酶联免疫吸附法与蛋白质免疫印迹法检测抗核小体抗体在SLE诊断中的价值对比

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作者 汤滨滨 程思 《中国实用医药》 2024年第14期94-97,共4页

目的比较蛋白质免疫印迹法(WB)、酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法306例自身免疫疾病患者,根据明确的临床诊断结果将患者分为SLE组(SLE患者,144例)和非SLE组(非SLE患者,162例);选... 目的比较蛋白质免疫印迹法(WB)、酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法306例自身免疫疾病患者,根据明确的临床诊断结果将患者分为SLE组(SLE患者,144例)和非SLE组(非SLE患者,162例);选取同期非自身免疫疾病患者100例作为对照组。所有研究对象均采用ELISA及WB检测AnuA。分别统计两种检测方法的AnuA检测结果。比较两种检测方法对AnuA的诊断价值,包括准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,并进行统计学检验,分析两种检测方法的一致性。结果SLE组:ELISA检测AnuA阳性120例、阴性24例,WB检测AnuA阳性109例、阴性35例;非SLE组:ELISA检测AnuA阳性76例、阴性86例,WB检测AnuA阳性71例、阴性91例;对照组:ELISA检测AnuA阳性17例、阴性83例,WB检测AnuA阳性11例、阴性89例;两种检测方法在SLE组、非SLE组和对照组的AnuA检测阳性率比较无统计学意义(P>0.05);但两种检测方法的SLE组患者AnuA阳性率明显高于非SLE组和对照组,且非SLE组患者AnuA阳性率明显高于对照组(P<0.05)。ELISA检测AnuA的敏感度87.4%(180/206)高于WB检测的80.1%(165/206)(P<0.05);两种检测方法的特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度比较无统计学意义(P>0.05)。两种检测方法检测结果的总符合率为90.1%,判断具有较好的一致性(K值=0.516)。结论ELISA及WB检测AnuA在SLE中均具有较高的诊断效能,临床可在AnuA初步检测中运用WB,如有必要可在复检中运用ELISA,有效提高检测阳性率,为临床诊断SLE提供参考。 展开更多

关键词 抗核小体抗体 系统性红斑狼疮 蛋白质免疫印迹法 酶联免疫吸附法

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蛋白免疫印迹法(WB)试验结果与HIV感染关系的分析 被引量：4

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作者 杨晓虹 许海生 《中国实用医药》 2010年第13期25-26,共2页

目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且... 目的通过对蛋白免疫印迹法(WB)试验结果的观察,确定个体是否感染HIV以及HIV感染的状况。方法对60份抗-HIV初筛阳性血清使用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认实验。结果在被检测样品中,HIV-1型确认试验阳性54例,占90%;HIV-1型确认试验阳性,且提示HIV-2阳性感染1例,占1.6%;HIV-1型确认试验弱阳性(不确定)3例,占5%;HIV-1型确认试验阳性2例,占3.3%。结论蛋白免疫印迹法(WB)试验确定个体有无HIV感染以及HIV感染情况提供依据。 展开更多

关键词 HIV感染 蛋白免疫印迹法(WB) 条带

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765份HIV-1抗体阳性吸毒者标本蛋白免疫印迹带型分析 被引量：19

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作者 刁丽梅 李杰 +4 位作者 王晔 林萍 鄢心革 于国龙 林鹏 《岭南皮肤性病科杂志》 2007年第4期205-207,共3页

目的:分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解我省吸毒人群WB带型的分布特征。方法:对本实验室2001至2003年的HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果:765份HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120、p24、p66、p51带型的出... 目的:分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解我省吸毒人群WB带型的分布特征。方法:对本实验室2001至2003年的HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果:765份HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120、p24、p66、p51带型的出现率都在96%以上,gp41、p31带型的出现率分别为93.86%和91.37%;WB全带型出现率为57.12%(437/765);性别与WB带型的出现率差异无统计学意义;不同年龄组与出现p24带型差异有统计学意义(Х2=19.5,P<0.01)。结论:抗env和gag基因编码蛋白的抗体gp160、gp120、gp41、p24阳性率高,是确证HIV-1感染的必备条件;我省的HIV亚型、传播途径和WB带型之间的关系有待进一步的研究。 展开更多

关键词 HIV-1抗体 蛋白免疫印迹(WB)法 WB带型 吸毒者

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P-STAT3蛋白在宫颈病变组织中的表达及意义

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作者 朱月 《浙江临床医学》 2014年第9期1405-1406,共2页

宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤之一，据Globocan统计，2000年全世界诊断和死于宫颈癌的病例数分别为470，606和233，372人［1］，而我国每年新增宫颈癌患者约13.5万左右，是仅次于乳腺癌的第二大最常见恶性肿瘤。研究显示，近年... 宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤之一，据Globocan统计，2000年全世界诊断和死于宫颈癌的病例数分别为470，606和233，372人［1］，而我国每年新增宫颈癌患者约13.5万左右，是仅次于乳腺癌的第二大最常见恶性肿瘤。研究显示，近年宫颈癌发病率有所增高，且发病年龄呈明显年轻化趋势［2］。为了探讨P-STAT3在宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌（SCC）中的表达及意义，作者应用免疫蛋白印迹法对STAT3在宫颈病变组织中的表达进行分析，报道如下。 展开更多

关键词 STAT3蛋白 病变组织 宫颈癌 生殖道恶性肿瘤 宫颈上皮内瘤变 P-STAT3 免疫蛋白印迹法 年轻化趋势

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相关蛋白在携带载脂蛋白-J基因大鼠BMSCs中的表达及意义 被引量：3

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作者 刘学良 周冲 +2 位作者 徐斌 郑晓梅 刘亮 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期63-67,共5页

目的检测重组质粒pEGFP-N1-apoJ在不同量、不同时间条件下转染大鼠骨髓间充质干细胞的瞬时转染效率,并测定载脂蛋白-J(ApoJ)在靶细胞中能否高表达。方法贴壁培养细胞,并用脂质体LipofectaminTM2000分别介导0.8、1.2、1.6、2.0μg重组质... 目的检测重组质粒pEGFP-N1-apoJ在不同量、不同时间条件下转染大鼠骨髓间充质干细胞的瞬时转染效率,并测定载脂蛋白-J(ApoJ)在靶细胞中能否高表达。方法贴壁培养细胞,并用脂质体LipofectaminTM2000分别介导0.8、1.2、1.6、2.0μg重组质粒pEGFP-N1-apoJ转染,置荧光显微镜下观察转染结果,测定在24、48、72h时间点的瞬时转染效率。蛋白免疫印迹法分别检测pEGFP-N1-apoJ质粒转染组、空pEGFP-N1质粒转染组、空白对照组ApoJ的表达情况。结果不同的质粒量中1.6μg pEGFP-N1-apoJ质粒与3.0μL脂质体制备的复合物瞬时转染效率最高,分别作用24、48、72h可达27.8%、34.3%、28.2%。蛋白免疫印迹法检测到pEGFP-N1-apoJ质粒组大量ApoJ表达,空质粒及空白对照组见微量ApoJ表达;并且pEGFP-N1-apoJ质粒组Apo-J的表达明显高于空载体及空白对照组(P<0.05)。结论利用脂质体介导可将重组质粒pEGFP-N1-apoJ成功转染入大鼠骨髓间充质干细胞,ApoJ在大鼠骨髓间充质干细胞中得到大量表达。 展开更多

关键词 载脂蛋白-J 重组质粒 骨髓间充质干细胞 瞬时转染 蛋白免疫印迹法

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贵州遵义地区82只健康蝙蝠脑组织博尔纳病毒核蛋白检测 被引量：1

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作者 雷以会 徐平 杨利玲 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第11期23-25,共3页

目的观察贵州遵义地区蝙蝠脑组织博尔纳病毒(BDV)感染情况。方法采用Western blotting法检测贵州遵义地区82只健康蝙蝠脑组织中BDV核蛋白。结果蝙蝠脑组织BDV核蛋白阳性率为12.2%(10/82)。结论贵州遵义地区健康蝙蝠存在BDV感染。

关键词 博尔纳病毒 蝙蝠 核蛋白 蛋白质免疫印迹法

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2021—2023年贵港市HIV-1感染者的流行特征和检测结果分析

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作者 韦文翠 郑萍佐 +3 位作者 邵玉兰 甘健燕 张婧萱 黄运轩 《中国医药科学》 2024年第14期126-129,166,共5页

目的分析2021—2023年贵港市人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)抗体阳性者的免疫蛋白印迹试验(WB)带型特征,探讨免疫状况及相关指标在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)发展中的作用。方法对2021—2023年1719份经贵港市AIDS确证实验室确证为HIV-1抗... 目的分析2021—2023年贵港市人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)抗体阳性者的免疫蛋白印迹试验(WB)带型特征,探讨免疫状况及相关指标在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)发展中的作用。方法对2021—2023年1719份经贵港市AIDS确证实验室确证为HIV-1抗体阳性且在治疗前开展了CD4^(+)T淋巴细胞检测的样本,用SPSS 25.0分析人口学特征和实验室相关检测结果。结果1719例HIV-1抗体阳性以男性、40岁以上、已婚、农民、文化程度较低、医疗机构临床筛查为主;CD4^(+)T淋巴细胞计数与年龄呈负相关,与WB条带数呈正相关(P<0.05)。带型p55、p39、p17检出阳性率在不同免疫程度和病程间差异有统计学意义(P<0.05)。结论农民仍然是贵港市AIDS宣教、检测工作的重点人群,p55、p39和p17可作为疾病发展和免疫情况的一个潜在判别依据。 展开更多

关键词 HIV-1抗体确证阳性 免疫蛋白印迹法 条带 免疫情况

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子宫腺肌病中孕激素受体亚型表达的研究 被引量：2

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作者 陆晓媛 《中国实用医药》 2008年第35期45-46,共2页

目的研究子宫腺肌病中孕激素受体亚型的表达,探讨孕激素受体亚型(hPR)在子宫腺肌病发病中的作用机制。方法运用免疫蛋白印迹法(Western blot)和RT-PCR方法测定子宫腺肌病患者(24例)病灶及其在位内膜及对照组(19例)子宫内膜标本中孕激素... 目的研究子宫腺肌病中孕激素受体亚型的表达,探讨孕激素受体亚型(hPR)在子宫腺肌病发病中的作用机制。方法运用免疫蛋白印迹法(Western blot)和RT-PCR方法测定子宫腺肌病患者(24例)病灶及其在位内膜及对照组(19例)子宫内膜标本中孕激素受体亚型在蛋白和mRNA水平的表达,计算机图像分析、半定量研究孕激素受体亚型的表达。结果子宫腺肌病异位内膜中hPRs的表达均明显低于在位内膜和对照组,研究组在位或异位内膜中,hPR-A含量均高于hPR-B;而在mRNA水平上则差异无统计学意义(P>0.05)。结论子宫腺肌病异位内膜hPRs蛋白的表达均明显低于在位内膜,而在mRNA水平上却无显著性差异;hPR蛋白的活性可能受转录后调节。 展开更多

关键词 子宫腺肌病 人孕激素受体亚型 免疫蛋白印迹法 反转录聚合酶链反应

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S180瘤株对动物模型体内荷瘤的影响及致瘤机制 被引量：3

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作者 迟淑萍 张诗龙 +5 位作者 陈红鸽 刘军 杜丽 孙杰 蒋正杰 程云 《中国医药导报》 CAS 2014年第27期9-11,25,共4页

目的通过动物实验,观察S180瘤株对小鼠荷瘤形成的影响,探讨S180肉瘤细胞的致瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型,将昆明系小鼠36只,按体重随机分为3组,每组12只。空白组:每日灌胃给予蒸馏水,0.2 mL/10 g体重;模型组:皮下接种S180肉瘤细胞,... 目的通过动物实验,观察S180瘤株对小鼠荷瘤形成的影响,探讨S180肉瘤细胞的致瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型,将昆明系小鼠36只,按体重随机分为3组,每组12只。空白组:每日灌胃给予蒸馏水,0.2 mL/10 g体重;模型组:皮下接种S180肉瘤细胞,制成小鼠实体瘤模型,其后每日口服灌胃1%羧甲基纤维素钠(CMC)溶液;环磷酰胺组:皮下接种S180肉瘤细胞,制成小鼠实体瘤模型后,注射0.02 g/(kg·d)环磷酰胺注射液。观察各组肿瘤生长情况,计算平均重量;与模型组比较,环磷酰胺组计算肿瘤生长抑制率;采用蛋白免疫印迹法技术方法,检测抑癌基因P53、P21及凋亡抑制基因Bcl-2在S180肿瘤动物模型瘤体组织中的蛋白表达。结果模型组小鼠荷瘤成功,与空白组比较,模型组小鼠出现肿瘤,其瘤重为(1.513±0.790)g,环磷酰胺组瘤重为(0.248±0.253)g,两组比较差异有高度统计学意义(P<0.01),环磷酰胺抑瘤率为83.63%。在被检瘤体中,三种蛋白表达空白组与模型组、空白组与环磷酰胺组相比差异均有高度统计学意义(P<0.01);与环磷酰胺组比较,模型组P53、P21抗体的蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中,P21表达差异有高度统计学意义(P<0.01),而Bcl-2变化不大,差异无统计学意义(P=0.66)。结论 S180肉瘤细胞可能通过抑制P53与P21的表达而起到促进肿瘤形成的作用,该机制的研究可为筛选肿瘤治疗药物及肿瘤机制探讨等的肿瘤动物模型提供重要的实验依据。 展开更多

关键词 S180 蛋白免疫印迹法 P53 P21 Bcl-2

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血管生成素Ⅱ在低压性缺氧成年大鼠视网膜的表达 被引量：6

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作者 张勇 王志斌 +3 位作者 周霞 许玲 芦晓磊 黄剑云 《眼科新进展》 CAS 2007年第10期758-761,共4页

目的探讨成年大鼠缺氧后血管生成素Ⅱ（angiopoietinⅡ,AngⅡ）在视网膜中的表达情况。方法成年Wistar大鼠暴露于低氧环境（70~90mL.L-1O2）2h后,分别在3h、24h、3d、7d和14d,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测An... 目的探讨成年大鼠缺氧后血管生成素Ⅱ（angiopoietinⅡ,AngⅡ）在视网膜中的表达情况。方法成年Wistar大鼠暴露于低氧环境（70~90mL.L-1O2）2h后,分别在3h、24h、3d、7d和14d,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测AngⅡ在视网膜中的表达情况。结果缺氧后3h、24h和3d,成年大鼠视网膜AngⅡmRNA水平与正常对照组相比分别增加120%、50%、30%（P〈0.05）,AngⅡ蛋白质水平与正常对照组相比分别增加了90%、32%、20%,而在7d和14d时其表达较正常对照组差异无显著性。结论缺氧可以使成年大鼠视网膜AngⅡ表达上调。 展开更多

关键词 血管生成素Ⅱ 缺氧 视网膜 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 蛋白免疫印迹法

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结肠癌组织中Cyr61和HPA-1的表达水平及其在侵袭转移中的作用 被引量：5

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作者 崔京远 马红 +2 位作者 马文慧 亓玉琴 许之美 《中国现代普通外科进展》 CAS 2012年第6期439-443,共5页

目的:检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白、乙酰肝素酶(HPA-1)蛋白及Cyr61基因、HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌中侵袭转移的机制及关系。方法:用western blot方法检测结肠癌组织Cyr61和HPA-1的蛋白表达水平,用实时荧... 目的:检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白、乙酰肝素酶(HPA-1)蛋白及Cyr61基因、HPA-1基因在结肠癌组织中的表达水平,探讨二者在结肠癌中侵袭转移的机制及关系。方法:用western blot方法检测结肠癌组织Cyr61和HPA-1的蛋白表达水平,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测结肠癌Cyr61和HPA-1的基因表达水平,分析二者与结肠癌的临床病理特征的关系。结果:结肠癌中Cyr61蛋白及HPA-1蛋白的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织(P均<0.001);结肠癌中Cyr61 mRNA及HPA-1 mRNA的表达水平高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织高于正常组织(P均<0.001)。Cyr61蛋白及基因和HPA-1蛋白及基因表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期等相关(P均<0.05)。结论:Cyr61蛋白、HPA-1蛋白及Cyr61 mRNA、HPA-1 mRNA在结肠癌组织中呈高表达,可促进结肠癌的侵袭转移。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 富含半胱氨酸61 乙酰肝素酶 蛋白免疫印迹法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应

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长链非编码RNA GAS5在原发性肝癌中的表达及侵袭作用 被引量：5

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作者 张洪军 马鹏飞 《中国现代普通外科进展》 CAS 2019年第3期169-172,共4页

目的:探讨长链非编码RNA Gas5(lncRNA Gas5)在原发性肝癌组织中的表达及其对Hep3B细胞的侵袭作用。方法:采用RT-PCR检测50例肝癌患者肿瘤和癌旁组织中lncRNA Gas5的表达水平,分析其与临床病理特征的相关性;通过在Hep3B细胞中过表达lncRN... 目的:探讨长链非编码RNA Gas5(lncRNA Gas5)在原发性肝癌组织中的表达及其对Hep3B细胞的侵袭作用。方法:采用RT-PCR检测50例肝癌患者肿瘤和癌旁组织中lncRNA Gas5的表达水平,分析其与临床病理特征的相关性;通过在Hep3B细胞中过表达lncRNA Gas5,利用Transwell小室检测过表达lncRNA Gas5后肿瘤细胞侵袭变化,RT-PCR和Western blot检测PTEN蛋白表达变化。结果:肝癌组织中的lncRNA Gas5表达水平较癌旁组织显著降低(t=9.759,P<0.01),并与肝门淋巴结转移(t=7.748,P<0.001)和肿瘤TNM分期(t=2.489,P=0.016)相关;过表达lncRNA Gas5后的Hep3B细胞侵袭能力减弱(P<0.01),PTEN基因和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:lncRNA Gas5在肝癌组织中的表达下调增强肝癌细胞的侵袭能力,可能成为原发性肝癌术后判断复发的分子标志物。 展开更多

关键词 长链非编码RNA Gas5 原发性肝癌 实时荧光定量PCR 蛋白质免疫印迹法

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HSP70在牦牛肠道中的分布与变化规律 被引量：2

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作者 廖博 崔燕 +4 位作者 杨雪 何俊峰 宋亮丽 杨晓晴 刘鹏刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1735-1742,共8页

为了探索HSP70在牦牛肠道组织中的分布与变化规律,选择6头份健康成年(3~6岁)牦牛的肠道组织,采用免疫组织化学(IHC)、蛋白免疫印迹(WB)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HSP70在牦牛十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠组织中的分布... 为了探索HSP70在牦牛肠道组织中的分布与变化规律,选择6头份健康成年(3~6岁)牦牛的肠道组织,采用免疫组织化学(IHC)、蛋白免疫印迹(WB)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HSP70在牦牛十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠组织中的分布与变化规律。免疫组织化学结果显示,HSP70在牦牛小肠的黏膜层、黏膜下层和肌层中均有表达,其中小肠黏膜上皮的柱状细胞呈强阳性表达,杯状细胞未见表达;小肠腺的肠腺细胞和肌层的平滑肌细胞也呈阳性表达,阳性反应主要分布于阳性细胞的细胞质和细胞核。HSP70在大肠中的定位表达与小肠相似,在大肠壁黏膜层、黏膜下层和肌层三层结构中也均有表达,其阳性反应主要位于黏膜上皮和固有层内散在分布的结缔组织细胞中,而固有层内大肠腺细胞仅在细胞核有表达,细胞质呈阴性。蛋白免疫印迹和免疫组化积分光密度值分析得出,从小肠的前端到大肠末端,HSP70的表达呈先增高后降低的趋势,其中在盲肠中的表达量达到峰值,且盲肠和结肠中HSP70的相对蛋白表达量极显著高于其他肠段(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果显示,HSP70mRNA在盲肠中的相对转录量最高,分别是十二指肠、空肠、回肠、结肠和直肠的2、1.68、1.06、1.43和1.52倍。本试验显示牦牛肠道中HSP70呈广泛性阳性反应,HSP70基因和HSP70蛋白在牦牛小肠和大肠中具有不同的表达模式,揭示了HSP70在牦牛小肠和大肠中所发挥生物学作用的异同,为HSP70在反刍动物组织中的表达和功能研究提供了资料。 展开更多

关键词 牦牛 肠道 HSP70 免疫组织化学 蛋白免疫印迹法 实时荧光定量PCR

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高三尖杉酯碱对小鼠黑色素瘤细胞增殖和迁移的影响和机制探讨

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作者 唐加峰 冉建华 +2 位作者 张滔 李静 陈地龙 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期195-195,共1页

本研究探讨了高三尖杉酯碱(Homoharringtonine,HHT)对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响及可能的机制。不同浓度HHT处理体外培养的B16F10细胞,CCK-8法检测HHT对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式... 本研究探讨了高三尖杉酯碱(Homoharringtonine,HHT)对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响及可能的机制。不同浓度HHT处理体外培养的B16F10细胞,CCK-8法检测HHT对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测HHT对细胞周期的影响;Transwell实验检测HHT对B16F10迁移能力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测周期及迁移关键蛋白的表达水平。 展开更多

关键词 高三尖杉酯碱 增殖和迁移 B16F10 小鼠黑色素瘤细胞 蛋白免疫印迹法 检测周期 细胞周期 细胞活力

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二甲双胍激活AMPK/p53调节尿素循环抑制结肠癌细胞增殖

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作者 张滔 胡玲 +2 位作者 徐航 唐加峰 冉建华 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期195-195,共1页

本研究探讨二甲双胍(metformin,Met)对结肠癌细胞HCT116增殖的抑制作用及可能的机制。不同浓度Met处理体外培养的结肠癌细胞HCT116,CCK-8法检测Met对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周... 本研究探讨二甲双胍(metformin,Met)对结肠癌细胞HCT116增殖的抑制作用及可能的机制。不同浓度Met处理体外培养的结肠癌细胞HCT116,CCK-8法检测Met对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;免疫荧光观察磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)的表达分布,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测AMPK/p53及尿素循环关键酶的表达水平。结果表明:10~80mmol/L浓度的Met对HCT116细胞有明显的生长抑制作用,并呈浓度和时间依赖性;10~40mmol/L浓度的Met能不同程度诱导细胞发生凋亡,并诱导肿瘤细胞G1期周期阻滞;Met处理组HCT116细胞胞浆及胞核内p-AMPK的表达增加;Met使细胞p-AMPK、p53蛋白表达水平上调,尿素循环酶精氨酸酶1(ARG1)、鸟氨酸脱羧酶(ODC)蛋白的表达下调。 展开更多

关键词 HCT116细胞 尿素循环 周期阻滞 二甲双胍 AMPK 腺苷酸激活蛋白激酶 蛋白免疫印迹法 P53

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基于网络药理学及分子对接探讨荜茇治疗胃癌的作用机制研究 被引量：1

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作者 王如梦 郭梓琪 +1 位作者 杨宏新 杨勇 《中国药物警戒》 2023年第10期1121-1128,共8页

目的采用网络药理学及分子对接技术探究荜茇治疗胃癌的作用机制。方法在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索荜茇成分及活性成分;利用GeneCards数据库检索与胃癌相关靶点及共同基因;绘制PPI网络图,分别进行GO和KEGG富集分析;利用AutoDock... 目的采用网络药理学及分子对接技术探究荜茇治疗胃癌的作用机制。方法在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索荜茇成分及活性成分;利用GeneCards数据库检索与胃癌相关靶点及共同基因;绘制PPI网络图,分别进行GO和KEGG富集分析;利用AutoDock Tools1.5.6软件对核心成分及靶点进行分子对接。MTT、流式细胞术检测不同浓度胡椒碱对SGC-7901细胞抑制及细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法检测相关蛋白表达水平。结果检索到荜茇活性成分15个;荜茇-胃癌共同靶点15个;GO功能富集分析关联到基因生物过程19条,细胞组成12条,分子功能4条,KEGG通路富集分析主要涉及TNF信号通路等;分子对接结果显示胡椒碱、芝麻素等与核心靶点分子对接结果良好。MTT法及流式细胞术结果显示,与对照组相比,胡椒碱组SGC-7901细胞抑制率增加(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01);Western blotting结果显示,与对照组相比,胡椒碱组SGC-7901细胞中TNF-α、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达量增加(P<0.05)。结论荜茇及活性成分胡椒碱对胃癌的治疗呈多靶点、多通路的特征,可为后续实验研究和临床应用提供参考。 展开更多

关键词 胃癌 荜茇 胡椒碱 网络药理学 分子对接 MTT法 流式细胞术 蛋白免疫印迹法

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