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儿茶酚双加氧酶基因大肠杆菌表达体系研究
被引量：
1
1
作者
熊爱生
彭日荷
+3 位作者
耿其芳
李贤
范惠琴
姚泉洪
《上海农业学报》
CSCD
2003年第2期1-4,共4页
从恶臭假单孢菌 (Pseudomonassp .S 47)的DNA中扩增得到 92 4bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段 ,将其构建入 pBluescriptSK载体 BamHI和 SacI位点间。测序结果显示与Kim ( 2 0 0 0 )报道一致。将该基因插入带庆大霉素抗性基因启动子和t1t...
从恶臭假单孢菌 (Pseudomonassp .S 47)的DNA中扩增得到 92 4bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段 ,将其构建入 pBluescriptSK载体 BamHI和 SacI位点间。测序结果显示与Kim ( 2 0 0 0 )报道一致。将该基因插入带庆大霉素抗性基因启动子和t1t2终止子载体pG2 5 1、分别带ompA和EAP信号肽、lpp和Gmr 启动子载体 pYF3 95和 pYF5 2 5 4中 ,构建组成型表达载体pG2 5 1,分泌型表达载体 pYFX1,pYFX2。酶活测定结果显示pG2 5 1为 665mu/mL ,pYFX1,pYFX2分别为 1815mu/mL ,10 15mu/mL。SDS PAGE电泳显示表达蛋白产物的分子量约为 3 5kD。分泌型表达载体pYFX1表达量大于 pYFX2 ,组成型表达载体
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关键词
儿茶酚双加氧酶基因
大肠杆菌
表达体系
基因
克隆
基因
表达
酶活分析
环境污染
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职称材料
少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2，3-双加氧酶基因的克隆与表达
被引量：
1
2
作者
周德平
吴淑杭
+1 位作者
闵航
姜震方
《上海农业学报》
CSCD
2007年第2期7-10,共4页
应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的儿茶酚2,3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明,该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框,编码306个氨基酸残基。该基因与已报道的来自菌株S...
应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的儿茶酚2,3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明,该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框,编码306个氨基酸残基。该基因与已报道的来自菌株S.yanoikuyae B1和Sphingomonas sp.KMG425的xylE基因(编码产物均为C230)具有较高的核酸序列同源性,分别为94.37%和94.05%。通过HindⅢ和XhoⅠ两个限制性酶切位点将该基因连接到质粒pET30(a)+上得到重组表达质粒pET-S3,并在E.coli BL21进行了表达,得到了42.3 kD的融合蛋白。酶活测定发现该基因工程菌株的发酵产酶活力明显高于出发菌株。
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关键词
菲降解
少动鞘氨醇单胞菌
儿茶
酚
2
3-
双
加氧酶
基因
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职称材料
题名
儿茶酚双加氧酶基因大肠杆菌表达体系研究
被引量：
1
1
作者
熊爱生
彭日荷
耿其芳
李贤
范惠琴
姚泉洪
机构
上海市农业遗传育种重点实验室
出处
《上海农业学报》
CSCD
2003年第2期1-4,共4页
文摘
从恶臭假单孢菌 (Pseudomonassp .S 47)的DNA中扩增得到 92 4bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段 ,将其构建入 pBluescriptSK载体 BamHI和 SacI位点间。测序结果显示与Kim ( 2 0 0 0 )报道一致。将该基因插入带庆大霉素抗性基因启动子和t1t2终止子载体pG2 5 1、分别带ompA和EAP信号肽、lpp和Gmr 启动子载体 pYF3 95和 pYF5 2 5 4中 ,构建组成型表达载体pG2 5 1,分泌型表达载体 pYFX1,pYFX2。酶活测定结果显示pG2 5 1为 665mu/mL ,pYFX1,pYFX2分别为 1815mu/mL ,10 15mu/mL。SDS PAGE电泳显示表达蛋白产物的分子量约为 3 5kD。分泌型表达载体pYFX1表达量大于 pYFX2 ,组成型表达载体
关键词
儿茶酚双加氧酶基因
大肠杆菌
表达体系
基因
克隆
基因
表达
酶活分析
环境污染
Keywords
Catechol 2,3-dioxygenase gene
Clone
Expression
Enzyme activity analysis
分类号
X512 [环境科学与工程—环境工程]
Q946.823 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2，3-双加氧酶基因的克隆与表达
被引量：
1
2
作者
周德平
吴淑杭
闵航
姜震方
机构
上海市农业科学院环境科学研究所
浙江大学生命科学院
出处
《上海农业学报》
CSCD
2007年第2期7-10,共4页
基金
国家‘八六三’高技术研究发展计划项目(No.2001A2104101)
国家自然科学基金(No.30370048)
文摘
应用PCR方法克隆了少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)ZX4菌株的儿茶酚2,3-双加氧酶基因(c230-ZX4)。核苷酸序列测定与分析表明,该基因片段全长924 bp且具有一个完整的阅读框,编码306个氨基酸残基。该基因与已报道的来自菌株S.yanoikuyae B1和Sphingomonas sp.KMG425的xylE基因(编码产物均为C230)具有较高的核酸序列同源性,分别为94.37%和94.05%。通过HindⅢ和XhoⅠ两个限制性酶切位点将该基因连接到质粒pET30(a)+上得到重组表达质粒pET-S3,并在E.coli BL21进行了表达,得到了42.3 kD的融合蛋白。酶活测定发现该基因工程菌株的发酵产酶活力明显高于出发菌株。
关键词
菲降解
少动鞘氨醇单胞菌
儿茶
酚
2
3-
双
加氧酶
基因
Keywords
Phenanthrene degradation
Sphingomonas paucimobilis
Catechol 2,3-dioxygenase gene
分类号
X172 [环境科学与工程—环境科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
儿茶酚双加氧酶基因大肠杆菌表达体系研究
熊爱生
彭日荷
耿其芳
李贤
范惠琴
姚泉洪
《上海农业学报》
CSCD
2003
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
少动鞘氨醇单胞菌ZX4儿茶酚2，3-双加氧酶基因的克隆与表达
周德平
吴淑杭
闵航
姜震方
《上海农业学报》
CSCD
2007
1
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职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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