应用免疫磁珠分离法及荧光定量PCR技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7 被引量：6

1

作者 王涛 刘凯 +3 位作者 王艳 綦廷娜 叶长芸 熊衍文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期291-293,315,共4页

目的建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time... 目的建立免疫磁珠分离法(immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(real-time PCR)技术快速检测肠出血性大肠埃希菌O157∶H7的方法。方法根据肠出血性大肠埃希菌O157∶H7抗原特异性基因rfbEO157设计引物和荧光探针,建立real-time PCR检测体系,并检测其特异性及敏感性;用O157免疫磁珠特异性捕获标本菌液中的O157∶H7大肠埃希菌,结合real-time PCR对磁珠捕获菌细胞的DNA进行检测分析。结果 Real-time PCR检测结果显示,O157∶H7大肠埃希菌可产生荧光信号,而其他常见致病菌均未见明显荧光信号;采用IMS-real-time PCR方法检测标本,菌液含菌量为3.3×102CFU/mL时即可被检出,检测全过程需时约4h。结论 IMS-real-time PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、快速易操作等特点,该检测方法能提高O157∶H7大肠埃希菌的检出率和准确性,可用于标本的快速诊断、疾病监测和暴发疫情的病原学调查。 展开更多

关键词 免疫磁珠分离法 荧光定量PCR 大肠埃希菌O157∶H7

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫磁珠分离技术在环境病原微生物检测中的应用 被引量：10

2

作者 杨万 何苗 《安全与环境学报》 CAS CSCD 2008年第6期18-22,共5页

介绍免疫磁珠分离技术的原理和操作步骤,分析其主要影响因素。介绍该技术在环境样品病原菌、原虫及病毒检测中的应用及研究进展。环境样品成分复杂,需经适当分离纯化处理再进行病原微生物检测,从而保证检测结果的可信性。免疫磁珠分离... 介绍免疫磁珠分离技术的原理和操作步骤,分析其主要影响因素。介绍该技术在环境样品病原菌、原虫及病毒检测中的应用及研究进展。环境样品成分复杂,需经适当分离纯化处理再进行病原微生物检测,从而保证检测结果的可信性。免疫磁珠分离技术兼具免疫反应的特异性及磁性分离的快速性,能够有效分离纯化环境水样中的病原微生物,广泛应用于病原微生物的检测。 展开更多

关键词 环境质量监测与评价 免疫磁珠分离技术 分离纯化 影响因素 病原菌 原虫 病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫磁珠分离技术及其在食源性致病菌检测中应用的进展 被引量：20

3

作者 刘细霞 涂俊铭 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期956-960,共5页

免疫磁珠分离技术(Immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)是利用磁珠上包被的特异性抗体与抗原发生亲和反应,从复杂的样品组份中分离目标抗原。再利用磁珠的磁响应性,实现对目标抗原的富集。该技术灵敏度高、特异性强、分... 免疫磁珠分离技术(Immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)是利用磁珠上包被的特异性抗体与抗原发生亲和反应,从复杂的样品组份中分离目标抗原。再利用磁珠的磁响应性,实现对目标抗原的富集。该技术灵敏度高、特异性强、分离富集速度快、适用范围广。再结合最新的快速检测技术,使食源性致病菌的检测时间从传统的几天缩短到几小时,在食源性致病菌检测中得到广泛的应用。本文从免疫磁珠分离技术的原理,食源性致病菌免疫磁珠的类型,免疫磁珠分离技术在食源性致病菌检测中应用的进展几个方面进行综述。 展开更多

关键词 免疫磁珠分离技术 食源性致病菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用免疫磁珠分离法纯化弓形虫速殖子的研究 被引量：1

4

作者 楼研 沈继龙 +4 位作者 程维晟 刘芳 陈鹤 罗庆礼 王林 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第1期9-13,共5页

目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子,以去除宿主细胞成分,并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响,为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株(China 1基因型)速殖子感染小鼠,提取腹腔液,常规方法制备速殖子可溶性抗... 目的用免疫磁珠分离法分选弓形虫速殖子,以去除宿主细胞成分,并尽可能对虫体的生物学特性无不良影响,为弓形虫的基础与临床研究提供技术基础。方法采用弓形虫Wh3株(China 1基因型)速殖子感染小鼠,提取腹腔液,常规方法制备速殖子可溶性抗原,免疫家兔,获得兔抗弓形虫多克隆IgG抗体。用抗体包被的免疫磁珠对小鼠腹腔液内弓形虫速殖子进行纯化,比较其纯度、回收率、虫体活力、毒力与感染性。结果用免疫磁珠分离技术纯化弓形虫速殖子后,其纯度提高到98.2%,细胞清除率为96%,虫体回收率为73.5%;用内盐法(MTS)细胞增殖与毒性检测试剂盒检测分离后的速殖子活性为95.6%。定量分组感染小鼠后死亡时间无显著性差异。结论免疫磁珠分离的速殖子纯度、细胞清除率和虫体回收率较高,能有效去除宿主细胞,且对速殖子的活性和毒力无影响。该法操作简便快速,无需昂贵的仪器设备,具有较大的实用价值。 展开更多

关键词 弓形虫 速殖子 纯化 免疫磁珠分离

在线阅读 下载PDF 职称材料

一种玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒的研制 被引量：1

5

作者 刘玉梅 王兆芹 +6 位作者 贾芳芳 万宇平 杜美红 张瑜 冯月君 张颖 何方洋 《山东畜牧兽医》 2019年第2期1-3,共3页

通过玉米赤霉烯酮与对苯二胺反应,制备出玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中玉米赤霉烯酮的捕获量为50ng/ml,与玉米赤霉烯酮结构或者功能相似的竞争药物:黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、展青霉素等... 通过玉米赤霉烯酮与对苯二胺反应,制备出玉米赤霉烯酮免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中玉米赤霉烯酮的捕获量为50ng/ml,与玉米赤霉烯酮结构或者功能相似的竞争药物:黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、T-2毒素、赭曲霉毒素A、展青霉素等5种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 单克隆抗体 免疫磁珠分离富集试剂盒

在线阅读 下载PDF 职称材料

一种沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒的研制

6

作者 万宇平 吴小胜 +6 位作者 贾芳芳 李静 王兆芹 杜美红 栗冠媛 李萌 何方洋 《安徽农业科学》 CAS 2019年第3期137-139,共3页

通过沙丁胺醇与对氨基苯甲酸反应,制备出沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中沙丁胺醇的捕获量为20 ng/mL,与沙丁胺醇结构或者功能相似的竞争药物:克仑特罗、莱克多巴胺、苯乙醇胺A、溴氯布特罗、溴布特罗、特布他林、羟甲... 通过沙丁胺醇与对氨基苯甲酸反应,制备出沙丁胺醇免疫磁珠分离富集试剂盒,试剂盒对样品中沙丁胺醇的捕获量为20 ng/mL,与沙丁胺醇结构或者功能相似的竞争药物:克仑特罗、莱克多巴胺、苯乙醇胺A、溴氯布特罗、溴布特罗、特布他林、羟甲基沙丁胺醇、西马特罗、妥布特罗、马喷特罗、赛布特罗、克仑潘特、奇帕特罗、喷布特罗、克仑丙罗、马布特罗、氯丙那林等17种药物进行特异性反应时,均无交叉反应。 展开更多

关键词 沙丁胺醇 单克隆抗体 免疫磁珠分离富集试剂盒

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫磁珠分离技术联合流式细胞术检测ENU致大鼠体内Pig-a基因突变

7

作者 秦美蓉 郑丹丹 +3 位作者 黄泽愉 王晓炜 李俊鹏 王平 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期211-216,共6页

目的结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a基因突变试验方法。方法用20、40和80 mg/(kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(Nethyl-N-nitrosourea,ENU)连续3 d给予SD大... 目的结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a基因突变试验方法。方法用20、40和80 mg/(kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(Nethyl-N-nitrosourea,ENU)连续3 d给予SD大鼠,在染毒前、染毒后第7、14和28天分别采集大鼠外周血,经免疫磁性分离柱富集RET^(CD59-)和RBC^(CD59-),用流式细胞术分别对免疫磁珠分离柱前和柱后的外周血红细胞进行计数。结果与对照组相比,ENU各剂量组的RET^(CD59-)和RBC^(CD59-)发生率均显著升高(P<0.05);采用免疫磁珠分离技术后,可以在3 min内完成一个样品的Pig-a基因突变检测,分析的RET^(CD59-)或RBC^(CD59-)细胞数量分别最高可达2×10~4个或9×10~4个。结论本研究联合运用免疫磁珠分离术和流式细胞术,建立并优化了大鼠体内Pig-a基因突变试验方法,实现了高通量检测,提高了试验的准确性和效率。 展开更多

关键词 Pig-a基因突变 免疫磁珠分离 流式细胞术 N-乙基-N-亚硝基脲 大鼠 外周血红细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫磁分离-荧光PCR应用在肉类单增李斯特氏菌的检测 被引量：15

8

作者 翁文川 杨汝德 +3 位作者 焦红 胡锋科 许龙岩 凌莉 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期547-550,共4页

目的建立适用于肉类产品中单核增生李斯特氏菌的荧光PCR检测方法。方法根据单增李斯特氏菌溶血素基因hlyA,设计合成引物和荧光探针,结合免疫磁珠筛选,选择简便的DNA提取方法,建立适用于检测肉类制品中单增李斯特氏菌的荧光PCR方法。对... 目的建立适用于肉类产品中单核增生李斯特氏菌的荧光PCR检测方法。方法根据单增李斯特氏菌溶血素基因hlyA,设计合成引物和荧光探针,结合免疫磁珠筛选,选择简便的DNA提取方法,建立适用于检测肉类制品中单增李斯特氏菌的荧光PCR方法。对该方法进行特异性、灵敏度及模拟样品检测效果的研究。结果对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株,及混合菌液的检测,结果显示该方法具有良好的特异性。对染菌模拟样本的检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h。结论免疫磁分离荧光PCR方法为快速、简便和准确检测肉类制品中单增李斯氏菌提供了一个新的途径。 展开更多

关键词 单核增生李斯特氏菌 免疫磁珠分离 荧光PCR方法

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫磁珠结合RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒 被引量：7

9

作者 阚春月 衣杰荣 +2 位作者 王守法 于翠 杨翠云 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期43-47,共5页

以感染黄瓜绿斑驳花叶病毒的黄瓜种子为材料,建立了免疫磁珠结合RT-PCR直接检测种子携带病毒的高灵敏度方法。结果表明:当磁珠的包被单克隆抗体浓度为1.5×10^(-5)mg/mL时,可检测到的最低抗原浓度为7.813×10^(-3)mg/mL,相当于8... 以感染黄瓜绿斑驳花叶病毒的黄瓜种子为材料,建立了免疫磁珠结合RT-PCR直接检测种子携带病毒的高灵敏度方法。结果表明:当磁珠的包被单克隆抗体浓度为1.5×10^(-5)mg/mL时,可检测到的最低抗原浓度为7.813×10^(-3)mg/mL,相当于8 ng种子中的黄瓜绿斑驳花叶病毒。该方法的灵敏度比免疫捕获RT-PCR(IC-RT-PCR)的灵敏度高出8倍。 展开更多

关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 RT-PCR 免疫磁珠分离 免疫捕获 黄瓜种子

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸢尾黄斑病毒免疫磁珠RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：1

10

作者 代欢欢 崔全友 +3 位作者 宋绍祎 陶宇清 杨翠云 于翠 《上海农业学报》 CSCD 2016年第5期70-74,共5页

鸢尾黄斑病毒是近年新发现的番茄斑萎病毒属的一个种,目前国内还没有发生、危害的报道。试验以带有鸢尾黄斑病毒的烟草叶片为材料,建立了免疫磁珠RT-PCR高灵敏度的检测方法。通过抗体包被、吸附特异性及灵敏度比较等试验,确定了免疫磁... 鸢尾黄斑病毒是近年新发现的番茄斑萎病毒属的一个种,目前国内还没有发生、危害的报道。试验以带有鸢尾黄斑病毒的烟草叶片为材料,建立了免疫磁珠RT-PCR高灵敏度的检测方法。通过抗体包被、吸附特异性及灵敏度比较等试验,确定了免疫磁珠在样品处理中的作用。免疫磁珠RT-PCR方法最低可检测稀释至10^(-6)的病汁液,灵敏度比免疫捕获RT-PCR高10倍,比磁珠直接吸附RT-PCR高10~4倍。这一结果表明免疫磁珠用于样品处理,可大大增加病毒吸附效率,提高检测灵敏度。应用该方法检测进境葱类种子及田间大葱、洋葱等样品150份,结果均未检出。 展开更多

关键词 鸢尾黄斑病毒 免疫磁珠分离 RT-PCR 灵敏度

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫磁捕获-荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌 被引量：8

11

作者 杨小鹃 李海刚 +3 位作者 吴清平 张菊梅 陈玲 蔡淑珍 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期79-83,共5页

建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(Real-time PCR)技术准确、快速检测食品中沙门氏菌(Salmonella spp)的方法。采用亲和纯化的羊抗沙门氏菌抗体与Dynabeads M-280磁珠制备沙门氏菌免疫磁珠,优化反应条... 建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(Real-time PCR)技术准确、快速检测食品中沙门氏菌(Salmonella spp)的方法。采用亲和纯化的羊抗沙门氏菌抗体与Dynabeads M-280磁珠制备沙门氏菌免疫磁珠,优化反应条件,建立免疫磁珠分离方法。同时根据沙门氏菌特异性ttr基因,建立Real-time PCR体系,并检测其特异性及敏感性。结果显示,沙门氏菌可产生荧光信号,而其他细菌均未见明显荧光信号。利用所建立的免疫磁捕获-荧光定量PCR(IMS-real-time PCR)方法可以检测初始含菌量最低为6.5CFU/25g的食品样品,全过程需时约8h。150份实际食品样品中,IMS-real-time PCR方法检出27份阳性样品,免疫磁珠联合XLT4平板培养法检出18份阳性样品,传统国标法检出14份阳性样品。 展开更多

关键词 免疫磁珠分离 荧光定量PCR 沙门氏菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

免疫学方法在食源性副溶血性弧菌检测中的应用研究进展 被引量：8

12

作者 谢雪钦 刘舟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第13期299-305,共7页

副溶血性弧菌可污染以海产品为主的各类食品,其引发的食品安全事件数量已经跃升至我国食品中毒事件数首位。相对于传统培养法及现代分子检测技术,基于抗原-抗体特异性识别反应的免疫鉴定及分型策略在检测效率、特异性、现场适用性、前... 副溶血性弧菌可污染以海产品为主的各类食品,其引发的食品安全事件数量已经跃升至我国食品中毒事件数首位。相对于传统培养法及现代分子检测技术,基于抗原-抗体特异性识别反应的免疫鉴定及分型策略在检测效率、特异性、现场适用性、前处理简便性等诸多方面显现突出优势。本文在解析当前副溶血性弧菌抗体种类及制备方法的基础上,就免疫磁珠分离、酶联免疫吸附测定、免疫层析测试、免疫传感器、免疫荧光显微术等方法在食源性副溶血性弧菌检测中的应用现状进行综述,以期为该病原菌的快速检测提供借鉴和参考。 展开更多

关键词 食源性副溶血性弧菌 免疫磁珠分离 酶联免疫吸附测定 免疫层析测试 免疫传感器 免疫荧光显微术

在线阅读 下载PDF 职称材料

TGF-β_1和/或TNF-α反义PS-ODNS对造血干/祖细胞体外扩增的作用 被引量：3

13

作者 黄美娟 陈元仲 +2 位作者 吴勇 李乃农 张昭秀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1375-1378,共4页

目的 :研究TGF - β1和 /或TNF -α反义硫代寡核苷酸 (PS -ODNS)对造血干 /祖细胞体外扩增的调节作用。方法 :采用免疫磁珠分离技术从新鲜脐带血中分离CD3 4 + 细胞 ,用淋巴细胞分离液从骨髓血中分离单个核细胞 ,应用液体培养及造血祖... 目的 :研究TGF - β1和 /或TNF -α反义硫代寡核苷酸 (PS -ODNS)对造血干 /祖细胞体外扩增的调节作用。方法 :采用免疫磁珠分离技术从新鲜脐带血中分离CD3 4 + 细胞 ,用淋巴细胞分离液从骨髓血中分离单个核细胞 ,应用液体培养及造血祖细胞集落分析检测TGF - β1和 /或TNF -α反义PS -ODNS对CD3 4 + 细胞数及多向性造血祖细胞 (CFU -mix)、粒 -单祖细胞 (CFU -GM)、红系祖细胞 (BFU -E和CFU -E)集落数的影响。结果 :培养体系中加入TGF - β1反义PS -ODNS后CD3 4 + 细胞数、CFU -mix、CFU -GM、BFU -E和CFU -E集落数分别是对照组 (仅加细胞因子组 )的 4、2 6、2 7、1 8、2 1倍 ;加入TNF -α反义PS -ODNS后CD3 4 + 细胞数、CFU -mix、CFU -GM、BFU -E和CFU -E集落数分别是对照组的 4、2 9、2 6、1 7、1 8倍 ;同时加入TGF - β1和TNF -α反义PS -ODNS后CD3 4 + 细胞数、CFU -mix、CFU -GM、BFU -E和CFU -E集落数分别是对照组的 5 3、2 1、2 7、1 9、1 8倍。结论 :采用反义PS -ODNS阻断内源性TGF - β1和TNF -α是造血干 /祖细胞体外扩增的有效措施之一。 展开更多

关键词 转化生长因子Β 肿瘤坏死因子 反义寡核苷酸类 造血干细胞 免疫磁珠分离技术 肿瘤治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同来源的人CD34^+造血细胞形态学与细胞化学研究 被引量：4

14

作者 熊玉宁 杨科 +1 位作者 刘抗援 王景文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1059-1059,1080,共2页

目的 :探讨不同来源的人CD34 + 造血细胞形态学与细胞化学。方法 :采用CD34MultisortKit免疫磁珠分离系统 ,分离纯化出CD34 + 造血细胞 ,流式细胞仪检测纯度 ,涂片进行瑞氏 -姬姆萨染色。观察细胞形态学 :细胞化学染色观察过氧化物酶 (P... 目的 :探讨不同来源的人CD34 + 造血细胞形态学与细胞化学。方法 :采用CD34MultisortKit免疫磁珠分离系统 ,分离纯化出CD34 + 造血细胞 ,流式细胞仪检测纯度 ,涂片进行瑞氏 -姬姆萨染色。观察细胞形态学 :细胞化学染色观察过氧化物酶 (POX)、糖原 (PAS)、苏丹黑 (SB)及萘酚AS -D氯乙酸酯酶 (CE)。结果 :CD34 + 造血细胞的纯度≥ 98.8%,形态大小略大于正常淋巴细胞 ,PAS、CE、SB及POX均呈阴性。结论 :不同来源的人CD34 + 造血细胞形态学与细胞化学相似。 展开更多

关键词 造血干细胞 组织细胞化学 CD34^+ 免疫磁珠分离系统

在线阅读 下载PDF 职称材料

双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞 被引量：12

15

作者 慕宁 高毅 唐力军 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期535-537,共3页

目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式... 目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式细胞术鉴定分选后细胞纯度;对传代到不同阶段的细胞进行CD45、GlyA流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性.结果通过miniMACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml的MAPCs,分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;自制的培养基培养分选后的MAPCs生长良好,最长传代到第16代;流式细胞仪分析获取的CD45、G1yA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪分析传代第4、8、12代MAPCs,CD45-、G1yA-细胞纯度大于98%.结论CD45、GlyA miniMACS负分选可从骨髓中分离高纯度的MAPCs;MAPCs在本室自制的人MAPCs培养基中体外有较强的增殖能力,且能保持较长时间的稳定状态. 展开更多

关键词 人骨髓来源多能成体祖细胞 免疫磁珠分离法 分离纯化 细胞培养 流式细胞术

在线阅读 下载PDF 职称材料

IMS-FMO捕获及富集派琴虫方法的建立

16

作者 邓俊花 林祥梅 +2 位作者 冯春燕 王彩霞 吴绍强 《中国动物检疫》 CAS 2014年第6期84-88,共5页

目的派琴虫病是世界范围内的海洋贝类寄生虫病,现有的检测方法或敏感性低,或检测费用高、或操作困难,难以普及推广。本研究将建立一种新的贝类派琴虫免疫磁珠分离纯化检测方法。方法本研究方法包括四部分:(i)捕获;(ii)荧光显微镜观察;(i... 目的派琴虫病是世界范围内的海洋贝类寄生虫病,现有的检测方法或敏感性低,或检测费用高、或操作困难,难以普及推广。本研究将建立一种新的贝类派琴虫免疫磁珠分离纯化检测方法。方法本研究方法包括四部分:(i)捕获;(ii)荧光显微镜观察;(iii)富集;(iv)方法敏感性评价。结果本研究建立的派琴虫免疫磁珠分离纯化方法,检测派琴虫限度可达103个/mL,整个检测过程仅需1个小时,特异性良好。结论派琴虫免疫磁珠分离纯化方法将为水产品中派琴虫的检测提供一种快速简便的技术支持。 展开更多

关键词 奥尔森派琴虫 免疫磁珠分离 荧光显微观察 分析 检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

商丘市、济源市腹泻患者、家禽、家畜粪便中E.coli O157:H7的鉴定 被引量：2

17

作者 王殿法 陈福来 夏胜利 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第5期642-644,共3页

目的 :对商丘市、济源市从腹泻患者和家禽、家畜粪便中首次分离的E .coliO1 57:H7进行生物学特性等方面的研究。方法 :采集疫区患者、外环境、家畜和家禽粪便标本 1 895份 ,采用mEC肉汤增菌、胶体金免疫卡快速测定法、免疫磁珠集菌法、C... 目的 :对商丘市、济源市从腹泻患者和家禽、家畜粪便中首次分离的E .coliO1 57:H7进行生物学特性等方面的研究。方法 :采集疫区患者、外环境、家畜和家禽粪便标本 1 895份 ,采用mEC肉汤增菌、胶体金免疫卡快速测定法、免疫磁珠集菌法、CHROMAGAR O1 57:H7显色培养基分离及多重PCR分析毒力基因等方法进行病原菌的分离和检测。结果 :共分离出 1 37株E .coliO1 57:H7菌株 ,在CHROMAGAR O1 57:H7显色培养基生长形态、颜色 ,生化反应出现多样化 ,rfbO1 57、stx2、hlyA、eaeA基因检测均阳性的有 58株 ,stx2阳性 1株 ,eaeA阳性 4株 ,72株无毒力基因。结论 :为本省实验室诊断E .coliO1 57:H7提供了理论依据 ;不同种类的家禽、家畜分离的产毒菌株比例差别显著 ,以波尔山羊最为突出 ;为今后在制定对该菌的诊断标准。 展开更多

关键词 商丘市 鉴定 济源市 腹泻 E.coliO157:H7 多重PCR分析 毒力基因 免疫磁珠分离

在线阅读 下载PDF 职称材料

致病性大肠杆菌的流行及最新检测技术 被引量：1

18

作者 李志培 苗丽 《河南畜牧兽医》 2004年第5期8-9,共2页

致病性大肠杆菌特别是O157∶H7已成为世界性的传染病病原,是食品安全和公共卫生的重要监测对象之一。免疫磁珠分离技术是一项新的技术,可以特异性地、有效地分离出相应的O157和其它微生物及生物活性组分,提高检测的准确性和工作效率。

关键词 致病性大肠杆菌 流行特点 检测技术 免疫磁珠分离技术 大肠杆菌病

在线阅读 下载PDF 职称材料