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高亲和力鸡高亲和力鸡γ-干扰素兔源单克隆干扰素兔源单克隆配对抗体的制备及鉴定
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作者 陈天祥 张庆如 +1 位作者 张念之 孙怡朋 《中国家禽》 2025年第10期60-68,共9页
为提升对禽类细胞免疫反应的检测水平,研究制备高亲和力鸡γ-干扰素(chIFN-γ)兔源单克隆配对抗体。研究利用原核表达的chIFN-γ重组蛋白免疫兔,结合流式单B细胞分选技术筛选获得单克隆抗体,采用生物膜干涉技术和竞争结合试验对抗体的... 为提升对禽类细胞免疫反应的检测水平,研究制备高亲和力鸡γ-干扰素(chIFN-γ)兔源单克隆配对抗体。研究利用原核表达的chIFN-γ重组蛋白免疫兔,结合流式单B细胞分选技术筛选获得单克隆抗体,采用生物膜干涉技术和竞争结合试验对抗体的亲和力及配对性能进行系统评估。结果显示:共获得3株单克隆抗体(38-9、56-3和68-7),解离常数(KD)值均达10^(-12)mol/L,显示出极高的亲和力;56-3与38-9和68-7之间无竞争关系,而38-9与68-7之间存在明显竞争,由此可构建56-3/38-9和56-3/68-7两对稳定的配对抗体。研究表明,试验获得的3株单克隆抗体具备高亲和力和良好的配对特性,适用于chIFN-γ的高灵敏免疫检测,为禽类细胞免疫应答监测及chIFN-γ免疫功能研究提供了关键工具。 展开更多
关键词 鸡γ-干扰素 兔源单克隆抗体 流式细胞分选技术 生物膜干涉技术 配对抗体
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