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四川省兔出血症病毒2型流行病学调查及遗传变异分析被引量：5: 1; 作者李丽陈弟诗 +5 位作者陈斌张毅邓飞邵靓周莉媛任永军《中国动物检疫》 CAS 2022年第5期42-48,共7页; 为了解四川省兔出血症病毒2型(rabbit hemorrhagic disease virus type 2,RHDV2)的流行情况及分子遗传变异特征,采集全省范围内的7525份样品,其中发病兔场肝脏组织样品117份、环境拭子样品243份,受监测兔场血液样品3340份、环境拭子样品... 展开更多; 关键词兔出血症病毒2型(RHDV2) 流行病学调查遗传变异分析四川省; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国首例兔出血症病毒2型(RHDV2/b/GI.2)的鉴定及病理学观察被引量：13: 2; 作者肖璐于吉锋 +11 位作者林毅周泷郭志强谢晶岳建国叶勇刚曹冶李兴玉潘梦叶健强李敏康润敏《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期348-355,共8页; 本试验旨在鉴定四川金堂某兔场疑似兔出血症病毒2型(RHDV2)感染疫情的病原,并分析病兔的病理组织学变化。利用血凝试验和RT-PCR检测病死兔内脏组织中的病原,取病变组织制作病理切片,观察分析各组织的病理组织学变化,同时应用病兔肝脏悬... 展开更多; 关键词兔瘟兔出血症病毒2型(RHDV2/b/GI.2) 病理组织学致病力; 在线阅读下载PDF 职称材料

Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型VP60蛋白重组腺病毒的构建及鉴定被引量：3: 3; 作者肖璐于吉锋 +11 位作者罗燕谢晶叶勇刚吴学婧毛从剑李兴玉曹冶林毅潘梦叶健强魏勇康润敏《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3336-3344,共9页; 【目的】试验旨在以复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体,构建Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型(RHDV2)VP60蛋白的重组腺病毒,为RHDV2新型疫苗研究提供依据。【方法】修饰、合成带有Kozak序列的VP 60基因序列,将其与腺病毒穿梭质粒进... 展开更多; 关键词兔瘟兔出血症病毒2型(RHDV2) 重组腺病毒 HEK293细胞 KOZAK序列; 在线阅读下载PDF 职称材料

1例兔出血症病毒2型感染疫情的诊断被引量：4: 4; 作者常赵阳刘玉梅 +3 位作者刘潍萁王佳宁位兰张自强《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1886-1894,共9页; 旨在了解河南疑似兔出血症病毒2型(RHDV2)的感染情况,并对RHDV2的致病性进行初步分析。本研究采集病死兔的肝组织,利用微量血凝试验、RT-PCR扩增及测序、VP60基因系统进化树分析和动物回归试验进行病原鉴定。微量血凝试验结果显示,组织... 展开更多; 关键词兔出血症病毒1型兔出血症病毒2型 VP60基因 RT-PCR 致病力; 在线阅读下载PDF 职称材料

兔出血症2型研究进展被引量：5: 5; 作者董浩张乐颖 +4 位作者左琴董青花朱婉月刘佐民梁春南《动物医学进展》北大核心 2023年第9期97-101,共5页; 兔出血症2型是由兔出血症病毒2型引起的危害家兔和野兔的一种新型高度传染性、急性致死性疫病,该病2010年在法国首次被发现。2020年4月该病传入我国四川省后,迅速传播至我国多个省份,对我国养兔业的健康发展造成了严重危害。目前,国内... 展开更多; 关键词兔兔出血症病毒2型流行病学诊断方法防控措施; 在线阅读下载PDF 职称材料

密码子优化的RHDV2双VP60基因重组杆状病毒构建及表达蛋白免疫原性分析被引量：1: 6; 作者于吉锋谢晶 +8 位作者黄勇肖璐林毅曹冶叶勇刚魏勇吴学婧李江凌康润敏《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期668-677,共10页; [目的]试验旨在优化兔出血症病毒2型(Rabbit hemorrhagic disease virus 2,RHDV2)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)疫苗的制备策略,探究RHDV2 VLP疫苗对家兔的免疫原性,为低成本、高产量RHDV2新型疫苗研发提供新思路。[方法]根据... 展开更多; 关键词兔出血症病毒2型(RHDV2) 病毒样颗粒(VLP) 密码子偏好性重组杆状病毒免疫原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名四川省兔出血症病毒2型流行病学调查及遗传变异分析被引量：5: 1; 作者李丽陈弟诗陈斌张毅邓飞邵靓周莉媛任永军; 机构四川省动物疫病预防控制中心四川省畜牧科学研究院; 出处《中国动物检疫》 CAS 2022年第5期42-48,共7页; 文摘为了解四川省兔出血症病毒2型(rabbit hemorrhagic disease virus type 2,RHDV2)的流行情况及分子遗传变异特征,采集全省范围内的7525份样品,其中发病兔场肝脏组织样品117份、环境拭子样品243份,受监测兔场血液样品3340份、环境拭子样品3825份,采用商品化荧光RT-PCR试剂盒,对以上样品进行RHDV2检测;对筛选出的12份肝组织阳性样品进行RHDV2 VP60基因RT-PCR扩增、测序和遗传进化分析。结果显示:RHDV2流行无明显季节性,各养殖品系家兔均有RHDV2感染,哺乳仔兔、幼兔、怀孕哺乳母兔死亡率分别为25%~60%、18%~45%、9%~30%。发病兔场肝脏样品RHDV2阳性检出率为88.89%(104/117),环境样品为46.09%(112/243);受监测兔场全血样品RHDV2阳性检出率为25.99%(868/3340),环境样品为16.29%(623/3825)。12份阳性样品的RHDV2 VP60基因序列长度均为1740 bp,核苷酸序列同源性为98.4%~100%,在系统发生进化树上独成一簇;与国内外参照毒株的VP60基因序列核苷酸同源性为93.7%~100%,编码的氨基酸序列同源性为95.7%~99.8%。结果表明:RHDV2已开始在四川省流行,需要加强检疫,重视饲养管理工作;其VP60基因序列出现了一定程度的变异,但遗传演化相对稳定。本研究补充了国内RHDV2的分子流行病学信息,也为该病的相关防控研究和控制对策制定提供了参考。; 关键词兔出血症病毒2型(RHDV2) 流行病学调查遗传变异分析四川省; Keywords RHDV2 epidemiological investigation genetic variation analysis Sichuan Province; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国首例兔出血症病毒2型(RHDV2/b/GI.2)的鉴定及病理学观察被引量：13: 2; 作者肖璐于吉锋林毅周泷郭志强谢晶岳建国叶勇刚曹冶李兴玉潘梦叶健强李敏康润敏; 机构四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室西南民主大学生命科学与技术学院成都市动物疫病预防控制中心; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期348-355,共8页; 基金四川省财政运行专项(SASA2020CZYX006) 四川省应用基础项目(2019YJ0562)。; 文摘本试验旨在鉴定四川金堂某兔场疑似兔出血症病毒2型(RHDV2)感染疫情的病原,并分析病兔的病理组织学变化。利用血凝试验和RT-PCR检测病死兔内脏组织中的病原,取病变组织制作病理切片,观察分析各组织的病理组织学变化,同时应用病兔肝脏悬液感染幼兔,分析该毒株的致病力。血凝试验结果显示,所采集病死兔肝脏样品能凝集人“O”型血红细胞;RT-PCR扩增及测序结果显示,多对引物均能从样品中扩增出RHDV2特异性条带;病理组织学观察结果显示,病兔多脏器严重出血、肿胀,淋巴细胞和中性粒细胞大量浸润,气管黏膜、肝脏、肺脏出血尤为严重;动物试验结果显示,该毒株毒力较强,含毒肝脏悬液能在24 h内迅速致死幼兔。本研究经临床诊断、核酸检测及测序证实了此次疫情确由RHDV2感染引起,动物试验和病理组织学观察表明该毒株毒力较强,可引发脏器严重出血,造成病兔急性死亡,RHDV2的出现提示病毒的跨境传播情况不容乐观,应引起更大的重视。; 关键词兔瘟兔出血症病毒2型(RHDV2/b/GI.2) 病理组织学致病力; Keywords rabbit hemorrhagic disease Rabbit hemorrhagic disease virus type 2(RHDV2/b/GI.2) histopathology virulence; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型VP60蛋白重组腺病毒的构建及鉴定被引量：3: 3; 作者肖璐于吉锋罗燕谢晶叶勇刚吴学婧毛从剑李兴玉曹冶林毅潘梦叶健强魏勇康润敏; 机构四川省畜牧科学研究院四川农业大学; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3336-3344,共9页; 基金四川省省级科研院所基本科研业务费项目(SASA202302、SASA202103) 四川省自然科学基金项目(2022NSFSC0081) +1 种基金四川省财政运行专项(SASA2023CZYX006)。; 文摘【目的】试验旨在以复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体,构建Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型(RHDV2)VP60蛋白的重组腺病毒,为RHDV2新型疫苗研究提供依据。【方法】修饰、合成带有Kozak序列的VP 60基因序列,将其与腺病毒穿梭质粒进行重组,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,构建重组腺病毒穿梭质粒,并利用酶切与测序对重组腺病毒穿梭质粒进行鉴定;采用Ad Max腺病毒包装系统,基于HEK293细胞进行穿梭质粒与腺病毒骨架质粒的定点同源重组,构建重组腺病毒Ad5-RHDV2-VP60并感染HEK293细胞,通过RT-PCR、Western blotting及间接免疫荧光试验(IFA)对重组腺病毒进行表达验证;利用Reed-Muench方法测定重组腺病毒的病毒滴度。【结果】重组腺病毒穿梭质粒酶切鉴定结果可见2条大小分别为3895和1752 bp的条带,测序比对结果显示,其与GenBank中公布的相应序列相似性>99%,表明穿梭质粒构建成功。RT-PCR结果可见大小约为515 bp的特异性条带;Western blotting结果显示,大小约为60 ku的VP60蛋白特异性条带;IFA观察结果显示,感染重组腺病毒的HEK293细胞产生了绿色荧光,表明重组病毒能在HEK293细胞中表达VP60蛋白,且该蛋白具有良好的抗原性;病毒滴度测定结果显示,初代重组腺病毒的TCID_(50)为10^(5.5)/0.1 mL。【结论】本试验构建了含RHDV2 VP 60基因的重组腺病毒,并成功表达了RHDV2 VP60蛋白,为进一步研究开发RHDV2疫苗提供了病毒模型。; 关键词兔瘟兔出血症病毒2型(RHDV2) 重组腺病毒 HEK293细胞 KOZAK序列; Keywords rabbit hemorrhagic disease Rabbit hemorrhagic disease virus type 2(RHDV2) recombinant Adenovirus HEK293 cells Kozak sequence; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名1例兔出血症病毒2型感染疫情的诊断被引量：4: 4; 作者常赵阳刘玉梅刘潍萁王佳宁位兰张自强; 机构河南科技大学动物科技学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1886-1894,共9页; 基金河南省重点研发与推广专项(192102110077,202102110093)。; 文摘旨在了解河南疑似兔出血症病毒2型(RHDV2)的感染情况,并对RHDV2的致病性进行初步分析。本研究采集病死兔的肝组织,利用微量血凝试验、RT-PCR扩增及测序、VP60基因系统进化树分析和动物回归试验进行病原鉴定。微量血凝试验结果显示,组织样本悬液能够凝集人“O”型血红细胞;RT-PCR扩增、测序及序列分析结果显示,检测到RHDV2特异性条带,片段大小为829 bp;系统进化树分析结果发现,分离的病毒与我国四川发现的首例RHDV2毒株SC2020/04的VP60基因相似性高达98.2%;临床病例的剖检显示病死兔胸腺、气管、肺、肝、脾、肾等实质性器官出血较为严重;动物回归试验发现攻毒组家兔死亡率为100%,平均死亡时间为65.8 h,RT-PCR扩增均检测到RHDV2特异性条带。本研究首次在河南兔场检测到RHDV2,为RHDV2的防控提供了科学参考。; 关键词兔出血症病毒1型兔出血症病毒2型 VP60基因 RT-PCR 致病力; Keywords RHDV RHDV2 VP60 gene RT-PCR pathogenicity; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兔出血症2型研究进展被引量：5: 5; 作者董浩张乐颖左琴董青花朱婉月刘佐民梁春南; 机构中国食品药品检定研究院国家啮齿类实验动物资源库; 出处《动物医学进展》北大核心 2023年第9期97-101,共5页; 文摘兔出血症2型是由兔出血症病毒2型引起的危害家兔和野兔的一种新型高度传染性、急性致死性疫病,该病2010年在法国首次被发现。2020年4月该病传入我国四川省后,迅速传播至我国多个省份,对我国养兔业的健康发展造成了严重危害。目前,国内外关于兔出血症2型的研究比较有限,而且国内没有商品化的疫苗用于该病的预防,因此应该加强对该病的重视程度,积极开展防控技术的研究。论文通过对兔出血症2型的流行情况、病原学及理化特性、流行病学、临床症状、剖检病变、诊断方法和防治措施等多个方面进行阐述,以期为科学预防和控制兔出血症2型提供参考。; 关键词兔兔出血症病毒2型流行病学诊断方法防控措施; Keywords rabbit Rabbit hemorrhagic disease virus type 2 epidemiology diagnostic method prevention and control measures; 分类号 S852.659.6 [农业科学—基础兽医学] S852.291 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名密码子优化的RHDV2双VP60基因重组杆状病毒构建及表达蛋白免疫原性分析被引量：1: 6; 作者于吉锋谢晶黄勇肖璐林毅曹冶叶勇刚魏勇吴学婧李江凌康润敏; 机构四川省畜牧科学研究院四川农业大学动物医学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期668-677,共10页; 基金四川省自然科学基金(2022NSFSC0081) 四川省基本科研业务专项(SASA202302) +1 种基金四川省财政运行专项(SASA2023CZYX006)。; 文摘 [目的]试验旨在优化兔出血症病毒2型(Rabbit hemorrhagic disease virus 2,RHDV2)病毒样颗粒(virus-like particle, VLP)疫苗的制备策略,探究RHDV2 VLP疫苗对家兔的免疫原性,为低成本、高产量RHDV2新型疫苗研发提供新思路。[方法]根据昆虫细胞的密码子偏好性优化合成RHDV2 VP60全基因,将双VP60基因插入真核载体pFastBacTMDual,转化携带Bacmid质粒的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,构建含双VP60基因的重组杆粒Bacmid-VP60-VP60,转染Sf9昆虫细胞,通过Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)及透射电镜对重组杆状病毒Bacmid-VP60-VP60进行表达验证;将优化策略制备的重组蛋白抗原与氢氧化铝佐剂按照9∶1比例制备VLP灭活疫苗,通过安全性检验、最小免疫剂量、免疫持续期等评估优化策略制备的RHDV2 VLP疫苗的保护效果。[结果]试验成功构建重组杆粒Bacmid-VP60-VP60。Western blotting鉴定结果显示,重组杆状病毒转染Sf9细胞表达出大小约60 ku的RHDV2 VP60蛋白。IFA鉴定结果显示,感染重组杆状病毒的Sf9细胞产生了大量的黄绿色荧光,表明重组杆状病毒在Sf9细胞中大量表达VP60蛋白。透射电镜观察结果显示,VP60蛋白折叠成VLP,大小为40 nm左右,呈现球形结构,表面光滑。优化策略制备的RHDV2 VLP疫苗对家兔具有良好的安全性和免疫原性,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫持续期可达210 d以上。[结论]试验构建了含有密码子优化的双VP60基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中成功表达RHDV2 VP60蛋白,该蛋白制备的VLP疫苗对家兔具有良好的免疫原性。; 关键词兔出血症病毒2型(RHDV2) 病毒样颗粒(VLP) 密码子偏好性重组杆状病毒免疫原性; Keywords Rabbit hemorrhagic disease virus 2(RHDV2) virus-like particle(VLP) codon bias recombinant Baculovirus immunogenicity; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	四川省兔出血症病毒2型流行病学调查及遗传变异分析	李丽陈弟诗陈斌张毅邓飞邵靓周莉媛任永军	《中国动物检疫》 CAS	2022	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	中国首例兔出血症病毒2型(RHDV2/b/GI.2)的鉴定及病理学观察	肖璐于吉锋林毅周泷郭志强谢晶岳建国叶勇刚曹冶李兴玉潘梦叶健强李敏康润敏	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2021	13	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型VP60蛋白重组腺病毒的构建及鉴定	肖璐于吉锋罗燕谢晶叶勇刚吴学婧毛从剑李兴玉曹冶林毅潘梦叶健强魏勇康润敏	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2023	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	1例兔出血症病毒2型感染疫情的诊断	常赵阳刘玉梅刘潍萁王佳宁位兰张自强	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	兔出血症2型研究进展	董浩张乐颖左琴董青花朱婉月刘佐民梁春南	《动物医学进展》北大核心	2023	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	密码子优化的RHDV2双VP60基因重组杆状病毒构建及表达蛋白免疫原性分析	于吉锋谢晶黄勇肖璐林毅曹冶叶勇刚魏勇吴学婧李江凌康润敏	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料