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题名双抗夹心酶免疫法检测转Bt基因抗虫棉种子的研究
被引量：3
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作者
孙硕
张坤
谭桂玉
曹振
南铁贵
王保民
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机构
中国农业大学农学与生物技术学院
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出处
《棉花学报》
CSCD
北大核心
2013年第1期45-50,共6页
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基金
转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08012-017B)
国家自然科学基金(31271649)
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文摘
应用中国农业大学化控中心筛选的抗Bt Cry1Ac蛋白鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了Bt Cry1Ac蛋白的双抗夹心酶联免疫检测法(Sandwich ELISA)。该方法的检测范围为0.78～50.0 ng.g-1,线性回归方程y=0.6634x-1.7387,决定系数为0.992。该方法与国外商业化试剂盒检测结果完全一致,可用于转基因抗虫棉Bt毒蛋白定性和定量检测。采用所建立的方法对亲本之一为非转基因抗虫棉的杂交F1、F2种子进行检测,结果 F1全部为阳性,F2阴性和阳性数量比为1∶3,符合性状分离定律;此外,模拟检测种子的偶然基因改造成分混杂(Adventitious Presence,AP)检测结果为:对于Bt毒蛋白含量在140 ng以上的单粒种子,最低检测比例为1∶110。
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关键词
转BT抗虫棉
双抗夹心酶免疫法
种子纯度
偶然基因改造成分混杂
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Keywords
transgenic Bt cotton
sandwich ELISA
seed purity
adventitious presence
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分类号
S562
[农业科学—作物学]
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