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马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅱ 免疫亲合色谱—酶联免疫吸附法(IAC—ELISA) 被引量:5
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作者 沈建忠 钱传范 +1 位作者 江海洋 杨汉春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期548-553,共6页
本文首次报道IAC—ELISA方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜霉素的特异性抗体IgG和高容量IAC柱(I柱动态柱容量为7 160ng·ml- 1gel,Ⅱ柱为3 750ng·ml- 1gel) 。组织... 本文首次报道IAC—ELISA方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜霉素的特异性抗体IgG和高容量IAC柱(I柱动态柱容量为7 160ng·ml- 1gel,Ⅱ柱为3 750ng·ml- 1gel) 。组织样品用甲醇提取,经IAC柱分离纯化,ELISA检测,即IAC—ELISA 方法。本试验揭示,以组织样本提取纯化稀释液为介质制备的标准曲线(I50 为333 ~371ng·ml- 1 ,斜率为195 ~220 ,检测极限为10 ~28ng·g- 1) ,其I50 值和斜率与以PBST- 10 % 甲醇为介质的标准曲线相符,实际IAC—ELISA检测时,各组织的标准曲线可用后者代替,使操作大为简化、实用。各组织添加马杜霉素300 ~120 .0μg·kg - 1 水平下,测得样本回收率为764 % ~109 .0 % ,变异系数为38 % ~16 .4 % 。结果证明了该方法的可靠性。本文建立的IAC—ELISA法是目前国内外唯一报道的最简便、灵敏的马杜霉素残留检测方法。 展开更多
关键词 马杜霉素 免疫亲合 ELISA 肉鸡 残留分析
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ProteinA亲合膜色谱柱的性能及从人血浆中纯化免疫球蛋白的研究 被引量:10
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作者 贾凌云 杨利 +1 位作者 邹汉法 张玉奎 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期476-480,共5页
以木纤维为基质,与甲基丙烯酸环氧丙酯共聚接枝合成了复合膜介质,用复合膜介质制备了proteinA亲合膜色谱柱,考察了proteinA亲合膜色谱柱液相流动特性和吸附性能。实验证明:流速与亲合膜色谱柱柱压呈线性关系,当流... 以木纤维为基质,与甲基丙烯酸环氧丙酯共聚接枝合成了复合膜介质,用复合膜介质制备了proteinA亲合膜色谱柱,考察了proteinA亲合膜色谱柱液相流动特性和吸附性能。实验证明:流速与亲合膜色谱柱柱压呈线性关系,当流速为3mL/min时,柱压为160kPa。免疫球蛋白(IgG)浓度和上样速度是影响proteinA键合容量的重要因素,对其进行了优化研究。用动态吸附法确定了对人IgG动态最大吸附能力可达21.7mg/g(干介质)。通过对人血浆中IgG的分离纯化考察了proteinA亲合膜色谱柱的分离能力,用毛细管电泳对纯化人IgG的纯度进行了分析,证明一步纯化IgG纯度可达98%以上。亲合膜色谱柱分离速度快,操作简单,吸附容量满足要求,有望在免疫球蛋白的大规模分离纯化中得到应用。 展开更多
关键词 亲合 ProteinA 人血浆 免疫球蛋白 纯化
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免疫亲合色谱及在农药残留分析中的应用 被引量:9
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作者 邵秀金 刘曙照 +1 位作者 冯大和 钱传范 《农药学学报》 CAS CSCD 2003年第4期9-14,共6页
免疫亲合色谱可用于复杂样本中微量目标分析物的选择性分离富集。综述了免疫亲合色谱的基本原理、方法的建立过程(包括抗体的制备、固相基质的筛选、抗体与基质的偶联、免疫亲合色谱条件的优化)、免疫亲合色谱在农药残留分析中的应用现... 免疫亲合色谱可用于复杂样本中微量目标分析物的选择性分离富集。综述了免疫亲合色谱的基本原理、方法的建立过程(包括抗体的制备、固相基质的筛选、抗体与基质的偶联、免疫亲合色谱条件的优化)、免疫亲合色谱在农药残留分析中的应用现状及发展趋势。 展开更多
关键词 免疫亲合 农药残留
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免疫亲合柱净化高效液相色谱检测啤酒中赭曲霉毒素A 被引量:14
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作者 杨超 林洪 +1 位作者 张辉珍 李惠颍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期127-129,共3页
建立了检测啤酒中赭曲霉毒素A(OTA)免疫亲合柱净化高效液相色谱法。该方法为将脱气后的啤酒样品用15%NaCl和2%NaHCO_3的水溶液稀释,然后通过Ochra Test免疫亲和柱净化,采用C18(5μm,250×4.60 mm)色谱柱,流动相为乙腈-水-乙酸(体积... 建立了检测啤酒中赭曲霉毒素A(OTA)免疫亲合柱净化高效液相色谱法。该方法为将脱气后的啤酒样品用15%NaCl和2%NaHCO_3的水溶液稀释,然后通过Ochra Test免疫亲和柱净化,采用C18(5μm,250×4.60 mm)色谱柱,流动相为乙腈-水-乙酸(体积比为99:99:2),流速0.900 mL/min;激发波长333 nm;发射波长477 nm;柱温35℃;进样量100μL;外标法定量。方法所采用的标准曲线有良好的线性关系,检出限为0.1 ng/mL,加标回收率为95%~106%,对不同浓度的样品相对标准偏差RSD为2.43%~8.32%。该方法操作简便、准确,回收率高,精密度良好,重现性好,可用于啤酒中赭曲霉毒素A的测定,具有实际应用价值。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 免疫亲合 高效液相 啤酒
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兽药残留的免疫亲合色谱分析(一) 被引量:5
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作者 李俊锁 钱传范 +2 位作者 扈洪波 李喜旺 王明安 《中国兽药杂志》 北大核心 1997年第4期49-52,共4页
本文对免疫亲合色谱(IAC)及其在兽药残留分析中的应用进行了综述,包括IAC原理、抗体制备、免疫吸附剂合成、IAC技术及其在残留分析中的研究与应用进展,重点讨论IAC净化技术。
关键词 兽药残留 免疫亲合 残留分析
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免疫亲和色谱-高效液相色谱法测定土壤中氯磺隆残留 被引量:4
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作者 冯大和 邵秀金 +1 位作者 韦林洪 刘曙照 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1663-1666,共4页
采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗氯磺隆抗体共价偶联,合成免疫亲和吸附剂并制备对氯磺隆具有特异性亲和力的免疫亲合色谱(IAC)柱。对IAC条件进行优化,选择0.02mol.L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积... 采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗氯磺隆抗体共价偶联,合成免疫亲和吸附剂并制备对氯磺隆具有特异性亲和力的免疫亲合色谱(IAC)柱。对IAC条件进行优化,选择0.02mol.L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积分数)甲醇水作洗脱剂。结果表明,在实验条件下,IAC柱对氯磺隆的动态柱容量达2.6!g.mL-1床体积。当标样溶液中氯磺隆含量为2.0ng.mL-1时,经IAC柱富集后浓度提高近250倍。土壤中添加氯磺隆0.10!g.g-1、5.0ng.g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复实验的平均回收率分别为92.9%、94.8%,相对标准偏差分别为8.46%、8.41%。成功建立了氯磺隆IAC-HPLC分析技术并用于土壤中痕量残留氯磺隆的测定。 展开更多
关键词 免疫亲合(iac) 高效液相(HPLC) 土壤 氯磺隆
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