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人Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体β基因(PILRβ)的克隆、表达、纯化及其多克隆抗体的制备
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作者 厉建中 陈霞 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1011-1013,共3页
目的:表达和纯化人Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体蛋白PILRβ,制备并鉴定其多克隆抗体。方法:应用RT-PCR从人的外周血细胞总RNA中反转录并扩增出PILRβ基因,将其克隆到表达载体pET-32a,在大肠杆菌中IPTG诱导表达,经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,... 目的:表达和纯化人Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体蛋白PILRβ,制备并鉴定其多克隆抗体。方法:应用RT-PCR从人的外周血细胞总RNA中反转录并扩增出PILRβ基因,将其克隆到表达载体pET-32a,在大肠杆菌中IPTG诱导表达,经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化,纯化后的蛋白多次注射免疫新西兰大白兔,获取多克隆抗血清,ELISA法检测抗体效价,Western印迹检测抗体特异性。结果:获得了较高纯度的PILRβ蛋白(Mr约为42 000)及其抗体,多抗效价达到1:10 000,且特异性较好。结论:成功克隆了PILRβ基因并表达纯化了其蛋白,获得了效价较高、特异性较强的多克隆抗体,为进一步研究PILRβ蛋白的功能和潜在的药物开发打下了基础。 展开更多
关键词 成对免疫球蛋白样受体β 克隆 分子 基因表达 多克隆抗体
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大黄鱼肝脏免疫保护蛋白的鉴定 被引量:1
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作者 吴志鹏 王三英 章跃陵 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期23-30,共8页
本研究以大黄鱼(Larimichthys crocea)肝脏为研究对象,采用比较蛋白质组学技术分析大黄鱼免疫保护后蛋白表达水平的变化。结果发现,对照组和免疫保护组中共有20个表达水平差异显著的蛋白点,经MALDI-TOF-MS分析,获得18个差异蛋白点肽质... 本研究以大黄鱼(Larimichthys crocea)肝脏为研究对象,采用比较蛋白质组学技术分析大黄鱼免疫保护后蛋白表达水平的变化。结果发现,对照组和免疫保护组中共有20个表达水平差异显著的蛋白点,经MALDI-TOF-MS分析,获得18个差异蛋白点肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprint,PMF),通过数据库查询,与免疫型受体、新型抗原受体等蛋白具有高度同源性。在此基础之上,进一步选取4个蛋白差异点(1、10、14和18号)进行Westen blot验证。结果表明,该4个蛋白差异点可以与所制备的抗体发生特异性的结合,且变化趋势与蛋白质组学分析结果一致。由此推测,免疫型受体等18个蛋白应该与大黄鱼免疫保护密切相关,所获研究结果为揭示大黄鱼免疫保护机理奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 大黄鱼(Larimichthys crocea) 肝脏 比较蛋白质组学 免疫保护 免疫型受体
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NK细胞可溶性KIR3DL1分子检测双夹心ELASA的建立
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作者 李琦 宋朝君 +5 位作者 李娜 董芸 田莹 张赟 张春梅 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期875-877,共3页
自然杀伤细胞(natural killer cells,NK细胞)是固有免疫中一类十分重要的淋巴细胞,约占循环淋巴细胞总数的15%。目前根据CD56和CD16的表达水平可将NK细胞分为CD56hi、CD56dim和CD56-CD16+3个亚群。
关键词 可溶杀伤细胞免疫球蛋白样受体3DL1 NK细胞 ELISA 单克隆抗体
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