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几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析
被引量:
5
1
作者
双杰
包秋华
+3 位作者
永胜
王艳霞
张和平
格日勒图
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2010年第8期8-10,31,共4页
从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-lay...
从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44~66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。
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关键词
嗜酸乳杆菌
S-层蛋白
slp基因
克隆与序列分析
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职称材料
2种山葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆与序列分析
2
作者
李滨胜
崔杰
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第S1期11-14,共4页
目的:白藜芦醇合酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜芦醇合成途径中的关键酶,为获得高效表达的白藜芦醇合酶基因,方法:利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列设计并合成一对引物,以2种不同来源的山葡萄叶片基因组DNA为模板,PC...
目的:白藜芦醇合酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜芦醇合成途径中的关键酶,为获得高效表达的白藜芦醇合酶基因,方法:利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列设计并合成一对引物,以2种不同来源的山葡萄叶片基因组DNA为模板,PCR扩增包含RS完整基因在内的一段序列;在此基础上采用悬挂延伸PCR法分别克隆目的基因。结果:测序与序列分析表明,RS全长基因片段大小均为1 536bp,其中包含一个内含子及两个外显子,同源性比较,其内含子碱基变化较大。悬挂延伸PCR法克隆获得的目的基因,开放读码框分别为1 170 bp和1 182bp,编码389/392个氨基酸残基,命名为CNRS1、CNRS3。同源性比较发现,CNRS1、CNRS3与已知葡萄RS基因序列的同源性分别为98%、97.5%。结论:以上结果证实CNRS1、CNRS3属葡萄RS基因家族成员,为今后进一步对该基因的研究与利用打下了基础。
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关键词
山葡萄
RS基因
克隆与序列分析
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职称材料
金黄色葡萄球菌TRAP基因的克隆与序列分析
被引量:
2
3
作者
于长清
崔玉东
《黑龙江八一农垦大学学报》
2007年第3期72-75,共4页
参考Genbank已经发表的关于金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的基因序列,设计合成1对引物,从本实验室保存的金黄色葡萄球菌Newman株中提取细菌DNA,对TRAP蛋白基因进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现1条约500bp的条带,回收纯化后,将其克隆...
参考Genbank已经发表的关于金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的基因序列,设计合成1对引物,从本实验室保存的金黄色葡萄球菌Newman株中提取细菌DNA,对TRAP蛋白基因进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现1条约500bp的条带,回收纯化后,将其克隆至pMD18-T质粒载体中,进行核苷酸序列分析,然后与报道的TRAP蛋白基因进行比较。结果表明:所扩增的基因序列与报道的TRAP核苷酸的同源性高达100/,证实为金黄色葡萄球菌Newman株TRAP蛋白基因。
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关键词
金黄色葡萄球菌
克隆与序列分析
TRAP
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职称材料
鸡传染性支气管炎病毒N基因的克隆及序列分析
被引量:
1
4
作者
王长远
周启扉
+2 位作者
薛军
王继昌
闻晓波
《黑龙江八一农垦大学学报》
2008年第3期43-45,共3页
根据GenBank上已公布的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因序列经多重比较设计一对特异性引物扩增大庆分离株DQ1株的N基因,RT-PCR产物经纯化回收后,克隆到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌TG1感受态细胞,筛选出阳性质粒进行序列测定,经与已发表...
根据GenBank上已公布的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因序列经多重比较设计一对特异性引物扩增大庆分离株DQ1株的N基因,RT-PCR产物经纯化回收后,克隆到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌TG1感受态细胞,筛选出阳性质粒进行序列测定,经与已发表的IBV N基因序列进行序列比较与分析,表明DQ1株的N基因与现有疫苗株存在一定差异。
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关键词
鸡传染性支气管炎病毒
N基因
克隆与序列分析
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职称材料
短小乳杆菌内蒙古分离株S-层蛋白的普查、鉴定和基因分析
5
作者
兰丽
魏建民
+3 位作者
王艳霞
王敏
满达
格日勒图
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第8期26-30,共5页
S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法...
S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法克隆出L.brevis的slp基因,对该slp基因进行测序及序列分析。试验结果表明,SDS-PAGE电泳结果显示L.brevis样品在44~55 ku之间出现目的条带,与文献报道的S-层蛋白大小范围一致;PCR方法正确扩增出大小约为1300 bp的slp基因,经DNAStar软件遗传分析发现该基因与鸡乳酸杆菌株(GenBank登录号:AY597266.1)的亲缘关系和遗传距离最近,与其他种类乳酸菌遗传距离也非常相近;经Genetyx生物软件推导出的S-层蛋白大小理论值约为47 ku,具有显著的外膜蛋白的特性。本试验为后续遗传改造等研究工作奠定基础。
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关键词
短小乳杆菌
S-层蛋白
slp基因
克隆与序列分析
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职称材料
贵州省五个猪场蚊蝇携带PRRSV的调查
被引量:
2
6
作者
路宪礼
周碧君
+4 位作者
王开功
文明
程振涛
罗意
江楠
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011年第9期30-33,共4页
为监测猪场内的蚊蝇是否能携带猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),采集贵州省5个养猪场蚊蝇样本,采用RT-PCR方法引物蚊蝇样本进行PRRSV N基因检测,对检测为阳性样本的PRRSV-NSP2基因进行克隆并测序,最后对NSP2基因进行生物信息学分析。...
为监测猪场内的蚊蝇是否能携带猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),采集贵州省5个养猪场蚊蝇样本,采用RT-PCR方法引物蚊蝇样本进行PRRSV N基因检测,对检测为阳性样本的PRRSV-NSP2基因进行克隆并测序,最后对NSP2基因进行生物信息学分析。结果显示,从花溪、乌当、毕节3个地方猪场的蚊蝇样本中均扩增出372 bp左右的片段。贵州省蚊蝇样本的3株PRRSV-NSP2基因的核苷酸序列之间存在较高的同源性,可达97.9%~98.3%;蚊蝇样本的PRRSV-NSP2基因片段与贵州猪场猪源PRRSV流行株相比具有较高的核苷酸同源性,高达97.6%~100.0%,与国内最近流行变异毒株的核苷酸同源性为84.3%~98.8%,而与早期国内外分离经典毒株的核苷酸同源性为77.1%~97.7%。结果表明,从贵州省几个猪场内采集的蚊蝇携带PRRSV。
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关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
蚊蝇
克隆与序列分析
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职称材料
题名
几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析
被引量:
5
1
作者
双杰
包秋华
永胜
王艳霞
张和平
格日勒图
机构
青海大学医学院病原生物学教研室
内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室
出处
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2010年第8期8-10,31,共4页
基金
国家自然基金项目(30960279)
中国博士后项目(57545)
内蒙古农业大学博士启动基金(k11629)
文摘
从内蒙古传统发酵乳制品中分离的几种乳酸菌,包括干酪乳杆菌、乳酸乳球菌、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌标准株(L.acidophilus ATCC4356)等为实验材料,应用SDS-PAGE方法和PCR方法分别进行S-层蛋白(S-layers pro-tein,SLP)的普查和slp基因的检测。结果表明:在各种乳酸菌中,经SDS-PAGE电泳方法检测,只有植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和其标准菌株的样品中出现膜外蛋白的可疑条带,大小为44~66ku之间,与文献报道的slp基因表达产物大小范围是一致;经PCR方法检测,只有嗜酸乳杆菌和其标准菌株L.acidophilus ATCC4356中扩增出slp基因可疑条带,其大小约为1 300 bp。并对嗜酸乳杆菌slp基因进行克隆、基因序列测序和分析。
关键词
嗜酸乳杆菌
S-层蛋白
slp基因
克隆与序列分析
Keywords
Lactobacillus acidophilus
S-layer protein
slp gene
cloning and sequence analysis
分类号
Q939.117 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
2种山葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆与序列分析
2
作者
李滨胜
崔杰
机构
黑龙江省森林植物园引种驯化研究室
哈尔滨工业大学食品科学与工程学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第S1期11-14,共4页
基金
黑龙江省自然科学基金资助项目(C200904)
文摘
目的:白藜芦醇合酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜芦醇合成途径中的关键酶,为获得高效表达的白藜芦醇合酶基因,方法:利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列设计并合成一对引物,以2种不同来源的山葡萄叶片基因组DNA为模板,PCR扩增包含RS完整基因在内的一段序列;在此基础上采用悬挂延伸PCR法分别克隆目的基因。结果:测序与序列分析表明,RS全长基因片段大小均为1 536bp,其中包含一个内含子及两个外显子,同源性比较,其内含子碱基变化较大。悬挂延伸PCR法克隆获得的目的基因,开放读码框分别为1 170 bp和1 182bp,编码389/392个氨基酸残基,命名为CNRS1、CNRS3。同源性比较发现,CNRS1、CNRS3与已知葡萄RS基因序列的同源性分别为98%、97.5%。结论:以上结果证实CNRS1、CNRS3属葡萄RS基因家族成员,为今后进一步对该基因的研究与利用打下了基础。
关键词
山葡萄
RS基因
克隆与序列分析
Keywords
Vitis amurenais Rupr
resveratrol synthetic enzyme gene
clone and Sequence Analysisof
分类号
TS2 [轻工技术与工程—食品科学与工程]
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职称材料
题名
金黄色葡萄球菌TRAP基因的克隆与序列分析
被引量:
2
3
作者
于长清
崔玉东
机构
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
出处
《黑龙江八一农垦大学学报》
2007年第3期72-75,共4页
文摘
参考Genbank已经发表的关于金黄色葡萄球菌TRAP蛋白的基因序列,设计合成1对引物,从本实验室保存的金黄色葡萄球菌Newman株中提取细菌DNA,对TRAP蛋白基因进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳分析,呈现1条约500bp的条带,回收纯化后,将其克隆至pMD18-T质粒载体中,进行核苷酸序列分析,然后与报道的TRAP蛋白基因进行比较。结果表明:所扩增的基因序列与报道的TRAP核苷酸的同源性高达100/,证实为金黄色葡萄球菌Newman株TRAP蛋白基因。
关键词
金黄色葡萄球菌
克隆与序列分析
TRAP
Keywords
staphylococcus aureus
cloning and sequence analysis
TRAP
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
鸡传染性支气管炎病毒N基因的克隆及序列分析
被引量:
1
4
作者
王长远
周启扉
薛军
王继昌
闻晓波
机构
黑龙江八一农垦大学
黑龙江农业工程职业学院
济南光明兽药厂
黑龙江省八五一○农场兽医院
出处
《黑龙江八一农垦大学学报》
2008年第3期43-45,共3页
文摘
根据GenBank上已公布的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因序列经多重比较设计一对特异性引物扩增大庆分离株DQ1株的N基因,RT-PCR产物经纯化回收后,克隆到pMD18-T载体上,转化大肠杆菌TG1感受态细胞,筛选出阳性质粒进行序列测定,经与已发表的IBV N基因序列进行序列比较与分析,表明DQ1株的N基因与现有疫苗株存在一定差异。
关键词
鸡传染性支气管炎病毒
N基因
克隆与序列分析
Keywords
infectious bronchitis virus
N gene
clone and sequence analysis
分类号
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
短小乳杆菌内蒙古分离株S-层蛋白的普查、鉴定和基因分析
5
作者
兰丽
魏建民
王艳霞
王敏
满达
格日勒图
机构
内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室
内蒙古农业大学生命科学学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第8期26-30,共5页
基金
国家自然基金项目(30960279)
内蒙古自然基金项目(2011BS0408)
文摘
S-层蛋白(S-layers protein)是位于某些细菌表面的高度有序的具有超微结构的一种外膜蛋白。本试验以蒙古族传统乳制品中分离的短小乳杆菌(Lactobacillus brevis)为材料,应用SDS-PAGE技术对若干乳杆菌进行S-层蛋白的普查,并应用PCR方法克隆出L.brevis的slp基因,对该slp基因进行测序及序列分析。试验结果表明,SDS-PAGE电泳结果显示L.brevis样品在44~55 ku之间出现目的条带,与文献报道的S-层蛋白大小范围一致;PCR方法正确扩增出大小约为1300 bp的slp基因,经DNAStar软件遗传分析发现该基因与鸡乳酸杆菌株(GenBank登录号:AY597266.1)的亲缘关系和遗传距离最近,与其他种类乳酸菌遗传距离也非常相近;经Genetyx生物软件推导出的S-层蛋白大小理论值约为47 ku,具有显著的外膜蛋白的特性。本试验为后续遗传改造等研究工作奠定基础。
关键词
短小乳杆菌
S-层蛋白
slp基因
克隆与序列分析
Keywords
Lactobacillus brevis
S-layer protein
slp gene
cloning and sequence analysis
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
贵州省五个猪场蚊蝇携带PRRSV的调查
被引量:
2
6
作者
路宪礼
周碧君
王开功
文明
程振涛
罗意
江楠
机构
贵州大学动物科学学院
贵州省动物疫病研究室
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011年第9期30-33,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31072158)
贵州省农业攻关项目[黔科合NY字(2009)3071号]
贵州省农业委员会科技计划项目(2010-11)
文摘
为监测猪场内的蚊蝇是否能携带猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),采集贵州省5个养猪场蚊蝇样本,采用RT-PCR方法引物蚊蝇样本进行PRRSV N基因检测,对检测为阳性样本的PRRSV-NSP2基因进行克隆并测序,最后对NSP2基因进行生物信息学分析。结果显示,从花溪、乌当、毕节3个地方猪场的蚊蝇样本中均扩增出372 bp左右的片段。贵州省蚊蝇样本的3株PRRSV-NSP2基因的核苷酸序列之间存在较高的同源性,可达97.9%~98.3%;蚊蝇样本的PRRSV-NSP2基因片段与贵州猪场猪源PRRSV流行株相比具有较高的核苷酸同源性,高达97.6%~100.0%,与国内最近流行变异毒株的核苷酸同源性为84.3%~98.8%,而与早期国内外分离经典毒株的核苷酸同源性为77.1%~97.7%。结果表明,从贵州省几个猪场内采集的蚊蝇携带PRRSV。
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒
蚊蝇
克隆与序列分析
Keywords
Porcine reproductive and respiratory syndrome virus
mosquitos
fliy
cloning and sequence analysis
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
几种乳酸菌S-层蛋白的普查以及slp基因的克隆与序列分析
双杰
包秋华
永胜
王艳霞
张和平
格日勒图
《中国乳品工业》
CAS
北大核心
2010
5
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职称材料
2
2种山葡萄白藜芦醇合酶基因的克隆与序列分析
李滨胜
崔杰
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
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职称材料
3
金黄色葡萄球菌TRAP基因的克隆与序列分析
于长清
崔玉东
《黑龙江八一农垦大学学报》
2007
2
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职称材料
4
鸡传染性支气管炎病毒N基因的克隆及序列分析
王长远
周启扉
薛军
王继昌
闻晓波
《黑龙江八一农垦大学学报》
2008
1
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职称材料
5
短小乳杆菌内蒙古分离株S-层蛋白的普查、鉴定和基因分析
兰丽
魏建民
王艳霞
王敏
满达
格日勒图
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012
0
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职称材料
6
贵州省五个猪场蚊蝇携带PRRSV的调查
路宪礼
周碧君
王开功
文明
程振涛
罗意
江楠
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011
2
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