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新疆加工番茄条斑坏死病原黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因的克隆和序列分析 被引量:19
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作者 常波 向本春 +1 位作者 刘升学 韩盛 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第4期410-414,共5页
从表现花叶、畸形以及坏死症状的加工番茄病株上获得黄瓜花叶病毒分离物,用1对CMV CP基因引物进行RT-PCR,扩增得到了776bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体PUCm-T中转化大肠杆菌DHSa。经限制酶酶切鉴定,重组克隆中含有与... 从表现花叶、畸形以及坏死症状的加工番茄病株上获得黄瓜花叶病毒分离物,用1对CMV CP基因引物进行RT-PCR,扩增得到了776bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体PUCm-T中转化大肠杆菌DHSa。经限制酶酶切鉴定,重组克隆中含有与PCR产物大小相同的776bp的插入片段。cDNA全序列分析表明,重组克隆含1个开放阅读框架(ORF),长度为657nt,编码218个氨基酸组成的蛋白。与国内外报道的CMV株系序列比较,所测得的CMV新疆分离物与CMV亚组Ⅰ的核苷酸同源性高达91.0%-98.9%.而与CMV亚组Ⅱ的核苷酸同源性仅在76.4%-78.2%,所测得的CMV新疆分离物与CMV亚组Ⅰ的氨基酸同源性高达94.2%-98.6%;而与CMV亚组Ⅱ的核苷酸同源性仅在79.9%~83.5%.CMV亚组Ⅰ的株系较CMV亚组Ⅱ株系同源关系更密切,所以CMV新疆分离物应该归属于CMV亚组Ⅰ。 展开更多
关键词 加工番茄 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白基因克隆 序列比较分析
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新疆加工番茄上番茄花叶病毒的分子鉴定 被引量:15
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作者 姜玉霞 向本春 +2 位作者 安仙丽 黄家风 汪铖华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第3期484-489,共6页
从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124,用1对ToMVCP基因引物进行RT-PCR,扩增得到了689bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体pMD18-T中再转化到大肠杆菌TOP10。经限制酶酶切鉴定,重组克隆中含有与PCR产物大小... 从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124,用1对ToMVCP基因引物进行RT-PCR,扩增得到了689bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体pMD18-T中再转化到大肠杆菌TOP10。经限制酶酶切鉴定,重组克隆中含有与PCR产物大小相同的689bp的插入片段。cDNA全序列分析表明,所扩增出的689bpToMVCP基因,含1个480bp开放阅读框架(ORV),编码160氨基酸组成的蛋白,所克隆的基因包含完整的ToMVCP基因。所测得的xj124分离物与国内外已报道的部分ToMV CP基因序列比较。核苷酸同源性高达84.4%-99.8%,氨基酸同源性高达98.7%-100%。因此将该分离物鉴定为番茄病毒病花叶病毒。 展开更多
关键词 番茄花叶病毒 分子鉴定 克隆外壳蛋白基因 序列分析
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