兔病毒性出血症病毒基因组3′端非编码区的分子克隆及生物信息学分析 被引量：12

1

作者 刘光清 张玉颖 +7 位作者 云涛 倪征 张淼涛 梁华丽 华炯刚 李双茂 杜青云 盛祖恬 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第3期16-20,25,共6页

采用3′RACE方法对兔病毒性出血症病毒(RHDV)JX／CHA／97株基因组3′端全序列进行了扩增、克隆和测序,并利用ONAstar和DNAman软件分析了RHDV JX／CHA／97株与各参比毒株3′NCR的序列同源性,用RNA structure软件对3′NCR的二级结构进行... 采用3′RACE方法对兔病毒性出血症病毒(RHDV)JX／CHA／97株基因组3′端全序列进行了扩增、克隆和测序,并利用ONAstar和DNAman软件分析了RHDV JX／CHA／97株与各参比毒株3′NCR的序列同源性,用RNA structure软件对3′NCR的二级结构进行了预测和分析。结果表明,所扩增的目的基因片段长1500 bp,包括部分VP60基因序列、ORF2基因、3′端非编码区(3′Non Coding Region,3′NCR)和poly(A)尾巴,其中 3′NCR位于ORF2终止密码子TAG之后,长59 bp,poly(A)至少含有27个A;3′NCR序列具有较高的同源性 (93．5％-100％);3′NCR二级结构可以形成2个潜在的茎-环结构(SL1和SL2),其中SL2具有一定的保守性,其形状和形成位置与poly(A)尾巴的长度关系不大,但是SL1的结构和形成位置与poly(A)尾巴的存在与否密切相关,提示poly(A)尾巴与3′NCR高级结构的稳定性以及基因组复制有一定关系。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 3’端非编码区 POLY(A) 二级结构 生物信息学

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒中国株(JX/CHA/97)全基因组分子克隆及序列分析 被引量：1

2

作者 倪征 方维焕 +3 位作者 张玉颖 云涛 陈锦清 刘光清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期668-671,675,共5页

本研究首次完成了兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)中国分离株JX/CHA/97全基因组序列的测定与分析。研究结果表明,JX/CHA/97株的全基因组由7437个核苷酸组成,其基因组构成为：5′端有一个长度仅为9nt的非编码... 本研究首次完成了兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)中国分离株JX/CHA/97全基因组序列的测定与分析。研究结果表明,JX/CHA/97株的全基因组由7437个核苷酸组成,其基因组构成为：5′端有一个长度仅为9nt的非编码区,随后有2个阅读框架(ORFs),分别编码一个聚合蛋白和一个结构蛋白。在基因组的3′端也有一个非编码区,长度为59nt。另外,采用RACE方法获得了RHDV的poly (A)尾序,证明该结构至少含有27个A。根据RHDV衣壳蛋白的基因序列,将JX/CHA/97株与来自世界各地的22株RHDV分离株的基因组序列进行了比较与分析,并绘制了系统发生树。结果表明,RHDV各分离株之间存在较高的序列同源性,可以将它们至少分为6个拓朴群,提示RHDV有朝不同方向发生进化的趋势。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 JX/CHA/97株 克隆 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒高免血清的制备与应用效果

3

作者 张冰 张丹 李军 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期89-90,共2页

以兔病毒性出血症病毒组织灭活疫苗免疫家兔 ,经五次免疫之后 ,抗体效价可达1 2 log2以上 ,采集兔血清 ,以此治疗攻毒兔 ,结果大部分兔都存活 ;临床应用效果表明 :以此血清治疗自然感染兔病毒性出血症病毒的发病兔 ,治愈率达 80 %以上。

关键词 兔病毒性出血症病毒 高免血清 制备 应用效果

在线阅读 下载PDF 职称材料

SYBR Green II荧光定量PCR结合熔解曲线鉴别不同亚型兔病毒性出血症病毒方法的建立 被引量：3

4

作者 谭永贵 刘腾 +7 位作者 朱杰 郭慧敏 吴巧梅 李琦 缪秋红 陈宗艳 李传峰 刘光清 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第1期7-11,共5页

本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣... 本研究建立了一种荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR)结合熔解曲线区分不同亚型兔病毒性出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)方法。根据GenBank数据库中已公布的不同亚型RHDV(经典RHDV和RHDV2)的衣壳蛋白VP60序列保守区设计了1对特异性引物,利用SYBR Green II荧光染料,在实时荧光定量PCR方法的基础上结合熔解曲线进行分析,经典RHDV和RHDV2熔解温度(Tm)分别为(86.3±0.1)℃和(85.1±0.1)℃,扩增产物的熔解曲线分析均只出现单特异峰。结果表明,本研究建立的方法能够快速地鉴别经典RHDV和RHDV2。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 荧光定量PCR 熔解曲线 鉴别

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒重组蛋白VP60间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 被引量：4

5

作者 李云琴 赵美盈 刁富花 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期69-72,共4页

为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒抗体检测方法,本研究以原核表达的重组VP60蛋白作为诊断抗原,建立了检测兔病毒性出血症病毒抗体的VP60-ELISA诊断方法。该方法检测3种常见兔病(兔轮状病毒、仙台病毒和魏氏梭菌)的阳性血清均为阴性;... 为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒抗体检测方法,本研究以原核表达的重组VP60蛋白作为诊断抗原,建立了检测兔病毒性出血症病毒抗体的VP60-ELISA诊断方法。该方法检测3种常见兔病(兔轮状病毒、仙台病毒和魏氏梭菌)的阳性血清均为阴性;检测灵敏度为1∶12800;批内、批间重复性试验的变异系数分别小于4.9%和6.9%。本研究建立的RHDV VP60-ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,为RHDV的抗体检测及流行病学调查等快速诊断提供了一种技术手段。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 VP60蛋白 间接ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：3

6

作者 王景儒 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期86-89,共4页

为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据Gen-Bank上登录的RHDVVP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒... 为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据Gen-Bank上登录的RHDVVP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒、仙台病毒、健康兔肝脏组织的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10ng,第2次扩增的敏感性是0.1ng,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的RHDV,将为兔病毒性出血症的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、简单、高效、特异、灵敏的检测方法。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 巢式RT-PCR 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于便携式荧光定量PCR仪的兔病毒性出血症病毒现场检测方法的建立及应用 被引量：2

7

作者 李天芝 于新友 《饲料博览》 2019年第12期1-4,共4页

为建立兔病毒性出血症病毒免疫荧光PCR检测方法,参照GenBank中兔病毒性出血症病毒基因组序列,设计特异引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了能检测兔病毒性出血症病毒的荧光PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表... 为建立兔病毒性出血症病毒免疫荧光PCR检测方法,参照GenBank中兔病毒性出血症病毒基因组序列,设计特异引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了能检测兔病毒性出血症病毒的荧光PCR方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测兔病毒性出血症病毒灵敏度可达1.38LD50·100μL-1,该法对兔巴氏杆菌、兔大肠杆菌、兔沙门氏菌、兔水疱性口炎病毒(RVSTV)和兔轮状病毒(RRV)的检测结果均为阴性。试验建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法可对兔病毒性出血症进行现场快速鉴别诊断,为兔病毒性出血症的诊断及防控工作奠定了基础。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 TagMan 荧光PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒YT株的分离及生物学特性鉴定 被引量：1

8

作者 王晓丽 程志伟 +2 位作者 王永明 朱万光 李世成 《上海畜牧兽医通讯》 2011年第4期48-49,共2页

兔病毒性出血症又称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起家兔的一种急性、高度接触性传染病,以呼吸系统出血、肝脏坏死、实质脏器水肿、瘀血、出血和高死亡率为特征。本病于1984年春天首次发现于我国江苏省,迅速蔓延至全国,之后世界各地均... 兔病毒性出血症又称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起家兔的一种急性、高度接触性传染病,以呼吸系统出血、肝脏坏死、实质脏器水肿、瘀血、出血和高死亡率为特征。本病于1984年春天首次发现于我国江苏省,迅速蔓延至全国,之后世界各地均有发生。本病常呈暴发性流行，发病率及死亡率极高，给世界养兔业带来了巨大危害，是目前规模化兔场的主要传染病之一。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 特性鉴定 生物学 接触性传染病 分离 规模化兔场 呼吸系统 死亡率

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒分离鉴定

9

作者 金明兰 《养殖技术顾问》 2010年第3期173-173,共1页

兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒（RHDV）引起的急性、败血性、高度接触性传染病。感染病兔多在48-72小时内死亡，给养兔业造成的威胁日益突出。因此，及时准确地对RHDV进行诊断已经成为防治该病的关键。

关键词 兔病毒性出血症病毒 病毒分离鉴定 接触性传染病 RHDV 败血性 养兔业 死亡 病兔

在线阅读 下载PDF 职称材料

一例兔病毒性出血症病毒感染的诊治

10

作者 郭明臻 苏启涛 《中国动物保健》 2019年第12期17-18,共2页

兔病毒性出血症是兔易感的病毒性传染病,呈暴发性流行,发病率和死亡率都很高,对养兔业危害巨大,家兔感染后全身组织器官出血,肝坏死,实质器官水肿、淤血、出血,是一种严重的急性、烈性、致死性传染病。本文通过对临床一例疑似兔病毒性... 兔病毒性出血症是兔易感的病毒性传染病,呈暴发性流行,发病率和死亡率都很高,对养兔业危害巨大,家兔感染后全身组织器官出血,肝坏死,实质器官水肿、淤血、出血,是一种严重的急性、烈性、致死性传染病。本文通过对临床一例疑似兔病毒性出血症病毒感染病例的诊治,为相关疾病的诊断提供参考。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 感染 预防 诊治

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒的分离和鉴定

11

作者 陈雅冰 《福建畜牧兽医》 2023年第4期15-17,共3页

本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红... 本试验对山东某兔场疑似感染兔瘟致死的病料进行中和试验、血凝和血凝抑制试验、PCR鉴定及测序比对。试验结果表明,4份分离的病毒上清液都能与1%人O型红细胞发生凝集,凝集效价均为1:1024;与兔病毒性出血症阳性血清中和反应后,对人O型红细胞没有凝集反应;PCR扩增结果显示4份送检样品均在286 bp位置出现了目的条带,经测序比对,该序列与中国的03/China/2016毒株VP60基因(登入号为MF669712.1)序列同源性最高,相似度为99.65%。试验结果充分说明该病毒为兔病毒性出血症病毒,该兔场流行疫病为兔瘟。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 分离鉴定 PCR扩增 测序

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症病毒分离和鉴定

12

作者 张颖 王金良 《中国畜禽种业》 2016年第10期130-131,共2页

从疑似感染兔病毒性出血症病毒的病兔体内分离到1株病毒,病兔表现体温升高、呼吸困难、全身实质脏器出血等典型病变。取病兔肝脏做血凝和血凝抑制试验,分离毒株可以凝集1.0%人"O"型红细胞,可以被兔病毒性出血症病毒阳性血清中... 从疑似感染兔病毒性出血症病毒的病兔体内分离到1株病毒,病兔表现体温升高、呼吸困难、全身实质脏器出血等典型病变。取病兔肝脏做血凝和血凝抑制试验,分离毒株可以凝集1.0%人"O"型红细胞,可以被兔病毒性出血症病毒阳性血清中和,对家兔的LD50为10-6.75/ml,是一株对家兔具有高致病力的强毒株,对分离毒株进行RT-PCR检测为阳性,说明该病兔感染了兔病毒性出血症病毒,本病毒的成功分离和鉴定为发病兔场找到了致病原,为兔瘟疾病的诊断和防制提供了参考。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 分离 鉴定

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症的诊治 被引量：2

13

作者 李峰 杨慧 +1 位作者 苗立中 沈志强 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第11期43-44,共2页

兔病毒性出血症（Rabbit hemorrhagic disease，RHD）又称兔瘟．是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性、烈性传染病，易感兔发病率、死亡率高达40％-90％。该病自1984年首次在我国江苏省发现以来，国内外均有相关的报道．该病的发生和... 兔病毒性出血症（Rabbit hemorrhagic disease，RHD）又称兔瘟．是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性、烈性传染病，易感兔发病率、死亡率高达40％-90％。该病自1984年首次在我国江苏省发现以来，国内外均有相关的报道．该病的发生和蔓延给世界养兔业造成了巨大的损失。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 诊治 烈性传染病 发病率 死亡率 江苏省 养兔业 国内外

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症研究概况及前景 被引量：3

14

作者 朱海霞 张强 《中国动物检疫》 CAS 2009年第1期59-62,共4页

兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,病死率高达100%。本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、体外培养、分子生物学、病毒的检测和疫苗等方面做了系统深入... 兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,病死率高达100%。本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、体外培养、分子生物学、病毒的检测和疫苗等方面做了系统深入综述,并提出了存在的问题及展望。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症 兔病毒性出血症病毒 研究概况

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症诊断方法研究概况 被引量：2

15

作者 李阳友 《畜牧兽医科技信息》 2012年第6期6-8,共3页

兔病毒性出血症(RHD)是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,致死率可达100%。本文对兔病毒性出血症的病原学、流行特点、检测方法等进行了综述,以期为其诊断和防治提供参考。

关键词 兔病毒性出血症 兔病毒性出血症病毒 研究概况

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症的防治

16

作者 张英辉 冉桂霞 +3 位作者 李东方 左辉 李红军 初春玲 《中国畜禽种业》 2013年第7期110-110,共1页

兔病毒性出血症俗称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起的兔的一种急性、高度接触性传染病。以呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征。本病常呈爆发性流行,发病率和病死率极高,

关键词 兔病毒性出血症病毒 防治 接触性传染病 呼吸系统 肝坏死 出血性 爆发性 病死率

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症抗血清的制备及效价测定

17

作者 杨加琼 《四川畜牧兽医》 2009年第9期32-33,共2页

本试验采用兔病毒性出血症灭活疫苗、兔病毒性出血症灭活疫苗和兔病毒性出血症病毒强毒两种不同的免疫程序来免疫家兔,采用血凝及血凝抑制试验检测血清的抗体效价。结果表明:经3次免疫后,疫苗免疫程序组免疫家兔的抗血清平均效价为9log2... 本试验采用兔病毒性出血症灭活疫苗、兔病毒性出血症灭活疫苗和兔病毒性出血症病毒强毒两种不同的免疫程序来免疫家兔,采用血凝及血凝抑制试验检测血清的抗体效价。结果表明:经3次免疫后,疫苗免疫程序组免疫家兔的抗血清平均效价为9log2,未免疫家兔的抗体平均效价为2log2。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 抗血清 效价 测定

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔病毒性出血症(兔瘟)防治技术 被引量：1

18

作者 程振华 《中兽医学杂志》 2017年第4期102-102,共1页

兔病毒性出血症俗称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起的一种急性、高度接触性传染病,以呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、瘀血及出血性变化为特征。

关键词 兔病毒性出血症病毒 防治技术 兔瘟 接触性传染病 呼吸系统 肝坏死 出血性 俗称

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔出血症病毒遗传变异分析及RT—PCR检测方法的建立 被引量：10

19

作者 刘月环 楼琦 +2 位作者 金晓音 郭红刚 石巧娟 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第11期44-49,共6页

目的获得兔出血症病毒（浙江分离株）近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989～2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因（VP60）进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析... 目的获得兔出血症病毒（浙江分离株）近20年间遗传变异概况,建立兔出血症病毒的RT—PCR检测方法。方法对1989～2006年间的7株RHDV浙江分离株的衣壳蛋白基因（VP60）进行了克隆与测序,并与国内、外RHDV的基因组序列进行了遗传比对和分析;根据兔出血症病毒株的VP60设计引物,对20只人工感染兔的实质脏器、全血和350只实验兔全血样本进行了检测。结果7株RHDV的VP60基因均由1740个核苷酸组成,编码580个氨基酸。它们与参考序列之间的氨基酸同源性为94.0%～99.8%。系统发生树分析结果显示,RHDV可划分为2个大的基因群,浙江（中国）的RHDV分离株主要集中于C亚群。RT—PCR检测方法表明20只实验兔全部扩出预期条带,而350只实验兔全血检测中出现13只RHDV可疑样本。经血凝抑制试验检测,13例PCR阳性样品中有10个HAI阳性,3个阴性。检测敏感度达100%,特异性为99.12%,经统计检验,kappa=0.865,表明PCR检出RHDV的结果与HAI高度一致。结论RHDV基因群之间的遗传距离有逐渐加大的趋势。我们建立的RT—PCR法可用于RHDV浙江分离株的检测,用RT—PCR检测全血中RHDV方法的建立为活体检测RHDV打下了基础。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒 衣壳蛋白基因 遗传变异 RT—PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

兔出血症病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：4

20

作者 王波 李桂黎 +2 位作者 王印 姚学萍 杨泽晓 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期400-405,共6页

兔病毒性出血症(rabbit hemorrhagic disease,RHD)是一种具有高度传染性的疾病,严重威胁养兔业的健康发展。为了建立一种能够快速、高效、敏感的检测RHDV的方法,试验设计了一对特异性引物进行PCR扩增,得到RHDV VP60基因中979 bp的保守序... 兔病毒性出血症(rabbit hemorrhagic disease,RHD)是一种具有高度传染性的疾病,严重威胁养兔业的健康发展。为了建立一种能够快速、高效、敏感的检测RHDV的方法,试验设计了一对特异性引物进行PCR扩增,得到RHDV VP60基因中979 bp的保守序列,并将其克隆到p MD19-T载体中作为标准品建立标准曲线;在扩增区域内设计一对简并引物,建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,优化反应条件,并验证该方法的敏感性、特异性、重复性。结果表明:该方法可检测到的模板的最低拷贝数为8.18×101copies,只能特异性扩增RHDV,pGM19-T-EBHSV、兔巴氏杆菌、兔沙门氏菌、兔大肠埃希菌和健康兔组织RNA的扩增均为阴性,具有良好的特异性和重复性;同时用此方法对人工感染家兔的内脏分别进行检测,结果表明SYBR GreenⅠ荧光定量PCR能快速检测到不同脏器中的兔病毒性出血症病毒RNA含量,可用于临床兔瘟病毒的检测。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症病毒(RHD) VP60 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料