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阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)分子检测方法研究进展 被引量:17
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作者 王翔 祝长青 +1 位作者 徐幸莲 周光宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第13期350-354,共5页
阪崎肠杆菌(现克罗诺杆菌属)是一种重要的食源性条件致病菌,因其能通过污染婴幼儿配方食品导致严重的新生儿脑膜炎、菌血症和小肠结肠炎等疾病,而受到广泛的关注。其分子生物学检测方法克服了传统检测方法实验操作繁琐、耗时长等问题。... 阪崎肠杆菌(现克罗诺杆菌属)是一种重要的食源性条件致病菌,因其能通过污染婴幼儿配方食品导致严重的新生儿脑膜炎、菌血症和小肠结肠炎等疾病,而受到广泛的关注。其分子生物学检测方法克服了传统检测方法实验操作繁琐、耗时长等问题。目前常用的分子生物学方法主要有普通PCR、实时荧光定量PCR、环介导恒温扩增、探针方法等。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属) 分子检测方法 环介导恒温扩增 分子探针
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婴儿配方粉中克罗诺杆菌属菌株的分子溯源技术 被引量:3
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作者 陈万义 刘振民 任婧 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期43-46,共4页
克罗诺杆菌属菌株水平上的快速准确的鉴定和区分对于控制由该属引起的食源性疾病的监控、预防和控制具有十分重要的意义。同时,对于分子流行病学的研究也是至关重要的。越来越多的基因分型方法已经被用于克罗诺杆菌属内菌株的分子分型... 克罗诺杆菌属菌株水平上的快速准确的鉴定和区分对于控制由该属引起的食源性疾病的监控、预防和控制具有十分重要的意义。同时,对于分子流行病学的研究也是至关重要的。越来越多的基因分型方法已经被用于克罗诺杆菌属内菌株的分子分型。为了切断克罗诺杆菌属菌株的传播途径和快速确定感染源,本综述主要针对目前克罗诺杆菌属菌株的分子分型方法进行了较为详细的探讨。简要介绍了克罗诺杆菌属分子分型方法的最新研究进展,以便发生乳粉污染克罗诺杆菌属菌株时能够快速溯源,防止食物中毒事件的进一步蔓延。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌属 鉴定 分子分型
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克罗诺杆菌属快速检测体系的建立 被引量:4
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作者 王丹丹 李莉 +5 位作者 杨艳歌 刘鸣畅 王洪越 吴淑清 袁飞 吴亚君 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第16期286-292,共7页
以克罗诺杆菌属具有代表性的2株模式菌株(丙二酸盐阳性克罗诺杆菌和阪崎肠杆菌)为实验对象,建立了一套集一步法DNA提取和快速实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)法检测为一体的速测技术体系。通过... 以克罗诺杆菌属具有代表性的2株模式菌株(丙二酸盐阳性克罗诺杆菌和阪崎肠杆菌)为实验对象,建立了一套集一步法DNA提取和快速实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)法检测为一体的速测技术体系。通过优化,建立的快速real-time PCR程序可将扩增时间由普通程序的82 min缩短至27 min 18 s。建立的一步快速DNA提取流程,取样后仅需12 min热循环反应即可直接获取DNA,简便快捷。与传统方法的对比结果显示,快提法与传统煮沸法对纯菌液和人工污染培养前6 h的样品灵敏度一致;对人工污染样品培养7、8 h时,快检法的灵敏度比传统方法低1个数量级。本研究建立的微生物速测技术快速、简便且具有较高灵敏度,在口岸食源性病源微生物现场快速检测方面具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 微生物污染 食品安全 快速实时聚合酶链式反应 克罗诺杆菌属 快检技术
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结合CRISPR/Cas12b与LAMP技术的乳粉中克罗诺杆菌属的检测 被引量:5
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作者 张懿翔 张清平 刘洋 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第12期54-58,共5页
将CRISPR/Cas12b与环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法相结合,应用于乳粉中克罗诺杆菌属的检测。通过基因组比较寻找克罗诺杆菌菌株基因内部的候选保守序列,针对克罗诺杆菌属特异性关键基因序列设计L... 将CRISPR/Cas12b与环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法相结合,应用于乳粉中克罗诺杆菌属的检测。通过基因组比较寻找克罗诺杆菌菌株基因内部的候选保守序列,针对克罗诺杆菌属特异性关键基因序列设计LAMP引物和向导RNA靶向序列,对其进行条件优化、特异性检测,并用人工污染样品对体系的灵敏度、重复性进行验证。结果表明该方法具有良好的特异性,方法的灵敏度达到了0.1 pg/μL;人工污染样品可检测到初始菌量<10 CFU/g的样品,方法检出限为<10 CFU/100 g。将该方法应用于51份市售乳粉样品以及52份模拟生产环境样品的检测,结果与传统国标方法一致,并且大幅缩短了实验时间。该方法可用于乳粉中克罗诺杆菌属的快速检测。 展开更多
关键词 CRISPR Cas12b 克罗诺杆菌属 环介导等温扩增
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等温扩增技术在克罗诺杆菌属快速检测中的研究进展 被引量:1
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作者 王亮 张懿翔 刘洋 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第6期33-36,共4页
环介导等温扩增技术、重组酶聚合酶等温扩增技术、滚环扩增技术和依赖解旋酶扩增技术作为常用的4种等温扩增技术,被广泛应用于克罗诺杆菌的快速检测中。通过分析不同技术的原理并以近5年的具体应用为例,从增菌时间、检出限、鉴定时间、... 环介导等温扩增技术、重组酶聚合酶等温扩增技术、滚环扩增技术和依赖解旋酶扩增技术作为常用的4种等温扩增技术,被广泛应用于克罗诺杆菌的快速检测中。通过分析不同技术的原理并以近5年的具体应用为例,从增菌时间、检出限、鉴定时间、目标菌群、目的基因这几个方面进行系统比较,希望能对企业和监管部门在食品安全控制方面提供相关理论支持。最后提出缩短目标菌富集时间,结果直观易读,多重技术融合将是未来快速检测技术的发展重要方向。 展开更多
关键词 克罗诺杆菌属 等温扩增 快速检测技术
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一株小飞蓬内生毒死蜱降解菌的分离鉴定及其降解特性初探 被引量:9
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作者 冯发运 朱宏 +2 位作者 李俊领 陈安良 余向阳 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期89-96,共8页
为分离筛选具有毒死蜱降解特性的植物内生菌,从农药厂废液池旁采集小飞蓬植物样本,经表面消毒后研磨提取植物汁液,通过以毒死蜱作为单一碳源的无机盐培养基(MSM)进行连续5代培养筛选,获得一株植物内生细菌XFP-gy,经生理生化试验及16Sr ... 为分离筛选具有毒死蜱降解特性的植物内生菌,从农药厂废液池旁采集小飞蓬植物样本,经表面消毒后研磨提取植物汁液,通过以毒死蜱作为单一碳源的无机盐培养基(MSM)进行连续5代培养筛选,获得一株植物内生细菌XFP-gy,经生理生化试验及16Sr DNA同源性比对分析,初步鉴定该菌属阪崎克罗诺杆菌属(Cronobacter sp.)。将菌株XFP-gy在以毒死蜱(初始质量浓度为20 mg/L)为单一碳源的MSM中培养,至第6天时达生长高峰,第9天时毒死蜱的降解率为77.28%。在M SM培养基中补充牛肉膏和蛋白胨(加富培养基)可以促进菌株XFP-gy的生长,并将其对毒死蜱第5天的降解率由69.59%提高到98.0%。菌株XFP-gy降解毒死蜱的最佳培养条件为30℃和p H 7.0,在此条件下,增加培养液中原始接菌量,降低底物毒死蜱的初始质量浓度,可明显提高XFP-gy对毒死蜱的降解效率,当毒死蜱初始质量浓度为10 mg/L,原始接菌量为2%时,至第9天时在培养液中未检出毒死蜱残留。 展开更多
关键词 植物内生菌 阪崎克罗诺杆菌属 生物降解 分离鉴定 毒死蜱 降解特性
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