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骨髓间充质干细胞复合海螵蛸支架的部分生物学安全性评估 被引量:6
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作者 彭雅 覃裕 +1 位作者 顾春松 易洪城 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期555-561,共7页
制作与鉴定自体兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,进行生物学安全性评估。采用密度梯度离心联合贴壁筛选法,体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs);采用沉淀法,构建BMSCs-海螵蛸复合支架;通过电镜扫描及MTT试验,对复合支架进行检测。选... 制作与鉴定自体兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架,进行生物学安全性评估。采用密度梯度离心联合贴壁筛选法,体外培养兔骨髓间充质干细胞(BMSCs);采用沉淀法,构建BMSCs-海螵蛸复合支架;通过电镜扫描及MTT试验,对复合支架进行检测。选取40只新西兰兔,分两组分别植入BMSCs-海螵蛸复合支架(试验组)或海螵蛸支架(对照组),通过肌肉植入试验评估复合支架的生物学安全性。密度梯度离心联合贴壁筛选分离培养出干细胞,其免疫细胞化学检测表面抗原CD29(+)。电镜扫描测得海螵蛸支架孔隙率为81.730%±6.770%。扫描电镜下见细胞黏附于海螵蛸支架爬行生长,分泌胞间基质。MTT检测:复合培养第1、3、5、7天之间吸光值两两比较,均有显著性差异(P<0.05),细胞呈逐渐增殖趋势;第7、8天比较无显著差异,表明第8天细胞无明显增殖。肌肉植入试验的血常规、血生化检测,复合支架组(试验组)与海螵蛸组(对照组)检测结果无显著差异,复合支架的各项指标达标。病理切片:第7天,试验组与对照组的组织炎症反应为III^IV级;第14天,二者的组织炎症反应为II^III级;第28天,二者的组织炎症反应为I^II级;第56天,二者的组织炎症反应为0~I级:均符合肌肉植入试验结果评定标准。自体BMSCs能与中药海螵蛸联合培养构建复合支架,支架上的细胞数量随培养时间延长而增多,第7天时达增殖高峰。研究表明,此复合支架的组织相容性良好,符合生物材料的应用要求。 展开更多
关键词 兔骨髓间充质干细胞 海螵蛸 复合支架 生物安全性 骨组织工程
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富血小板血浆对骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化的影响 被引量:1
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作者 杜刚 黄克 +3 位作者 李林 梁红锁 唐俊 李红波 《山西医科大学学报》 CAS 2013年第10期771-775,833,共6页
目的观察富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对兔源骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)定向分化为成骨细胞的作用及机制。方法离心法分离兔骨髓后,体外培养BMSCs,体积分数5%和10%的PRP与BMSCs共培养,观察BMSCs... 目的观察富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对兔源骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)定向分化为成骨细胞的作用及机制。方法离心法分离兔骨髓后,体外培养BMSCs,体积分数5%和10%的PRP与BMSCs共培养,观察BMSCs诱导分化过程中茜素红染色阳性率,应用酶标仪检测碱性磷酸酶(alkaliphosphatase,ALP)活性,应用ELISA法检测BMSCs诱导分化过程中骨钙素(osteocalcin,OCN)及结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的含量,应用real time-PCR检测成骨相关基因CTGF、ALP、成骨细胞核心结合因子α1(core-binding factor alpha 1,Cbf-α1)、兔Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)和OCN的表达。结果 BMSCs诱导分化后细胞茜素红染色阳性率、ALP活性、OCN及CTGF含量升高,CTGF、ALP、Cbf-α1、Col-Ⅰ和OCN的mRNA表达增加。结论 PRP可促进BMSCs向成骨细胞分化,可能与PRP促进BMSCs中CTGF、ALP、Cbf-α1、Col-Ⅰ和OCN表达有关。 展开更多
关键词 富血小板血浆 骨髓充质干细胞 成骨细胞
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