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用花粉管通道转化法将兔防御素基因导入新疆陆地棉试验
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作者 郝秀英 王冬梅 +3 位作者 危晓薇 美丽古力 李仁敬 孟冬丽 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2000年第1期46-47,共2页
介绍了用花粉管通道转化方法对新疆陆地棉新陆早7号和新陆早8号进行基因转化的初步研究结果。
关键词 陆地棉 花粉管通道 兔防御素基因 转化方法 棉花
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设计表达兔防御素基因NP1
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作者 徐文生 许杨 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第3期418-422,共5页
利用计算机软件对在将大肠杆菌中表达的兔防御素NP -1基因进行分析。消除宿主菌不表达或低效表达的密码子。同时对NP -1基因与质粒 pGEX -4T -1中融合基因GST进行RNA二级结构预测 ,通过对RNA二级结构进行分析 ,消除可能影响基因表达的... 利用计算机软件对在将大肠杆菌中表达的兔防御素NP -1基因进行分析。消除宿主菌不表达或低效表达的密码子。同时对NP -1基因与质粒 pGEX -4T -1中融合基因GST进行RNA二级结构预测 ,通过对RNA二级结构进行分析 ,消除可能影响基因表达的二级结构 ,设计了有利于今后对目的基因的表达的兔防御素基因 ,并在大肠杆菌高效表达。结果表明 :合成基因可以在大肠杆菌中高效表达。 展开更多
关键词 兔防御素基因NPl 融合基因 质粒 pGEx表达
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兔防御素基因在毕赤酵母中的串连表达及抑菌机理研究 被引量:1
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作者 李霞 刘霭珊 +1 位作者 徐来祥 赵亚华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期57-62,共6页
根据毕赤酵母Pichia pastoris密码子偏爱性重编兔防御素基因(Neutrophils peptide-1,pNP-1),设计4条引物搭桥合成.将pNP-1克隆到pPICZα-A载体,使用同尾酶XhoⅠ和SalⅠ在重组载体上构建多价串联体[pNP-1(2×)]和[pNP-1(3×)],... 根据毕赤酵母Pichia pastoris密码子偏爱性重编兔防御素基因(Neutrophils peptide-1,pNP-1),设计4条引物搭桥合成.将pNP-1克隆到pPICZα-A载体,使用同尾酶XhoⅠ和SalⅠ在重组载体上构建多价串联体[pNP-1(2×)]和[pNP-1(3×)],分别对这3个基因进行毕赤酵母表达,表达量依次为3.39、6.39和13.05μg/mL.重组蛋白经溴化氢切割后,对得到的活性产物进行抑菌试验,结果表明,重组pNP-1蛋白对苏云金杆菌Bacillus thuringiensis等革兰阳性菌(G+)及大肠埃希菌Escherichia coli等革兰阴性菌(G-)均有抑菌活性,但对白色念珠菌Candida albicans等真菌没有明显的抑菌活性.对pNP-1抑菌机理研究发现,细胞壁和DNA合成抑制剂对pNP-1抑菌活性有协同作用,而多种蛋白质和RNA合成抑制剂对pNP-1抑菌活性有抑制作用. 展开更多
关键词 兔防御素基因 毕赤酵母 串联表达 抑菌机理
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转兔防御素基因小球藻生物反应器异养培养工艺研究
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作者 韩兴梅 李元广 +4 位作者 李兴武 万俊芬 魏晓东 孙勇如 王义琴 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期73-77,共5页
根据5L生物反应器中转兔防御素(NP-1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、Ph和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP-1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中.转NP-1基因小球藻在15L反应器... 根据5L生物反应器中转兔防御素(NP-1)基因小球藻培养过程特征,建立了基于在补糖、补KNO3、Ph和溶氧(DO)控制的5L生物反应器中进行转NP-1基因小球藻异养培养的工艺,同时将此培养工艺放大到15L生物反应器中.转NP-1基因小球藻在15L反应器中培养133h的细胞密度可达34.2g/L,平均生长速率为0.257g/(L·h),比5L生物反应器中培养131h的细胞密度27.8g/L和平均生长速率0.21g/(L·h)分别提高了23%和22%.研究结果证实了转NP-1基因小球藻放大培养的可行性,为实现高密度、高表达的大规模培养奠定了基础. 展开更多
关键词 生物反应器 异养培养 小球藻 兔防御素基因 工艺研究 NP-1 细胞密度 生长速率 大规模培养 过程特征 KNO3 工艺放大 放大培养 研究结果 高密度 高表达 平均
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兔防御素NP-1基因在小麦抗病育种中应用的初步研究 被引量:7
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作者 周春江 黄占景 +2 位作者 沈银柱 赵世民 何聪芬 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2003年第2期7-10,共4页
兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为了得到转NP-1基因的小麦植株,采用电激法、基因枪法和花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入普通小麦品种G9501和G8901中,经过抗生素和除草剂初步筛选得到8株G9501和4株G8901的转化植株。田间抗... 兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为了得到转NP-1基因的小麦植株,采用电激法、基因枪法和花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入普通小麦品种G9501和G8901中,经过抗生素和除草剂初步筛选得到8株G9501和4株G8901的转化植株。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病的抗性有较大的提高,但对于蚜虫的抗性没有提高,初步认为兔防御素NP-1基因已经导入小麦,并已经在小麦中得到了表达。转基因植株的进一步检测工作正在进行中。 展开更多
关键词 防御NP-l基因 小麦 抗病育种 基因 基因枪法
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利用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入小麦的研究 被引量:13
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作者 周春江 葛荣朝 +3 位作者 赵宝存 黄占景 沈银柱 何聪芬 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期26-28,共3页
兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂... 兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂交,证实了NP-1基因已经整合到转基因植株的基因组中,并稳定遗传到T1。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病有较强的免疫力和抗性,但对于蚜虫的抗性没有明显提高。 展开更多
关键词 小麦 防御NP-1基因 转化 花粉管通道
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用基因枪法转化新疆陆地棉新陆早4号 被引量:8
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作者 郝秀英 李仁敬 《新疆农业科学》 CAS CSCD 1999年第6期255-256,共2页
报道了用基因枪轰击转化方法将兔防御素基因NP- 1导入新疆陆地棉栽培品种新陆早4号的转化培养过程,在诱导继代分化过程中对不同培养基进行了比较,发现对于该品种经A1→A3→K3 →K10培养过程得到了转化芽的形成。
关键词 新陆早4号 基因 兔防御素基因 NP-1 转化 棉花
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