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兔出血症病毒胶体金免疫层析试纸条诊断方法的建立及初步应用 被引量:18
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作者 蔡少平 王芳 +6 位作者 贾华敏 张海彬 李超美 范志宇 胡波 熊富强 魏后军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1795-1801,共7页
为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素... 为了建立一种快速、简便的兔出血症病毒(RHDV)的检测方法,用胶体金标记纯化的RHDV多克隆抗体,以杆状病毒表达系统表达的重组RHDV VP60蛋白为免疫原制备RHDV的单克隆抗体(McAb,简称单抗)A3C,将RHDV McAb和羊抗兔IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线,经条件优化研制成RHDV免疫胶体金试纸条。该试纸条可以检出红细胞凝集试验(HA)效价为1∶10的RHDV悬液,即HA检测为阴性的样品,该试纸条检测为阳性,其敏感性高于HA;特异性试验结果显示,该试纸条不与家兔其他常见病菌发生交叉反应。应用该试纸条对127份疑似兔出血症家兔肝脏样品进行初步检测,同时用HA做平行试验,阳性符合率为100%。因此,该试纸条是一种快速、灵敏、特异的兔出血症病毒检测方法,为兔出血症的现场诊断提供了有效的方法,显示出很好的临床应用前景。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 VP60蛋白 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 红细胞凝集试验
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霍乱弧菌O139胶体金免疫层析快速检测法的建立 被引量:5
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作者 王玉金 杨书豪 +3 位作者 刘丽 庞向宇 孙晨阳 李珊珊 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1126-1129,共4页
目的建立一种快速、简易的检测霍乱弧菌O139群的胶体金免疫层析法(GICA)。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测霍乱弧菌O139群,对该法进行敏感性、特异性和稳定性分析。与细菌培养法对比检测184份临床标本。结果该法能在10... 目的建立一种快速、简易的检测霍乱弧菌O139群的胶体金免疫层析法(GICA)。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测霍乱弧菌O139群,对该法进行敏感性、特异性和稳定性分析。与细菌培养法对比检测184份临床标本。结果该法能在10min内完成检测;该试纸条仅与霍乱弧菌O139群阳性样品发生特异性反应;检测霍乱弧菌O139群的最低检出浓度为1×105cfu/mL;与细菌培养法对比检测184份临床标本,特异性和灵敏度均达100%。结论新建立的霍乱弧菌O139群胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。 展开更多
关键词 霍乱弧菌O139群 胶体金 免疫层析试验 快速筛查
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氯霉素单克隆抗体免疫金标快速检测试纸的研制及性能测定 被引量:13
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作者 王自良 张改平 +4 位作者 杨艳艳 张海棠 杨继飞 刑广旭 柴书军 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第5期127-131,共5页
以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测... 以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应为160%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;10 min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合CAP残留快速检测的推广应用。 展开更多
关键词 氯霉素 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
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免疫胶体金标记技术及其在植物保护上的应用前景 被引量:13
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作者 王清 吴振廷 +3 位作者 王学林 唐庆峰 金涛 林华峰 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2005年第3期485-487,共3页
综述了胶体金制备、质量鉴定方法 ,胶体金探针的制备、纯化方法 ,以膜为固相载体的免疫胶体金快速试验即免疫层析和免疫渗滤试验技术 ,以及免疫胶体金标记技术在植物保护研究领域中的应用前景。
关键词 免疫胶体金 免疫层析试验 斑点免疫渗滤试验 植物保护
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高亲和力克伦特罗单克隆抗体的研制及免疫试纸检测方法的建立 被引量:3
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作者 张海棠 王自良 +2 位作者 刘玺 钟华 范国英 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第5期149-153,共5页
重氮化法将克伦特罗(CL)偶联于BSA合成免疫抗原BSA-CL,戊二醛法(GA)合成包被抗原OVA-CL,用BSA-CL免疫Balb/C小鼠。细胞融合技术建立高亲和力CL单克隆抗体(CLmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CLmAb,并测定其亲和性。依据胶体金免疫... 重氮化法将克伦特罗(CL)偶联于BSA合成免疫抗原BSA-CL,戊二醛法(GA)合成包被抗原OVA-CL,用BSA-CL免疫Balb/C小鼠。细胞融合技术建立高亲和力CL单克隆抗体(CLmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CLmAb,并测定其亲和性。依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,应用CLmAb研制CL残留快速检测免疫试纸(CL-Strip),并测定其性能。结果表明,筛选出16株杂交瘤细胞,其中亲和力最高的为3C12-6H6,亲和常数(Ka)为1.76×1010L/mol。CL-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒和GC/MS相当,符合率为100%。CL-Strip具有具有敏感、特异、快速、简便的特点,可推广应用于CL残留的快速检测。 展开更多
关键词 克伦特罗 细胞融合 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
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抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立 被引量:11
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作者 王自良 王建华 +4 位作者 杨艳艳 杨继飞 张海棠 范国英 张改平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第5期6-12,共7页
以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-St... 以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1.84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0.88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 氯霉素 细胞融合 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
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链霉素快速检测试纸的研制及其性能测定 被引量:7
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作者 范国英 陈永耀 +4 位作者 王顺岗 杨艳艳 邓润广 杨继飞 张改平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期40-44,共5页
以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定。结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;... 以分泌抗链霉素(SM)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析技术成功研制出SM残留快速检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性、符合性等特性进行了测定。结果表明,检测试纸的检测限为8μg/L;检测上线为100μg/L;与双氢链霉素的交叉反应为100%,与其他抗生素类药无交叉反应;其敏感性与ELISA试剂盒相当,与ELISA试剂盒的检测结果符合率为100%;检测试纸在10 min内显示结果。 展开更多
关键词 链霉素 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸条
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对奶牛布鲁菌病的监测方法探讨 被引量:1
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作者 胡涛 《当代畜禽养殖业》 2022年第4期32-33,共2页
本文主要探讨奶牛场布鲁菌病(简称布病)的最佳检测方法。针对血清学检测方法因奶牛较难保定、采血困难以及基层防疫人员采血技术不到位等问题,采用奶样抗体检测方法高效便捷,而全乳环状试验(MRT)和胶体金免疫层析试验(GICA)更适合奶牛... 本文主要探讨奶牛场布鲁菌病(简称布病)的最佳检测方法。针对血清学检测方法因奶牛较难保定、采血困难以及基层防疫人员采血技术不到位等问题,采用奶样抗体检测方法高效便捷,而全乳环状试验(MRT)和胶体金免疫层析试验(GICA)更适合奶牛布病监测的初筛试验。 展开更多
关键词 奶牛 布病 全乳环状试验 胶体金免疫层析试验
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不同血清学方法在奶山羊布鲁氏菌病诊断中的比较分析 被引量:12
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作者 白鸽 王国超 +5 位作者 陈茹 庄安宁 王靖 韦唯 秦鸽鸽 吴奇强 《动物医学进展》 北大核心 2022年第12期121-124,共4页
布鲁氏菌病(简称布病)是一种危害畜牧业的主要人兽共患传染病,为了选择适合基层奶山羊布病监测净化实际的快捷准确血清学检测方法,以便基层做好布病监测和净化工作。采用虎红平板凝集试验(RBT)、免疫胶体金层析试验(GICA)、间接酶联免... 布鲁氏菌病(简称布病)是一种危害畜牧业的主要人兽共患传染病,为了选择适合基层奶山羊布病监测净化实际的快捷准确血清学检测方法,以便基层做好布病监测和净化工作。采用虎红平板凝集试验(RBT)、免疫胶体金层析试验(GICA)、间接酶联免疫吸附试验(i-ELISA)、试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(c-ELISA)对479份奶山羊血清样品进行布病检测,分析、评价不同检测方法的敏感性、特异性、符合率、Kappa值等指标。以SAT作为判定标准,c-ELISA的敏感性、特异性、符合率、假阳性率、假阴性率及Kappa检验一致性均为最好;GICA的特异性、假阳性率和符合率最差,敏感性较高;i-ELISA敏感性最差,但符合率均在95%以上,Kappa值均≥0.75,一致性较为理想。5种检测方法在奶山羊布病诊断中均有重要价值,各检测方法在敏感性、特异性、操作便捷程度、成本及检测条件要求等各方面都有优缺点。因此,基层奶山羊布病监测净化过程中对于诊断方法的选择,要结合工作实际,推荐RBT或GICA初筛,c-ELISA复核确诊,通过2种及以上方法联合诊断较为理想。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 虎红平板凝集试验 免疫胶体金层析试验 酶联免疫吸附试验 试管凝集试验
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