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猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立: 1; 作者刘助红王静 +4 位作者李秀珍尹雪琴张钰郭鹏举黄韧《中国比较医学杂志》北大核心 2017年第9期17-23,共7页; 目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间... 展开更多; 关键词猴D型逆转录病毒 P27基因原核表达流式免疫荧光微球检测技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组PrP102-242在COS-1中的表达及表达产物的检测: 2; 作者丁耀忠刘永生 +2 位作者陈浩泰刘文倩张杰《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1097-1100,共4页; 目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果... 展开更多; 关键词朊蛋白 COS-1细胞间接免疫荧光检测技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种细胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒的敏感性被引量：1: 3; 作者李华玮陶海静 +2 位作者赵孟孟郭宏伟赵绪永《贵州农业科学》 CAS 2018年第2期81-83,共3页; 为猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及进一步研究提供参考,采用组织半数感染(TCID_(50))法和免疫荧光检测技术(IFA)研究Mac-145、PAM和CRL-2843-CD163细胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的敏感性。结果表明:在Mac-145、PAM及CRL-2843-CD... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒敏感性细胞培养免疫荧光检测技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

三峡库区重庆段移民区肾综合征出血热宿主和自然疫源地的调查: 4; 作者杨松刘建平 +6 位作者宋建勇杨帆李亚斐黎永成谢中黄勇谭成祥《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期443-445,共3页; 目的　了解三峡库区重庆段移民区宿主动物携带肾综合征出血热病毒状况和自然疫源地类型 ,为库区移民卫生防病工作提供依据。方法　进行现场流行病学调查 (含流行病学资料 ,啮齿类生态和病原检测 )。应用直接免疫荧光和原位杂交技术分别... 展开更多; 关键词三峡库区移民区肾综合征出血热直接免疫荧光检测技术原位杂交宿主自然疫源地; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达: 5; 作者丁耀忠张杰 +7 位作者刘永生陈豪泰马丽娜马艳平杨生海王猛刘文倩殷宏《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期755-759,共5页; 为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-... 展开更多; 关键词牛朊蛋白 COS-7细胞间接免疫荧光检测技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立: 1; 作者刘助红王静李秀珍尹雪琴张钰郭鹏举黄韧; 机构广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室; 出处《中国比较医学杂志》北大核心 2017年第9期17-23,共7页; 基金广东省科技计划项目(编号:2016A040403059,2014A040401035,2014B070706006) 国家科技支撑计划项目(编号:2015BAI07B01); 文摘目的构建猴D型逆转录病毒的p27蛋白,并建立流式免疫荧光微球检测技术用于猴D型逆转录病毒的检测。方法通过PCR扩增p27基因片段,与p GEX-4T-1表达载体进行连接,转化至BL21(DE3)进行表达。通过SDS-PAGE分析蛋白表达的形式及最佳诱导时间。采取GST树脂纯化目标蛋白,包被磁珠,建立流式免疫荧光微球检测技术,用于临床样本的检测。结果重组蛋白以可溶的上清液进行表达,诱导的最佳时间为4 h。包被磁珠后,成功建立流式免疫荧光微球检测技术,对阳性血清稀释81倍仍可检测为阳性,对猴类其他病原的阳性血清无交叉反应,特异性强,与ELISA法同时对24份临床样本进行检测,其中3份样品的流式免疫荧光微球检测结果为阳性,ELISA检测结果为2份阳性,1份阴性,两种方法的检测结果符合率为96%。结论成功表达猴D型逆转录病毒p27蛋白,并运用该蛋白建立了灵敏度高,特异性强,样本需求少的流式免疫荧光微球检测技术,为后续推广应用多重流式免疫荧光微球检测技术奠定了基础。; 关键词猴D型逆转录病毒 P27基因原核表达流式免疫荧光微球检测技术; Keywords Simian type-D retrovirus p27 gene Prokaryotic expression Flow microsphere immunofluorescence assay; 分类号 R33 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组PrP102-242在COS-1中的表达及表达产物的检测: 2; 作者丁耀忠刘永生陈浩泰刘文倩张杰; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1097-1100,共4页; 基金国家自然科学基金(No.30671563)资助; 文摘目的重组的PrP102-242在COS-1细胞中的稳定表达以及表达产物的检测。方法重组表达载体pCI-PrP102-242转染COS-1细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测目的蛋白的表达。结果间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot检测到目的蛋白在COS-1细胞中的表达。结论目的蛋白PrP102-242在COS-1细胞中的成功表达为下一步研究PrPc的结构和功能奠定了基础。; 关键词朊蛋白 COS-1细胞间接免疫荧光检测技术; Keywords prion protein（PrP） COS-1 indirect immunofluorescence; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种细胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒的敏感性被引量：1: 3; 作者李华玮陶海静赵孟孟郭宏伟赵绪永; 机构河南牧业经济学院生物工程学院河南农业大学牧医工程学院; 出处《贵州农业科学》 CAS 2018年第2期81-83,共3页; 基金河南省科技攻关项目"猪主要病毒性疫病基因芯片同步检测技术研究"(172102110035) 河南省高等学校重点科研项目"猪流行性腹泻疫苗免疫保护力研究"(15A230030); 文摘为猪繁殖与呼吸综合征的临床诊断及进一步研究提供参考,采用组织半数感染(TCID_(50))法和免疫荧光检测技术(IFA)研究Mac-145、PAM和CRL-2843-CD163细胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的敏感性。结果表明:在Mac-145、PAM及CRL-2843-CD163细胞中,Mac-145细胞被HN07-1病毒感染最早,病毒增殖最快,荧光信号最强,TCID_(50)最大;PAM细胞其次;CRL-2843-CD163细胞最低。HN07-1病毒均能在Mac-145、PAM和CRL-2843-CD163细胞中增殖,且其对HN07-1病毒的敏感性依次为Mac-145>PAM>CRL-2843-CD163。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征病毒敏感性细胞培养免疫荧光检测技术; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV） sensitivity cell culture IFA; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三峡库区重庆段移民区肾综合征出血热宿主和自然疫源地的调查: 4; 作者杨松刘建平宋建勇杨帆李亚斐黎永成谢中黄勇谭成祥; 机构第三军医大学预防医学系军队流行病学教研室涪陵区卫生防疫站奉节县卫生防疫站巫山县卫生防疫站; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期443-445,共3页; 基金重庆市科学技术委员会资助项目! (52 2 2 7); 文摘目的　了解三峡库区重庆段移民区宿主动物携带肾综合征出血热病毒状况和自然疫源地类型 ,为库区移民卫生防病工作提供依据。方法　进行现场流行病学调查 (含流行病学资料 ,啮齿类生态和病原检测 )。应用直接免疫荧光和原位杂交技术分别检测宿主HFRSV Ag和HFRSV RNA。结果　在 5个移民区宿主带毒率分别为 19.4%、17.0 %、14 .0 %、13 .7%和 8.5 %。原位核酸分子杂交检测证实 ,5个移民区宿主动物均存在HFRSV RNA。结论　该研究证实这 5个移民区为HFRS的自然疫源地 ,三峡库区成库后水位提升 ,鼠类将大量迁移 ,可能造成HFRS暴发或流行 ,加强移民区灭鼠与防鼠工作十分必要。; 关键词三峡库区移民区肾综合征出血热直接免疫荧光检测技术原位杂交宿主自然疫源地; Keywords reservoir region of the Three Gorges migration area hemorrhagic fever with renal syndrome direct immunofluorescent assay technique in situ hybridization; 分类号 R512.8 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达: 5; 作者丁耀忠张杰刘永生陈豪泰马丽娜马艳平杨生海王猛刘文倩殷宏; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期755-759,共5页; 基金国家自然科学基金项目(30671563); 文摘为研究重组蛋白pCI-PrP27-30在COS-7细胞中的表达,用pCI-PrP27-30重组表达载体转染COS-7细胞后,经不同浓度的G418筛选后获得稳定的细胞系,然后用间接免疫荧光、间接ELISA和Western blot技术检测目的蛋白的表达。结果表明目的蛋白在COS-7细胞中成功表达。; 关键词牛朊蛋白 COS-7细胞间接免疫荧光检测技术; Keywords bovine prion protein（boprp） COS-7 indirect immunofluorescence assay; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猴D型逆转录病毒p27基因的原核表达及流式免疫荧光微球检测技术的建立	刘助红王静李秀珍尹雪琴张钰郭鹏举黄韧	《中国比较医学杂志》北大核心	2017	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	重组PrP102-242在COS-1中的表达及表达产物的检测	丁耀忠刘永生陈浩泰刘文倩张杰	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	3种细胞对猪繁殖与呼吸综合征病毒的敏感性	李华玮陶海静赵孟孟郭宏伟赵绪永	《贵州农业科学》 CAS	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	三峡库区重庆段移民区肾综合征出血热宿主和自然疫源地的调查	杨松刘建平宋建勇杨帆李亚斐黎永成谢中黄勇谭成祥	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	牛朊蛋白在COS-7细胞中的表达	丁耀忠张杰刘永生陈豪泰马丽娜马艳平杨生海王猛刘文倩殷宏	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料