4全人源sc Fv,用表达的IL-4作为抗原,筛选阳性克隆菌株经PCR、酶切及测序鉴定。采用斑点杂交检测抗IL-4sc Fv的特异性。结果表达的IL-4融合蛋白相对分子质量(Mr)为27 000。采用该抗原筛选出了表达抗IL-4的阳性克隆,PCR结果显示,在约1000 bp处有扩增的目的条带。酶切结果显示,有2株克隆的指纹图谱相同,其余均不同。选取指纹图谱不同的且与IL-4结合能力强的4个sc Fv的克隆进行测序,显示有3个的序列正确。斑点杂交显示,这3株克隆表达的sc Fv均具有特异性。结论成功筛选到抗IL-4全人源sc Fv。; 关键词白细胞介素4(IL-4) 全人源单链抗体筛选鉴定; Keywords IL-4 completely humanized sc Fvs selection identification; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R786 [医药卫生—口腔医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗TSLP全人源单链抗体的体外亲和力成熟被引量：1: 2; 作者先德群年四季叶迎春徐文峰袁青; 机构西南医科大学基础医学院西南医科大学药学院药理学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1301-1305,共5页; 基金四川省科技厅项目(2015JY0218 LY-96) +1 种基金四川省教育厅项目(16TD0022 17ZB0487); 文摘目的:对抗TSLP-scFv全人源单链抗体进行单点突变,以提高其亲和力。方法:本研究前期筛选了特异性好的抗TSLP-scFv,本研究利用Discovery Studio系统模拟TSLP和抗TSLP-scFv三维结构,进行分子对接,对结合表位氨基酸进行随机突变,选取可显著提高其亲和力的氨基酸突变点,根据突变位点设计引物,采用重叠延伸PCR对氨基酸位点进行突变。将突变后的scFv基因与表达载体pLZ16连接,转化E.coli DH5αF',表达后筛选亲和力提高的抗TSLP-scFv。结果:DS系统筛选出可以提高scFv亲和力的5个单点突变氨基酸位点,PCR扩增出突变后的抗TSLP-scFv DNA片段大小为1000bp左右。将测序正确的菌株进行表达,通过ELISA筛选出与抗原结合力提升的抗TSLP-scFv;通过生物大分子相互作用技术,测定单抗的亲和力,突变后的scFv M4亲和力较突变前提高了10倍左右。结论:成功提升了抗TSLP-scFv全人源单链抗体的亲和力。; 关键词抗TSLP-scFv 全人源单链抗体分子对接亲和力; Keywords Anti-TSLP-scFv Full human scFv Molecular docking Affinity; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R786 [医药卫生—口腔医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗金黄色葡萄球菌α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定被引量：1: 3; 作者李春吴桐秦大莲于红谢翔李雪袁青; 机构西南医科大学药学院药理学系西南医科大学基础医学院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1100-1104,共5页; 基金四川省科技厅-西南医科大联合项目(14ZC0021) 泸州市-西南医科大学联合项目(2017LZXNYD-T06) 四川省教育厅创新团队项目(16TD0022); 文摘目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌α-溶血素(α-HL)单链抗体。方法:IPTG低温诱导α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗α-HL全人源单链抗体(sc Fv)。将筛选并测序鉴定正确的15株sc Fvs插入p LZ16载体进行表达验证和ELISA鉴定。结果:表达纯化的α-HL融合蛋白为可溶性蛋白,大小约为90 k D。采用表达的α-HL融合蛋白作为抗原,经过4轮噬菌体展示筛选,ELISA结果显示大约有34%的sc Fvs与α-HL具有结合特性。将与α-HL结合良好且序列正确的15株sc Fvs插入p LZ16载体中进行可溶性表达后,经Western blot验证正确; ELISA鉴定结果显示:sc Fvs与购买的α-HL(Sigma,USA)、金黄色葡萄球菌都具有较高的结合活性且对金黄色葡萄球菌特异,与白色葡萄球菌无交叉反应。结论:成功筛选到抗α-HL全人源单链抗体。; 关键词 α-HL 全人源单链抗体噬菌体展示筛选; Keywords α-HL Human scFvs Phage display Selection; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定: 4; 作者张登梅年四季叶迎春杨燕于红袁青; 机构四川医科大学基础医学院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期65-68,共4页; 基金四川省科技厅项目(2015JY0218 013SZZ005) 四川省教育厅项目(13ZB0262); 文摘目的:筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL-13单链抗体,并进行可溶性表达和鉴定。方法:前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库,本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集,然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL-13阳性单链抗体;将特异性好、亲和力相对较高的阳性单链抗体转入表达载体中进行表达并鉴定。结果:经3轮噬菌体展示富集,有30%左右的克隆子为阳性;经过约500株克隆子筛选,筛选到2株特异性和亲和力相对较高,有体外中和特性的单链抗体;将筛选的单链抗体基因转入表达载体LZ16中进行了表达,并采用生物大分子相互作用技术、Western blot等进行了鉴定。结论:成功筛选到特异性好、亲和力相对较高并具有体外中和活性的抗IL-13单链抗体。; 关键词 IL-13 全人源单链抗体噬菌体展示; Keywords IL-13 Human scFv Phage display; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	抗IL-4全人源单链抗体的筛选和鉴定	曹新梅年四季叶迎春王栩袁青	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗TSLP全人源单链抗体的体外亲和力成熟	先德群年四季叶迎春徐文峰袁青	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗金黄色葡萄球菌α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定	李春吴桐秦大莲于红谢翔李雪袁青	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	抗IL-13全人源单链抗体的筛选、可溶性表达及鉴定	张登梅年四季叶迎春杨燕于红袁青	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料