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猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
胡继明
杨培培
+7 位作者
王颖
孙海芳
黄娟
陈俏俏
杨瑞梅
张传美
秦晓冰
单虎
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期943-949,共7页
本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆...
本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果RT-PCR扩增片段为825bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaⅠ酶切为322bp和503bp 2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出RNA的最低浓度为0.028 6μg.mL-1;8株流行野毒株都含GGGCCC序列(ApaⅠ酶切位点),2株疫苗株相应序列为GAGCCC,不能被ApaⅠ酶切;8株流行野毒株属于基因2群,2株疫苗株与HCLV遗传关系近,为基因1群。建立了可鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP检测方法,为猪瘟的防控提供有效手段。
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关键词
猪瘟病
毒
野
毒
株
兔化弱毒疫苗株
RT-PCR-RFLP
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职称材料
题名
猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立
被引量:
2
1
作者
胡继明
杨培培
王颖
孙海芳
黄娟
陈俏俏
杨瑞梅
张传美
秦晓冰
单虎
机构
青岛农业大学山东省预防兽医学重点实验室
莱阳市畜牧局
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期943-949,共7页
基金
国家科技支撑计划(2011BAD34B00)
科技基础性工作专项(SQ2012FY3260033)
+1 种基金
山东省生猪产业创新团队建设
青岛市公共领域科技支撑计划(11-2-3-24-nsh)
文摘
本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果RT-PCR扩增片段为825bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaⅠ酶切为322bp和503bp 2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出RNA的最低浓度为0.028 6μg.mL-1;8株流行野毒株都含GGGCCC序列(ApaⅠ酶切位点),2株疫苗株相应序列为GAGCCC,不能被ApaⅠ酶切;8株流行野毒株属于基因2群,2株疫苗株与HCLV遗传关系近,为基因1群。建立了可鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP检测方法,为猪瘟的防控提供有效手段。
关键词
猪瘟病
毒
野
毒
株
兔化弱毒疫苗株
RT-PCR-RFLP
Keywords
classical swine fever virus
wild-type
vaccine viruses
RT-PCR-RFLP
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立
胡继明
杨培培
王颖
孙海芳
黄娟
陈俏俏
杨瑞梅
张传美
秦晓冰
单虎
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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