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副溶血性弧菌免疫磁珠偶联条件优化及捕获性能评价 被引量:7
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作者 黄韵仪 胡连花 +3 位作者 孙力军 王雅玲 伍慧琦 刘阳 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期7-11,共5页
优化磁珠和副溶血性弧菌血清的偶联条件,并对其捕获性能进行评价。以考马斯亮蓝法测定磁珠偶联血清蛋白量,考察磁珠型号、粒径大小、活化剂的浓度、偶联温度、时间等对偶联效果的影响,并利用平板计数法评价免疫磁珠的捕获性能。选择S型... 优化磁珠和副溶血性弧菌血清的偶联条件,并对其捕获性能进行评价。以考马斯亮蓝法测定磁珠偶联血清蛋白量,考察磁珠型号、粒径大小、活化剂的浓度、偶联温度、时间等对偶联效果的影响,并利用平板计数法评价免疫磁珠的捕获性能。选择S型磁珠,活化剂采用EDC和NHS溶液(浓度均为0.005 g/L)各0.1 mL,25℃、24 h进行偶联,血清蛋白和磁珠结合效率最高;在优化的条件下制备的免疫磁珠能特异性富集副溶血性弧菌,最低检测限为5 cfu/100 mL。利用优化的条件可以明显提高磁珠与血清蛋白的结合效率,制备的免疫磁珠具有较好的特异性,其检测限和准确度都大幅提高,为副溶血性弧菌免疫磁珠试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 免疫磁珠 副溶血性弧菌 血清蛋白 偶联条件 富集
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大分子葡聚糖—牛血清蛋白抗原偶联物的制备与表征
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作者 方丽莎 谢珍茗 +1 位作者 梁达奉 余林 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期219-221,224,共4页
用还原胺化法制备大分子葡聚糖-牛血清蛋白(BSA)拟糖蛋白抗原,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结合考马斯亮蓝和过碘酸-品红两种染色方法验证偶联物的生成。考察不同反应条件(葡聚糖T40的氧化度,偶联pH,氧化葡聚糖和蛋白质的比值,偶联时间)... 用还原胺化法制备大分子葡聚糖-牛血清蛋白(BSA)拟糖蛋白抗原,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结合考马斯亮蓝和过碘酸-品红两种染色方法验证偶联物的生成。考察不同反应条件(葡聚糖T40的氧化度,偶联pH,氧化葡聚糖和蛋白质的比值,偶联时间)对偶联反应的影响。确定拟糖蛋白抗原的最佳偶联条件为:葡聚糖T40/氧化剂NaIO4=1/120(物质的量比),偶联溶液pH8.0,葡聚糖T40/BSA=1/1(物质的量比),偶联时间24h。并将此反应条件用于T10和T100拟糖蛋白抗原的合成。 展开更多
关键词 葡聚糖 拟糖蛋白 抗原 偶联条件
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