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A型塞内卡病毒抗体检测胶体金免疫层析试纸条的制备及初步应用
1
作者 李帅鹏 石正旺 +9 位作者 陈婕 罗俊聪 朱昱茜 石鑫泰 席韬 张帆 何印娣 郑海学 张小丽 田宏 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4086-4094,共9页
本研究拟建立一种快速、准确、简便的A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体胶体金检测方法,用于SVA的感染诊断。通过原核系统表达纯化获得SVA VP2重组蛋白,并制备VP2蛋白多克隆抗体;将VP2蛋白与胶体金偶联形成金标抗原。随后,将VP2蛋白... 本研究拟建立一种快速、准确、简便的A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体胶体金检测方法,用于SVA的感染诊断。通过原核系统表达纯化获得SVA VP2重组蛋白,并制备VP2蛋白多克隆抗体;将VP2蛋白与胶体金偶联形成金标抗原。随后,将VP2蛋白和VP2多克隆抗体分别包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上作为检测线(T线)和质控线(C线),优化反应体系制备试纸条。结果表明,制备的试纸条检测口蹄疫病毒O型、口蹄疫病毒A型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、非洲猪瘟病毒阳性血清及健康猪(SPF)血清时,均无交叉反应,特异性良好;对SVA阳性血清的检测灵敏度达1∶64,通过对150份猪临床血清样品进行试纸条和病毒中和试验的平行检测,两者的Kappa值为0.88,表明两种方法高度一致。综上所述,本研究成功开发了SVA抗体检测试纸条,可在10~15 min内完成检测,具有快速、准确、简便等优点,为临床定性检测及现场快速诊断塞内卡病毒病提供了有效工具。 展开更多
关键词 塞内卡病毒抗体 VP2蛋白 胶体金免疫层析试纸条
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金纳米花免疫层析试纸条检测玉米中的呕吐毒素
2
作者 王志华 赵一鸣 +4 位作者 任文洁 王玉龙 李一帆 曾峻涛 何保山 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第2期293-299,共7页
呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)对人类和动物的健康以及食品经济构成了极大的威胁。该研究建立一种基于金纳米花(gold nanoflowers,AuNFs)的免疫层析试纸条(immunochromatographic test strip,ICTS)快速检测玉米中的呕吐毒素的方法。采... 呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)对人类和动物的健康以及食品经济构成了极大的威胁。该研究建立一种基于金纳米花(gold nanoflowers,AuNFs)的免疫层析试纸条(immunochromatographic test strip,ICTS)快速检测玉米中的呕吐毒素的方法。采用种子生长法制备了AuNFs,将其与抗DON单克隆抗体结合制备免疫层析试纸条中的金标探针,并对pH值、抗体量、上样缓冲液浓度、检测线(test-line,T线)浓度和金标探针量进行优化,最终用于玉米中的DON检测。经过优化实验条件,确定了最优pH值为7.5,最佳抗体添加量为1μL,最适上样缓冲液浓度为PBST+1%PVP K30,最好的T线质量浓度为0.1 mg/mL以及最佳探针量为3μL。在最优反应体系下,实验结果可以通过肉眼观察进行定性分析,该方法检出限为20μg/kg,灵敏度≥99%、假阳性率≤1%、假阴性率≤1%,且与现有标准方法检测结果一致,同时与其他真菌毒素无交叉反应。以AuNFs标记抗体为探针制备的ICTS灵敏度高,特异性强,可以实现玉米中DON的快速检测。 展开更多
关键词 金纳米花 种子生长法 免疫层析试纸条 快速检测 呕吐毒素
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Eu-TRFM免疫层析试纸条检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
3
作者 冯昭仪 吴娅芳 +4 位作者 王英林 赵思远 程家洛 郭旭东 刘箐 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期163-172,共10页
【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠... 【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠杆菌O157:H7。通过对缓冲液的标记pH、时间分辨荧光微球探针添加量、T线抗体质量浓度以及样本与标记抗体的孵育时间进行优化来提高检测灵敏度。【结果】在最优条件下,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度可达3.2×10^(3)CFU/mL,比传统胶体金免疫层析方法提高了10~1000倍,并且与其他8株常见的食源性致病菌不存在交叉反应。另外,该方法在人工污染的饮用水、牛奶和牛肉实际样品检测中均表现出良好的检测性能。【结论】该Eu-TRFM免疫层析试纸条适用于大肠杆菌O157:H7的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 时间分辨荧光微球 免疫层析试纸条 检测
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胶体金免疫层析试纸条在生物毒素检测领域的研究进展 被引量：5
4
作者 闫海兴 袁子钦 +5 位作者 袁嘉康 李梦迪 张超伟 侯洁 覃婷 王自良 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第5期134-140,共7页
胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原(抗体)与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗... 胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原(抗体)与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗体制备、试纸条组装步骤。胶体金免疫层析试纸条可以用于快速检测食品中的毒素残留、环境中的有害物质以及临床诊断中的相关指标。该技术具有无创、快速、灵敏和准确的特点,在临床应急检测和大规模筛查中能快速获得结果。文章总结了胶体金免疫层析试纸条技术及其在生物毒素检测中的研究进展,并分析了当前胶体金免疫层析试纸条技术的优缺点,展望了该技术在生物毒素检测领域的未来发展方向。 展开更多
关键词 胶体金免疫层析试纸条 生物毒素 快速检测 灵敏 准确
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时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用 被引量：19
5
作者 李静 李培武 +3 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期256-262,共7页
采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品... 采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。 展开更多
关键词 油料饼粕 黄曲霉毒素B1 时间分辨荧光免疫层析试纸条 时间分辨荧光速测仪 定量检测
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胶体金免疫层析试纸条定量检测猪尿中克伦特罗 被引量：20
6
作者 李超辉 罗薇 +3 位作者 徐波 刘文娟 许恒毅 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期114-118,共5页
目的:建立胶体金免疫层析试纸条快速、定量检测尿样中克伦特罗的方法。方法:采用正交设计获得克伦特罗胶体金试纸条最佳工艺条件,建立T/C比值法定量检测尿样中克伦特罗残留。结果:胶体金免疫层析试纸条检测尿样中克伦特罗的最低检测限0.... 目的:建立胶体金免疫层析试纸条快速、定量检测尿样中克伦特罗的方法。方法:采用正交设计获得克伦特罗胶体金试纸条最佳工艺条件,建立T/C比值法定量检测尿样中克伦特罗残留。结果:胶体金免疫层析试纸条检测尿样中克伦特罗的最低检测限0.22ng/mL;当尿液中克伦特罗质量浓度在0.1～2.0ng/mL范围内,胶体金免疫层析试纸条具有较好的线性关系且50%抑制质量浓度(IC50)为0.36ng/mL;加标回收实验结果表明,阴性尿样分别添加0.5、1.0、1.5ng/mL克伦特罗,试纸条检测的平均回收率为(102.4±7.8)%、(96.5±6.8)%以及(103.3±7.2)%。结论:成功建立了基于胶体金免疫层析试纸条定量检测尿样中克伦特罗的方法。 展开更多
关键词 免疫层析试纸条 克伦特罗 定量检测
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量子点标记免疫层析试纸条快速检测莱克多巴胺的研究 被引量：19
7
作者 张国华 赖卫华 +1 位作者 熊勇华 陈媛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期254-257,共4页
本实验通过莱克多巴胺抗原抗体的制备、量子点的制备、试纸条的组装和测试等步骤研究一种将量子点应用于莱克多巴胺免疫层析试纸条的新方法。结果表明,莱克多巴胺快速检测试纸条的检测限为3ng/ml,检测时间为10min。本法使用方便、经济,... 本实验通过莱克多巴胺抗原抗体的制备、量子点的制备、试纸条的组装和测试等步骤研究一种将量子点应用于莱克多巴胺免疫层析试纸条的新方法。结果表明,莱克多巴胺快速检测试纸条的检测限为3ng/ml,检测时间为10min。本法使用方便、经济,适合于莱克多巴胺现场快速检测。 展开更多
关键词 莱克多巴胺 量子点 免疫层析试纸条
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免疫层析试纸条技术及其在食源性致病菌检测中应用的研究进展 被引量：18
8
作者 李怀明 许恒毅 熊勇华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第17期380-383,共4页
食源性致病菌是引起食物中毒的最主要原因之一,全球每年由其引发的食物中毒事件达上亿例。免疫层析试纸条法是一种简便、快速且价格低廉的检测方法,广泛应用于国内基层单位对食源性致病菌现场快速检测及诊断。本文就其在食源性致病菌检... 食源性致病菌是引起食物中毒的最主要原因之一,全球每年由其引发的食物中毒事件达上亿例。免疫层析试纸条法是一种简便、快速且价格低廉的检测方法,广泛应用于国内基层单位对食源性致病菌现场快速检测及诊断。本文就其在食源性致病菌检测方面的研究现状及发展方向进行综述。 展开更多
关键词 免疫层析试纸条 食源性致病菌 食物中毒 快速检测
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免疫层析试纸条诊断旋毛虫病的研究 被引量：15
9
作者 秦银霞 崔晶 王中全 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期866-868,共3页
目的建立一种能诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条(immunochromatographic strip),对旋毛虫病及其它寄生虫病患者血清、旋毛虫及其它寄生虫感染的动物血清... 目的建立一种能诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条(immunochromatographic strip),对旋毛虫病及其它寄生虫病患者血清、旋毛虫及其它寄生虫感染的动物血清进行检测。结果试纸条检测旋毛虫病患者与旋毛虫感染的小鼠、大鼠、兔、猪血清的阳性率分别为100%(20/20)、97.87%(92/94)、100%(5/5)、100%(5/5)及100%(25/25),15min内肉眼可观察结果;其它寄生虫病(并殖吸虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、囊虫病及包虫病等)患者及正常人血清、其它寄生虫感染动物及正常动物血清均为阴性。试纸条和ELISA对100条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率分别为91.3%(21/23)和95.7%(22/23)(χ2=0.36,P>0.05),两种方法对200～500条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率均为100%(71/71)。试纸条对乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠血清检测的阳性率亦均为100%。试纸条在4℃可保存13个月,检测结果在室温可保存3个月。结论该试纸条可用于人体旋毛虫病和动物旋毛虫感染的快速血清学诊断,也可用于其它种旋毛虫感染的血清流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫 旋毛虫病 免疫层析试纸条 血清学诊断
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CdTe量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗 被引量：6
10
作者 张金艳 熊艳 +4 位作者 廖且根 李伟红 王冬根 张莉 罗林广 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第22期161-164,共4页
以巯基乙酸作为稳定剂,利用水热反应制备了水溶性的高荧光Cd Te量子点,量子产率为54.961%。研究了该量子点在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的作用下与抗克伦特罗抗体的共价连接。结果表明:该量子点与克伦... 以巯基乙酸作为稳定剂,利用水热反应制备了水溶性的高荧光Cd Te量子点,量子产率为54.961%。研究了该量子点在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的作用下与抗克伦特罗抗体的共价连接。结果表明:该量子点与克伦特罗抗体连接后体系的荧光强度和吸光度均增强,且峰位均未发生明显移动,F/P值为4.20。将该偶联反应物Cd Te-Anti CLE p Ab作为荧光标记物,组装出一种用于检测克伦特罗的荧光免疫试纸条,最低检测限达0.5μg/L,与酶联免疫吸附法进行对比,该试纸条能够实现对克伦特罗的快速检测。 展开更多
关键词 水热合成 CDTE量子点 克伦特罗 免疫层析试纸条
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沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条的研制与应用 被引量：11
11
作者 彭喆 王莉莉 +7 位作者 朱晓琳 时建立 韩红 刘畅 徐胜男 张玲玲 李俊 黄保华 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第12期54-59,共6页
本试验目的为提供一种食品中国家强制检验的沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条,并对购自超市和农贸市场的肉蛋进行检测。该试纸条由吸收垫、样品垫、偶联垫和硝酸纤维素膜等组成,包被对照线和检测线,以及喷涂于偶联垫上的金标沙门氏菌多抗... 本试验目的为提供一种食品中国家强制检验的沙门氏菌胶体金免疫层析试纸条,并对购自超市和农贸市场的肉蛋进行检测。该试纸条由吸收垫、样品垫、偶联垫和硝酸纤维素膜等组成,包被对照线和检测线,以及喷涂于偶联垫上的金标沙门氏菌多抗组装建立。结果表明该试纸条对沙门氏菌的最低检测量为1.07×107 cfu/mL,检测时间仅需5~10min。该试纸条特异性强,重复性好,可在4℃或室温存放9个月,检测结果稳定。 展开更多
关键词 沙门氏菌 胶体金免疫层析试纸条 快速检测
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纺织品中镉的胶体金免疫层析试纸条快速检测法 被引量：7
12
作者 丁友超 何欢 +2 位作者 蔡建和 孙成 何重辉 《印染》 北大核心 2014年第20期43-47,共5页
基于重金属镉单克隆抗体,研制了一种能简便快速筛查和检测纺织样品中镉的胶体金免疫层析试纸,优化了确定试纸的监测条件,并阐述该试纸的灵敏度、特异性和稳定性。结果表明,该试纸对纺织品中总镉含量和汗液中可萃取镉含量的检测限分别达... 基于重金属镉单克隆抗体,研制了一种能简便快速筛查和检测纺织样品中镉的胶体金免疫层析试纸,优化了确定试纸的监测条件,并阐述该试纸的灵敏度、特异性和稳定性。结果表明,该试纸对纺织品中总镉含量和汗液中可萃取镉含量的检测限分别达到1 mg/kg和0.1 mg/kg,可在3~5 min内完成样品的定性或半定量测试;其灵敏度、特异性和稳定性均能满足实际样品的测试要求,适用于样品现场快速筛查和检测。 展开更多
关键词 测试 镉 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 纺织品
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免疫层析试纸条检测轻度感染小鼠肉汁抗旋毛虫抗体的研究 被引量：2
13
作者 王中全 王洁 +2 位作者 崔晶 秦银霞 来利红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期9-12,共4页
目的观察免疫层析试纸条对轻度感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条。将70只雄性昆明小鼠随机分为7组（每组10只），每组分别经口感染30、25、20、15、10、5、3条旋毛虫幼... 目的观察免疫层析试纸条对轻度感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条。将70只雄性昆明小鼠随机分为7组（每组10只），每组分别经口感染30、25、20、15、10、5、3条旋毛虫幼虫，感染后6周用试纸条进行血清及肉汁抗体检测，并与ELISA、镜检法及消化法的检测结果进行比较。结果30、25、20、15、10条旋毛虫幼虫感染的小鼠，试纸条与ELISA的血清及肉汁抗体阳性率均为100（10／10）,镜检法与消化法的幼虫检出率均为100％（10／10）。5条旋毛虫感染的10只小鼠，镜检法和消化法的幼虫检出率分别为70％（7／10）和100％（10／10），消化法检查时10只小鼠的每克肌肉虫荷为0．88～3．14条幼虫（平均为1．58条），试纸条与ELISA检测时的血清及肉汁抗体阳性率均为100％（10／10）。3条旋毛虫感染的10只小鼠，4种方法检测时均为阴性。结果表明，试纸条检验肉类中旋毛虫的敏感性与ELISA和消化法相同，且明显高于镜检法（P〈0．05）。低剂量旋毛虫感染小鼠后6周的肉汁抗体水平与感染剂量呈正相关（P〈0．05），肉汁与血清抗体水平均具有相关性（P〈0．05）。结论每克小鼠肌肉仅含0．88条旋毛虫幼虫时也可被试纸条检出，试纸条可用于轻度感染肉类中旋毛虫检疫的初筛。 展开更多
关键词 旋毛虫 肉类检疫 免疫层析试纸条 ELISA 镜检法 消化法 肉汁 小鼠
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免疫层析试纸条检测口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体的研究 被引量：1
14
作者 张喜悦 徐天刚 +4 位作者 刘春菊 赵永刚 冯娟 赵云玲 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期532-535,共4页
为建立口蹄疫(FMD)快速检测方法,本研究以纯化的FMD病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC作为捕捉抗原,金标FMDV抗原作为金标试剂,建立了检测FMDNSP3ABC抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS)。应用FMDICS试验与UBIFMDNSP酶联免疫吸附试验(ELISA)... 为建立口蹄疫(FMD)快速检测方法,本研究以纯化的FMD病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC作为捕捉抗原,金标FMDV抗原作为金标试剂,建立了检测FMDNSP3ABC抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS)。应用FMDICS试验与UBIFMDNSP酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对反刍动物、猪的FMD标准阳性血清的不同滴度进行测定,结果表明ICS在检测反刍动物血清时的检测下限(1∶64)与ELISA(1∶128)接近,而检测猪血清时的检测下限(1∶8)低于UBINSP-ELISA试剂盒(1∶64)。同时用ICS和UBINSP-ELISA检测313份牛血清和111份羊血清,结果ICS检测牛血清时的敏感性和特异性分别为81.81%和96.69%,检测羊血清时敏感性和特异性分别为88.88%和95.10%;ICS与UBINSP-ELISA用于检测牛血清时符合率为95.52%,用于检测羊血清时的符合率为94.59%。结果表明ICS适合在基层单位或养殖场进行自行检测。 展开更多
关键词 免疫层析试纸条 口蹄疫 非结构蛋白 抗体
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同时检测AFB_1和ZEA免疫层析试纸条的研制 被引量：6
15
作者 张甄 郑丽娜 裴世春 《黑龙江八一农垦大学学报》 2010年第2期69-73,79,共6页
采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,将其与抗AFB1和ZEA单克隆抗体进行偶联,并把偶联物、AFB1-STI、ZEA-OVA以及硝酸纤维素膜(NC膜)等组装成免疫层析试纸条,同时进行检测条件的最优化设计。胶体金偶联AFB1和ZEA抗体最适pH同为7.0,最适抗体... 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,将其与抗AFB1和ZEA单克隆抗体进行偶联,并把偶联物、AFB1-STI、ZEA-OVA以及硝酸纤维素膜(NC膜)等组装成免疫层析试纸条,同时进行检测条件的最优化设计。胶体金偶联AFB1和ZEA抗体最适pH同为7.0,最适抗体浓度分别为5.0和2.5μg.mL-1,NC膜上包被AFB1-STI和ZEA-OVA的浓度分别1.0和2.0mg.mL-1,为该方法可同时定性检测样品中AFB1和ZEA,其最低检测限分别达到5μg.kg-1和50μg.kg-1;与黄曲霉毒素M1、脱氧血腐镰刀菌烯醇的交叉反应率小于1%。该试纸条具有可同时检测两种真菌毒素的特点,适用于同一样品中多种毒素的快速检测。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 玉米赤霉烯酮 同时检测 免疫层析试纸条
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胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪瘟抗体的比对试验 被引量：2
16
作者 宋忠旭 雷彬 +5 位作者 李良华 孙华 彭先文 梅书棋 李明波 刘贵生 《养殖与饲料》 2015年第10期4-5,共2页
胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟抗体阳性检出率94.69%,ELISA法检测猪瘟抗体合格率95.58%,两者符合率为99.07%;胶体金免疫层析试纸条强阳性率为86.73%,ELISA检测猪瘟抗体阻断率≥60%为89.38%,检测线显色强度与抗体水平呈正相关。
关键词 猪瘟 胶体金免疫层析试纸条 ELISA 抗体比对
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胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪蓝耳病抗体的比对试验 被引量：2
17
作者 宋忠旭 雷彬 +6 位作者 李良华 孙华 彭先文 梅书棋 李明波 陈明银 吴飙 《猪业科学》 2015年第9期66-67,共2页
胶体金免疫层析试纸条检测猪蓝耳病抗体的结果中强阳性、中阳性、弱阳性、阴性分别为48.67%、18.58%、31.86%、0.88%,检测猪蓝耳病抗体合格率99.12%;ELISA检测猪蓝耳病抗体合格率95.58%,符合率为96.43%。胶体金免疫层析试纸条能够评价... 胶体金免疫层析试纸条检测猪蓝耳病抗体的结果中强阳性、中阳性、弱阳性、阴性分别为48.67%、18.58%、31.86%、0.88%,检测猪蓝耳病抗体合格率99.12%;ELISA检测猪蓝耳病抗体合格率95.58%,符合率为96.43%。胶体金免疫层析试纸条能够评价猪蓝耳病疫苗临床免疫状况,可进行猪蓝耳病抗体的定性检测。 展开更多
关键词 猪蓝耳病 胶体金免疫层析试纸条 ELISA 抗体比对
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胶体金免疫层析试纸条检测环境样品中的镉(Ⅱ) 被引量：7
18
作者 杨波 刘志平 +6 位作者 姬培 林优优 徐万妍 王松 李文辉 李季 许艇 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期119-125,共7页
研制了大米及河水样品中镉残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条。实验结果表明,制备的试纸条对Cd(Ⅱ)-EDTA标准溶液的最低检测限为20μg/L;除了与Hg(Ⅱ)-EDTA及Fe(Ⅲ)-EDTA轻微交叉反应外,与Cr(Ⅱ)-EDTA、Pb(Ⅱ)-EDTA、Cu(Ⅱ)-EDTA等金... 研制了大米及河水样品中镉残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条。实验结果表明,制备的试纸条对Cd(Ⅱ)-EDTA标准溶液的最低检测限为20μg/L;除了与Hg(Ⅱ)-EDTA及Fe(Ⅲ)-EDTA轻微交叉反应外,与Cr(Ⅱ)-EDTA、Pb(Ⅱ)-EDTA、Cu(Ⅱ)-EDTA等金属螯合物无交叉反应;试纸条在常温下放置18周稳定性良好;对河水及大米中Cd(Ⅱ)的最低检测限分别为5μg/L和0.5μg/g,与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)的检测结果一致。胶体金免疫层析试纸条法操作简便,能满足样品的检测要求,适用于污染地区大米及河水样品中重金属Cd(Ⅱ)残留的快速检测。 展开更多
关键词 镉(Ⅱ) 单克隆抗体 免疫层析试纸条 河水 大米 检测
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同时检测玉米中黄曲霉毒素B_(1)和赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制 被引量：20
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作者 卢迪莎 王序 +2 位作者 杨金易 罗林 肖治理 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第2期346-354,共9页
研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标... 研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB_(1)和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠IgG浓度、样品前处理条件等因素。结果表明:检测AFB_(1)和OTA的IC_(50)分别为1.58、3.91μg/kg,线性范围分别为0.26~9.73、1.14~13.29μg/kg,肉眼检测限分别为3.70、5.55μg/kg;与黄曲霉毒素类似物交叉率为12%~62%,与赭曲霉毒素B交叉率为58%,与其他真菌毒素无明显交叉反应;选择玉米样品进行添加回收实验,2种毒素回收率在92%~103%之间,变异系数小于15%;对实际样品的检测与高效液相色谱法和市售胶体金试纸检测结果一致;且该试纸条可在4℃稳定保存5个月以上,稳定性较好。本研究所制备的时间分辨荧光免疫层析试纸条具有灵敏、准确、快速和简便等特点,非常适用于玉米等食品和农产品中AFB_(1)和OTA的现场快速筛查。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 赭曲霉毒素A 时间分辨 荧光免疫层析试纸条
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北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫层析试纸条的研制及初步应用 被引量：5
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作者 李宛生 李敏华 +10 位作者 张洪亮 李超 许浒 付军 龚帮俊 郭镇洋 刘建波 彭金美 周国辉 王倩 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期842-849,共8页
为研制一种快速检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的免疫层析试纸条(ICS),本研究以红色乳胶微球偶联的PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)1H4为检测抗体,并包被在结合垫上,以MAb 1H4和羊抗鼠IgG为捕获抗体,并分别包被在硝酸纤维素膜上... 为研制一种快速检测北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的免疫层析试纸条(ICS),本研究以红色乳胶微球偶联的PRRSV N蛋白单克隆抗体(MAb)1H4为检测抗体,并包被在结合垫上,以MAb 1H4和羊抗鼠IgG为捕获抗体,并分别包被在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,经各反应条件的优化建立了检测PRRSV的乳胶微球ICS。各反应条件优化结果显示,乳胶微球偶联的MAb即检测抗体浓度为1.5 mg/mL,检测线MAb即检测线捕获抗体的浓度为2.0 mg/mL,质控线羊抗鼠IgG即质控线捕获抗体的浓度为1.0 mg/mL。特异性试验结果显示,该方法可特异性检测我国出现的高致病性、NADC30-like、NADC34-like等北美型PRRSV代表株,与欧洲型PRRSV DV疫苗株及猪的其他常见病毒(CSFV、PRV、PCV2、PEDV、TGEV、PPV)均无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法对系列稀释PRRSV(10^(5.0) TCID_(50)/mL~2.5×10^(2.0) TCID_(50)/mL)的最低检测限为5×10^(2.0) TCID_(50)/mL,对2倍倍比稀释的重组N蛋白(rN,24000 ng/mL~3.75 ng/mL)的最低检测限为15 ng/mL;重复性试验结果显示,同一批次和不同批次试纸条的检测结果均无差异;对不同类型北美型PRRSV株(高致病性株、NADC30-like株、类高致病性株)感染的猪血清检测结果显示,利用该ICS可以从相应猪血清中检测到不同北美型的PRRSV。对采集的108份疑似PRRSV感染的猪肺组织及血清样品分别采用本研究建立的ICS及本研究室建立的PCR方法检测,结果显示,ICS检测的阳性率为37.03%(40/108),PCR检测的阳性率为42.59%(46/108),二者的总体符合率为83.33%。上述结果表明,该方法可以用于我国PRRSV主要流行株及临床样品的检测。本研究首次以同一株MAb分别作为检测抗体和检测线捕获抗体,建立检测PRRSV的乳胶微球ICS,为现地PRRSV流行病学调查及临床快速检测提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 北美型 N蛋白 免疫层析试纸条
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