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水稻黑条矮缩病病毒外壳蛋白基因S10的原核表达、多克隆抗体制备及应用被引量：19: 1; 作者欧阳元龙吴建祥 +2 位作者熊如意周益军周雪平《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-30,共6页; 用RT-PCR方法从感染水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)水稻中克隆该病毒的外壳蛋白基因S10,然后将此外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体PET-32a中构建成重组原核表达载体pET32a-CP。将重组表达载体转化大肠杆菌... 展开更多; 关键词水稻黑条矮缩病病毒原核表达多克隆抗体免疫捕获反转录聚合酶链式反应斑点酶联免疫吸附测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

建兰花叶病毒的分子生物学检测被引量：8: 2; 作者高焕利杨翠云 +1 位作者于翠马青《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期289-292,296,共5页; 根据建兰花叶病毒外壳蛋白基因的保守序列设计2对引物,采用IC-RT-PCR方法和质粒梯度稀释的方法,研究建兰花叶病毒的分子检测方法和灵敏度。结果表明,从21个建兰花叶病毒的病株样品中均能扩增出与预期大小相同的DNA条带,序列测定和序列... 展开更多; 关键词建兰花叶病毒(CyMV) 免疫捕获反转录聚合酶链式反应灵敏度检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种豇豆重花叶病毒IC-RT real-time PCR检测方法的建立被引量：3: 3; 作者李彬粟寒 +2 位作者吴翠萍周明华安榆林《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期491-496,共6页; 为建立豇豆重花叶病毒(Cowpeasevere mosaic virus,CPSMV)免疫捕获-反转录-实时荧光(IC-RTreal-time)PCR分子检测方法,利用从ATCC和DSMZ引进的CPSMV标准毒株,先建立CPSMVRTreal-time PCR检测方法;在此基础上,建立用于CPSMV检测的IC-RTre... 展开更多; 关键词豇豆重花叶病毒免疫捕获反转录实时荧光PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

豇豆花叶病毒和黑眼豇豆花叶病毒RT-Realtime PCR及IC-RT-Realtime PCR检测方法研究被引量：3: 4; 作者李彬粟寒 +3 位作者李艳华缪爱斌吴翠萍安榆林《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期105-109,共5页; 建立了豇豆两种种传病毒豇豆花叶病毒(CPMV)和黑眼豇豆花叶病毒(BlCMV)RT-Realtime PCR检测方法以及双重RT-Realtime PCR检测方法。在此基础上,根据免疫学抗原抗体特异性吸附的特点,建立了CPMV和BlCMV免疫捕获反转录荧光定量(IC-RT-Real... 展开更多; 关键词豇豆花叶病毒黑眼豇豆花叶病毒免疫捕获反转录实时荧光PCR 双重反转录实时荧光PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

高粱红条病病原的分子鉴定被引量：5: 5; 作者蒋军喜周雪平石银鹿《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期255-259,共5页; 从山西高粱红条病病叶中得到一种病毒分离物 ,命名为 GL- SX。根据甘蔗花叶病毒亚组(SCMV subgroup)外壳蛋白 (CP)基因 C-端和复制酶 (NIb)基因 C-端的保守序列设计引物 ,对 GL - SX进行免疫捕获反转录 PCR (IC- RT- PCR)扩增 ,获得一... 展开更多; 关键词高梁红条病病原分子鉴定免疫捕获反转录PCR 甘蔗花叶病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水稻黑条矮缩病病毒外壳蛋白基因S10的原核表达、多克隆抗体制备及应用被引量：19: 1; 作者欧阳元龙吴建祥熊如意周益军周雪平; 机构南京师范大学生命科学学院浙江大学农业与生物技术学院生物技术研究所江苏省农业科学院植物保护研究所; 出处《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-30,共6页; 基金农业部公益性行业(农业)科研专项资助项目(nyhyzx07-051) 现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目国家自然科学基金资助项目(30670087); 文摘用RT-PCR方法从感染水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)水稻中克隆该病毒的外壳蛋白基因S10,然后将此外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体PET-32a中构建成重组原核表达载体pET32a-CP。将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni+ NTA亲和柱纯化获得分子量约为76kD含硫氧还蛋白的融合蛋白。以纯化的重组蛋白为抗原免疫兔子制备RBSDV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多克隆抗体建立了可靠、灵敏、特异的检测RBSDV的免疫捕获RT-PCR及Dot-blot ELISA方法,为该水稻病毒病的诊断提供技术支持。; 关键词水稻黑条矮缩病病毒原核表达多克隆抗体免疫捕获反转录聚合酶链式反应斑点酶联免疫吸附测定; Keywords rice black-streaked dwarf virus prokaryotic expression polyclonal antibody immunocapture RT-PCR dot-blot ELISA; 分类号 S435.111.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名建兰花叶病毒的分子生物学检测被引量：8: 2; 作者高焕利杨翠云于翠马青; 机构西北农林科技大学植保学院上海出入境检验检疫局; 出处《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期289-292,296,共5页; 基金上海市科委技术标准专项项目(04DZ05064) 教育部长江学者和创新团队发展计划项目(No.200558); 文摘根据建兰花叶病毒外壳蛋白基因的保守序列设计2对引物,采用IC-RT-PCR方法和质粒梯度稀释的方法,研究建兰花叶病毒的分子检测方法和灵敏度。结果表明,从21个建兰花叶病毒的病株样品中均能扩增出与预期大小相同的DNA条带,序列测定和序列同源性分析表明所测定的序列均为CyMV外壳蛋白基因的部分序列,序列同源性均达到89%以上;灵敏度检测结果表明:可检测的最低病毒含量为2.72×10-7μg/mL。; 关键词建兰花叶病毒(CyMV) 免疫捕获反转录聚合酶链式反应灵敏度检测; Keywords Cymbidium mosaic virus （CyMV） IC-RT-PCR Sensitivity; 分类号 S436.8 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种豇豆重花叶病毒IC-RT real-time PCR检测方法的建立被引量：3: 3; 作者李彬粟寒吴翠萍周明华安榆林; 机构江苏出入境检验检疫局; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期491-496,共6页; 基金江苏出入境检验检疫局科研项目(2006KJ35); 文摘为建立豇豆重花叶病毒(Cowpeasevere mosaic virus,CPSMV)免疫捕获-反转录-实时荧光(IC-RTreal-time)PCR分子检测方法,利用从ATCC和DSMZ引进的CPSMV标准毒株,先建立CPSMVRTreal-time PCR检测方法;在此基础上,建立用于CPSMV检测的IC-RTreal-time PCR方法.结果表明:IC-RTreal-time PCR方法的灵敏度可达500 pg叶组织;该方法具有特异性好、灵敏度高、操作简便等优点,省去了RNA的提取过程,适用于豇豆等豆类种子及种苗中对豇豆重花叶病毒的快速检测.; 关键词豇豆重花叶病毒免疫捕获反转录实时荧光PCR; Keywords Cowpea severe mosaic virus immuno-capture reverse transcript real-time PCR）; 分类号 S41-31 [农业科学—植物保护] S643.4 [农业科学—蔬菜学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名豇豆花叶病毒和黑眼豇豆花叶病毒RT-Realtime PCR及IC-RT-Realtime PCR检测方法研究被引量：3: 4; 作者李彬粟寒李艳华缪爱斌吴翠萍安榆林; 机构江苏出入境检验检疫局无锡出入境检验检疫局南京出入境检验检疫局; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期105-109,共5页; 基金江苏检验检疫局科研项目(2006KJ35); 文摘建立了豇豆两种种传病毒豇豆花叶病毒(CPMV)和黑眼豇豆花叶病毒(BlCMV)RT-Realtime PCR检测方法以及双重RT-Realtime PCR检测方法。在此基础上,根据免疫学抗原抗体特异性吸附的特点,建立了CPMV和BlCMV免疫捕获反转录荧光定量(IC-RT-Realtime)PCR检测方法以及双重IC-RT-Realtime PCR检测方法。该单重及双重IC-RT-Real-time PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点,适用于豆类种苗中对CPMV和BlCMV的检测。; 关键词豇豆花叶病毒黑眼豇豆花叶病毒免疫捕获反转录实时荧光PCR 双重反转录实时荧光PCR; Keywords Cowpea mosaic virus Blackeye cowpea mosaic virus IC-RT-Realtime PCR dual IC-RT-Realtime PCR; 分类号 S436.43 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高粱红条病病原的分子鉴定被引量：5: 5; 作者蒋军喜周雪平石银鹿; 机构浙江大学生物技术研究所山西农业科学院植物保护研究所; 出处《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期255-259,共5页; 基金国家杰出青年科学基金资助项目 (30 12 5 0 32 ); 文摘从山西高粱红条病病叶中得到一种病毒分离物 ,命名为 GL- SX。根据甘蔗花叶病毒亚组(SCMV subgroup)外壳蛋白 (CP)基因 C-端和复制酶 (NIb)基因 C-端的保守序列设计引物 ,对 GL - SX进行免疫捕获反转录 PCR (IC- RT- PCR)扩增 ,获得一条长约 1.1kb的扩增片段 ,扩增片段克隆后测定序列 ,该序列含 10 87个核苷酸 (nt) ,编码 36 2氨基酸 (aa) ,取其中的近全长 CP氨基酸序列 (2 96 aa)与甘蔗花叶病毒 (Sugarcane mosaic virus,SCMV)、玉米矮花叶病毒 (Maize dwarf mosaic virus,MDMV)、高粱花叶病毒 (Sorghum mosaic virus,Sr MV)和约翰逊草花叶病毒 (Johnsongrass mosaicvirus,JGMV)等 4种病毒的对应序列进行同源性比较 ,结果与 SCMV的同源性最高 (95 .3% ) ,而与Sr MV、MDMV和 JGMV等 3种病毒的同源性相对较低 ,依次为 6 9.3%、6 9.1%和 5 5 .4 %。根据Potyvirus属病毒种类划分的标准 ,将 GL - SX鉴定为 SCMV。将 GL- SX的近全长 CP氨基酸序列与SCMV种内各分离物的对应序列进行同源性比较及构建关系树 ,结果显示 GL- SX与 SCMV- MDB具有较远缘的种内亲缘关系 ,而与德国的一个 SCMV玉米分离物 (SCVM- Hoe)及中国的两个玉米分离物(SCMV- ZJ和 SCMV- BJ); 关键词高梁红条病病原分子鉴定免疫捕获反转录PCR 甘蔗花叶病毒; Keywords sorghum red stripe disease identification immunocaptrue reverse transcription PCR (IC RT PCR) Sugarcane mosaic virus; 分类号 S435.14 [农业科学—农业昆虫与害虫防治] S432.41 [农业科学—植物病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	水稻黑条矮缩病病毒外壳蛋白基因S10的原核表达、多克隆抗体制备及应用	欧阳元龙吴建祥熊如意周益军周雪平	《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心	2010	19	在线阅读下载PDF 职称材料
2	建兰花叶病毒的分子生物学检测	高焕利杨翠云于翠马青	《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	8	在线阅读下载PDF 职称材料
3	一种豇豆重花叶病毒IC-RT real-time PCR检测方法的建立	李彬粟寒吴翠萍周明华安榆林	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	豇豆花叶病毒和黑眼豇豆花叶病毒RT-Realtime PCR及IC-RT-Realtime PCR检测方法研究	李彬粟寒李艳华缪爱斌吴翠萍安榆林	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	高粱红条病病原的分子鉴定	蒋军喜周雪平石银鹿	《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	5	在线阅读下载PDF 职称材料