检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

问号钩端螺旋体主要外膜蛋白免疫功能表位及其致炎作用的研究被引量：3: 1; 作者徐丽慧严杰 +1 位作者阮萍毛亚飞《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2005年第1期9-14,共6页; 目的 :了解问号钩端螺旋体 (简称钩体 )主要外膜蛋白 Omp L 1、Lip L 32和 L ip L 4 1免疫功能表位及其致炎作用。方法 :建立 Ni- NTA亲和层析法 ,提取不同基因型表达的目的重组蛋白 r Omp L1/ 1和 Omp L1/ 2、L ip L32 / 1和 r Lip L32... 展开更多; 关键词钩端螺旋体问号/致病力细菌外膜蛋白/致病力免疫显性表位/分析细胞因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗synuclein-γ单克隆抗体识别的抗原表位区域的确定: 2; 作者谢玮苏亚辉 +1 位作者刘彩云寿成超《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期361-367,共7页; 目的:确定已获得的多株抗突触蛋白γ(synulcein-γ,SNCG)单克隆抗体识别的抗原表位区域,为相关后续研究奠定基础。方法:分别构建谷胱甘肽疏基转移酶(GST)与SNCG不同截短体的表达载体并表达GST-SNCG截短体融合蛋白,采用ELISA和Western b... 展开更多; 关键词癌基因抗体单克隆免疫显性表位乳腺肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人HSP70融合基因的构建及原核表达: 3; 作者曲萍马加海 +4 位作者黄勇刘利兵铁茹刘芳娥黄小军《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期113-114,118,共3页; 目的:构建及原核表达肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人热休克蛋白70(HSP70)的融合基因。方法:采用加端PCR方法,将EPVTKAEML的基因序列融合到人HSP70基因的3′端;将融合基因克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/EPVTKAEML-H... 展开更多; 关键词肝肿瘤/免疫学抗原肿瘤/遗传学表位热休克蛋白类70/遗传学基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较被引量：9: 4; 作者孙爱华范兴丽 +3 位作者毛亚飞彭敏峰范春红严杰《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第1期67-72,共6页; 目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统。采用SDS-PAGE... 展开更多; 关键词酶联免疫吸附测定/方法梅毒密螺旋体苍白/免疫学敏感性与特异性基因表达抗原细菌/血液梅毒血清诊断/方法免疫显性表位/生物合成免疫显性表位/遗传学重组遗传; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名问号钩端螺旋体主要外膜蛋白免疫功能表位及其致炎作用的研究被引量：3: 1; 作者徐丽慧严杰阮萍毛亚飞; 机构浙江大学医学院病原生物学教研室绍兴文理学院医学院; 出处《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2005年第1期9-14,共6页; 基金国家自然科学基金项目 (39970 6 78); 文摘目的 :了解问号钩端螺旋体 (简称钩体 )主要外膜蛋白 Omp L 1、Lip L 32和 L ip L 4 1免疫功能表位及其致炎作用。方法 :建立 Ni- NTA亲和层析法 ,提取不同基因型表达的目的重组蛋白 r Omp L1/ 1和 Omp L1/ 2、L ip L32 / 1和 r Lip L32 / 2、Lip L4 1/ 1和 r Lip L4 1/ 2。采用 SDS- PAGE检测上述目的重组蛋白的表达情况和提取物纯度。分别采用 Signal P3.0预测服务器 Signal P- NN软件、Propred MHC class- binding peptide prediction- Pro Pred预测服务器 EMBOSS软件 ,对上述蛋白的信号肽、MHC- 类分子结合肽和 B细胞表位进行分析。以人脐静脉内皮细胞株EVC- 30 4为效应细胞 ,采用 EL ISA检测上述目的重组蛋白诱导人脐静脉内皮细胞 EVC- 30 4分泌 IL - 1、IL - 8和TNF- α的作用。结果 :在 IPTG诱导下 ,所构建的原核表达系统可有效表达 r Omp L1/ 1和 r Omp L1/ 2、r Lip L32 / 1和r Lip L32 / 2、r L ip L4 1/ 1和 r Lip L4 1/ 2 ,其产量分别约占细菌总蛋白的 30 %和 15 %、4 0 %和 35 %、15 %和 10 %。提纯后的目的重组蛋白 SDS- PAGE后均仅见单一的蛋白条带。Omp L1s、Lip L32 / 1和 Lip L32 / 2、Lip L4 1s的信号肽分别位于 N端 1- 2 4、1- 2 1和 1- 2 4、1- 2 4位氨基酸残基。 Omp L 1s。; 关键词钩端螺旋体问号/致病力细菌外膜蛋白/致病力免疫显性表位/分析细胞因子; Keywords Leptospira,interrogans/ pathogen Bacterial outer membrane proteins/pathogen Immunodominant/anal Cytokines; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗synuclein-γ单克隆抗体识别的抗原表位区域的确定: 2; 作者谢玮苏亚辉刘彩云寿成超; 机构北京大学临床肿瘤学院; 出处《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期361-367,共7页; 基金国家高技术研究发展计划(“863计划”2006AA02A249) 国家重点基础研究发展计划(“973计划”2009CB521800)项目~~; 文摘目的:确定已获得的多株抗突触蛋白γ(synulcein-γ,SNCG)单克隆抗体识别的抗原表位区域,为相关后续研究奠定基础。方法:分别构建谷胱甘肽疏基转移酶(GST)与SNCG不同截短体的表达载体并表达GST-SNCG截短体融合蛋白,采用ELISA和Western blot检测单抗与不同截短体融合蛋白的反应,推知不同单抗的抗原识别表位区域。依据推测的抗原识别表位的区域,构建并表达GST-表位小肽融合蛋白,并用相应单抗进行ELISA和Western blot检测,确定单抗的抗原表位区域。结果:确定了11株SNCG单抗的抗原识别表位区域,分别是9#、42#和3E4抗体的抗原表位位于SNCG第1到21位氨基酸,11#和22#抗体的抗原表位位于SNCG第78～92位氨基酸,1#、14#、18#、31#和36#抗体的抗原表位位于SNCG第93到110位氨基酸,6C8抗体的抗原表位位于SNCG第111～127位氨基酸。结论:确定了11株SNCG单抗的抗原识别表位区域,为SNCG的进一步研究和血清学检测奠定了基础。; 关键词癌基因抗体单克隆免疫显性表位乳腺肿瘤; Keywords Oncogenes Antibodies, monoclonal Immunodominant epitopes Breast neoplasms; 分类号 R730.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人HSP70融合基因的构建及原核表达: 3; 作者曲萍马加海黄勇刘利兵铁茹刘芳娥黄小军; 机构第四军医大学教学实验中心烟台毓璜顶医院麻醉科第四军医大学生物化学与分子生物学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期113-114,118,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目(30400167); 文摘目的:构建及原核表达肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人热休克蛋白70(HSP70)的融合基因。方法:采用加端PCR方法,将EPVTKAEML的基因序列融合到人HSP70基因的3′端;将融合基因克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/EPVTKAEML-HSP70。经限制性内切酶BamHI、XhoI双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE检测表达结果。结果:应用加端PCR方法扩增出约2.0kb的目的片段,序列测定结果证实,EPVTKAEML的基因序列成功地融合到人HSP70基因的3′端。经BamHI、XhoI酶切鉴定证实,融合基因成功地克隆到原核表达载体pET-28a(+)上;转入重组质粒的E.coliBL21(DE3)经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析发现在相对分子质量(Mr)约72000处有表达量明显增多的蛋白条带。结论:成功地构建并表达了肝癌抗原肽(EPVT-KAEML)与人HSP70的融合基因。; 关键词肝肿瘤/免疫学抗原肿瘤/遗传学表位热休克蛋白类70/遗传学基因表达; Keywords hepatoma/immunology antigen neoplasm/ genetics epitope heat-shock protein 70/genetics gene expression; 分类号 R73-3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较被引量：9: 4; 作者孙爱华范兴丽毛亚飞彭敏峰范春红严杰; 机构浙江医学高等专科学校浙江大学医学院病原生物学系杭州市中医院检验科; 出处《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第1期67-72,共6页; 基金浙江省医药卫生科研基金(2004A018); 文摘目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN17和rTpN47表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN17和rTpN47,Western blot检测rTpN17和rTpN47免疫反应性。分别以rTpN17和rTpN47为包被抗原,建立检测血清标本中梅毒抗体的ELISAs(rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA),检测200例健康人、25例类风湿关节炎(RA)和17例系统性红斑狼疮(SLE)患者血清样本,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体间接血凝试验(TPHA)检测效果进行比较。结果:克隆的tpn17和tpn47基因与GenBank中相关序列相似性为100%。rTpN17和rTpN47表达量分别为细菌总蛋白的37.2%和26.8%。提纯后的rTpN17和rTpN47能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应。TPHA检测阳性率最高(99.1%,P<0.001),rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率相近(85.3%和84.3%,P=0.427),TRUST检测阳性率低于rTpN17-ELISA(P=0.001),但与rTpN47-ELISA相近(P=0.014)。所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的rTpN17-ELISA、rTpN47-ELISA和TPHA检测结果均为阴性,但有7.1%(3/42)RA和SLE患者血清标本TRUST检测结果阳性。结论:以rTpN17和rTpN47为抗原的ELISAs可作为快速、简便、敏感性和特异性较高的梅毒血清学筛查方法,而且rTpN17和rTpN47仍保持原有免疫反应特异性。; 关键词酶联免疫吸附测定/方法梅毒密螺旋体苍白/免疫学敏感性与特异性基因表达抗原细菌/血液梅毒血清诊断/方法免疫显性表位/生物合成免疫显性表位/遗传学重组遗传; Keywords Enzyme-linked immunosorbent assay/methods Syphilis Treponema pallidum/immunol Sensitivity and specificity Gene expression Antigens, bacterial/ blood Syphilis serodiagnosis/methods Immunodominant epitopes/biosyn Immunodominant epitopes/genet Recombination,genetic; 分类号 R377 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	问号钩端螺旋体主要外膜蛋白免疫功能表位及其致炎作用的研究	徐丽慧严杰阮萍毛亚飞	《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗synuclein-γ单克隆抗体识别的抗原表位区域的确定	谢玮苏亚辉刘彩云寿成超	《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	肝癌抗原肽(EPVTKAEML)与人HSP70融合基因的构建及原核表达	曲萍马加海黄勇刘利兵铁茹刘芳娥黄小军	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较	孙爱华范兴丽毛亚飞彭敏峰范春红严杰	《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD	2008	9	在线阅读下载PDF 职称材料