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多头带绦虫dUTPase基因的原核表达、组织定位及酶学活性分析
1
作者
黄兴
徐璟
+6 位作者
王宇
杨应东
万洁
郭承
古小彬
谢跃
杨光友
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2374-2382,共9页
探讨多头带绦虫脱氧尿苷三磷酸酶(Tm-dUTPase)的基因特征,并初步分析Tm-dUTPase的酶学活性。通过原核表达,得到重组Tm-dUTPase蛋白,并对其进行Western blot分析、免疫荧光定位及酶学活性分析。序列分析结果显示,Tm-dUTPase基因ORF框为44...
探讨多头带绦虫脱氧尿苷三磷酸酶(Tm-dUTPase)的基因特征,并初步分析Tm-dUTPase的酶学活性。通过原核表达,得到重组Tm-dUTPase蛋白,并对其进行Western blot分析、免疫荧光定位及酶学活性分析。序列分析结果显示,Tm-dUTPase基因ORF框为447bp,编码148个氨基酸,预测的蛋白质分子大小为16.39ku,等电点为6.263;与猪囊尾蚴和豆状囊尾蚴dUTPase基因的氨基酸序列相似性分别为97%和91%。原核表达的TmdUTPase为可溶性蛋白,纯化后的蛋白质质量浓度为0.907mg·mL^(-1),Western blot分析显示,该蛋白质能够被山羊脑多头蚴阳性血清所识别,具有较强的反应原性。免疫荧光定位显示Tm-dUTPase主要分布于多头带绦虫成虫的体内实质区,同时广泛分布于多头带绦虫幼虫(脑多头蚴)的头节和包囊囊壁外层。酶学活性试验测得重组Tm-dUTPase的比活力为986.29U·mg^(-1),EDTA能够抑制Tm-dUTPase活性,而金属离子Mg^(2+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)能够增强Tm-dUTPase活性。上述结果为进一步研究Tm-dUTPase基因的生物学功能奠定了基础。
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关键词
多头带绦虫
dUTPase基因
原核表达
酶
学
活性
分析
免疫
荧光
定位
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职称材料
烟草花发育过程中花药和花粉IAA分布规律的研究
被引量：
2
2
作者
赵珺
陈丹
+1 位作者
安鹏
赵洁
《武汉植物学研究》
CSCD
北大核心
2009年第5期541-547,共7页
以烟草(Nicotiana tabacumL.)花药为材料,通过4,’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色详细观察花粉发育过程,获得了花药发育时期与花蕾大小的对应关系;通过吲哚乙酸(IAA)单克隆抗体、免疫组织化学技术以及DR5∶∶GUS转基因植株的GUS活性对...
以烟草(Nicotiana tabacumL.)花药为材料,通过4,’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色详细观察花粉发育过程,获得了花药发育时期与花蕾大小的对应关系;通过吲哚乙酸(IAA)单克隆抗体、免疫组织化学技术以及DR5∶∶GUS转基因植株的GUS活性对花药和花粉发育过程中生长素的分布规律进行了研究。免疫酶标记结果表明,在不同的花药发育时期IAA水平呈现出明显的差别。小孢子母细胞时期,IAA在整个花药中均有分布,并且在小孢子母细胞发育晚期,IAA信号集中在小孢子母细胞的细胞核中;随着小孢子母细胞减数分裂后形成四分体,IAA信号逐渐减弱,四分体中几乎没有信号;单核花粉期的花药中IAA信号进一步减弱,仅存在于花药壁中;待小孢子继续发育为成熟二核期时,花粉和整个花药组织中均出现较强的IAA信号。GUS活性检测结果表明,烟草DR5∶∶GUS转基因植株中花药和花粉粒的GUS信号与IAA免疫酶定位结果基本一致。总的来说,IAA在烟草花药和花粉中的积累呈现出由强到弱、再由弱到强的分布规律,暗示IAA在被子植物花药和花粉发育过程中可能起着较为重要的作用。
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关键词
烟草
花药
花粉
吲哚乙酸(IAA)
免疫
酶
定位
:
gus
活性
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职称材料
题名
多头带绦虫dUTPase基因的原核表达、组织定位及酶学活性分析
1
作者
黄兴
徐璟
王宇
杨应东
万洁
郭承
古小彬
谢跃
杨光友
机构
四川农业大学动物医学院
成都农业科技职业学院
攀枝花农林科学研究院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期2374-2382,共9页
基金
四川省科技支撑计划项目(2015NZ1504)
文摘
探讨多头带绦虫脱氧尿苷三磷酸酶(Tm-dUTPase)的基因特征,并初步分析Tm-dUTPase的酶学活性。通过原核表达,得到重组Tm-dUTPase蛋白,并对其进行Western blot分析、免疫荧光定位及酶学活性分析。序列分析结果显示,Tm-dUTPase基因ORF框为447bp,编码148个氨基酸,预测的蛋白质分子大小为16.39ku,等电点为6.263;与猪囊尾蚴和豆状囊尾蚴dUTPase基因的氨基酸序列相似性分别为97%和91%。原核表达的TmdUTPase为可溶性蛋白,纯化后的蛋白质质量浓度为0.907mg·mL^(-1),Western blot分析显示,该蛋白质能够被山羊脑多头蚴阳性血清所识别,具有较强的反应原性。免疫荧光定位显示Tm-dUTPase主要分布于多头带绦虫成虫的体内实质区,同时广泛分布于多头带绦虫幼虫(脑多头蚴)的头节和包囊囊壁外层。酶学活性试验测得重组Tm-dUTPase的比活力为986.29U·mg^(-1),EDTA能够抑制Tm-dUTPase活性,而金属离子Mg^(2+)、Zn^(2+)、Cu^(2+)能够增强Tm-dUTPase活性。上述结果为进一步研究Tm-dUTPase基因的生物学功能奠定了基础。
关键词
多头带绦虫
dUTPase基因
原核表达
酶
学
活性
分析
免疫
荧光
定位
Keywords
Taenia multiceps
dUTPase gene
prokaryotic expression
enzymatic activity analysis
immunolocalization
分类号
S852.734 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
烟草花发育过程中花药和花粉IAA分布规律的研究
被引量：
2
2
作者
赵珺
陈丹
安鹏
赵洁
机构
武汉大学生命科学学院
出处
《武汉植物学研究》
CSCD
北大核心
2009年第5期541-547,共7页
基金
2007年国家大学生创新性实验项目资助
国家基础科学人才培养基金项目(J0630648)资助
文摘
以烟草(Nicotiana tabacumL.)花药为材料,通过4,’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色详细观察花粉发育过程,获得了花药发育时期与花蕾大小的对应关系;通过吲哚乙酸(IAA)单克隆抗体、免疫组织化学技术以及DR5∶∶GUS转基因植株的GUS活性对花药和花粉发育过程中生长素的分布规律进行了研究。免疫酶标记结果表明,在不同的花药发育时期IAA水平呈现出明显的差别。小孢子母细胞时期,IAA在整个花药中均有分布,并且在小孢子母细胞发育晚期,IAA信号集中在小孢子母细胞的细胞核中;随着小孢子母细胞减数分裂后形成四分体,IAA信号逐渐减弱,四分体中几乎没有信号;单核花粉期的花药中IAA信号进一步减弱,仅存在于花药壁中;待小孢子继续发育为成熟二核期时,花粉和整个花药组织中均出现较强的IAA信号。GUS活性检测结果表明,烟草DR5∶∶GUS转基因植株中花药和花粉粒的GUS信号与IAA免疫酶定位结果基本一致。总的来说,IAA在烟草花药和花粉中的积累呈现出由强到弱、再由弱到强的分布规律,暗示IAA在被子植物花药和花粉发育过程中可能起着较为重要的作用。
关键词
烟草
花药
花粉
吲哚乙酸(IAA)
免疫
酶
定位
:
gus
活性
Keywords
Nicotiana tabacum L.
Anther
Pollen
Indole-3-acetic acid（IAA）
Immunoenzyme localization
gus
activity
分类号
Q945.4 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多头带绦虫dUTPase基因的原核表达、组织定位及酶学活性分析
黄兴
徐璟
王宇
杨应东
万洁
郭承
古小彬
谢跃
杨光友
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
烟草花发育过程中花药和花粉IAA分布规律的研究
赵珺
陈丹
安鹏
赵洁
《武汉植物学研究》
CSCD
北大核心
2009
2
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