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信号转导和转录激活子5b(STAT5b)及其STAT5b基因的研究进展 被引量:1
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作者 赵秀华 李满雨 +1 位作者 许珊珊 刘国君 《黑龙江农业科学》 2014年第9期154-156,共3页
信号转导和转录激活子5b(STAT5b)是STATs家族的重要成员,在细胞内信号转导和转录激活中发挥关键的作用。STAT5b具有广泛的生物学效应,参与动物生长、繁殖、泌乳和代谢。为了对STAT5b及其STAT5b基因有一全面、深入的了解,综述了STAT5b基... 信号转导和转录激活子5b(STAT5b)是STATs家族的重要成员,在细胞内信号转导和转录激活中发挥关键的作用。STAT5b具有广泛的生物学效应,参与动物生长、繁殖、泌乳和代谢。为了对STAT5b及其STAT5b基因有一全面、深入的了解,综述了STAT5b基因的定位、STAT5b基因的结构、STAT5b的生物学功能以及STAT5b的表达、多态及遗传效应研究,该基因在动物生产性能方面,具有广阔的研究前景。 展开更多
关键词 信号转导和转录激活子5b 信号转导和转录激活子5b基因 生产性能
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水牛信号转导子和转录激活子1基因电子克隆及序列分析 被引量:8
2
作者 邓廷贤 庞春英 +3 位作者 陈明棠 王建 杨炳壮 梁贤威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第8期9-13,共5页
本研究运用生物信息学方法对水牛信号转导子和转录激活子1(signal transduction and activators of transcription1,STAT1)基因进行电子克隆及其序列分析。以牛STAT1基因序列作为探针电子克隆了水牛STAT1基因完整的编码序列并进行了RT-... 本研究运用生物信息学方法对水牛信号转导子和转录激活子1(signal transduction and activators of transcription1,STAT1)基因进行电子克隆及其序列分析。以牛STAT1基因序列作为探针电子克隆了水牛STAT1基因完整的编码序列并进行了RT-PCR验证。序列分析结果表明,水牛的STAT1基因序列长3437bp,包含1个2244bp的开发阅读框,共编码747个氨基酸。该基因cDNA编码区序列与普通牛、绵羊、人、猪、大鼠、小鼠和山羊同源性比对结果表明,其相似性分别为99%、98%、89%、93%、86%、85%和87%。经聚类分析结果表明,水牛与普通牛的分子进化关系最近。 展开更多
关键词 水牛 信号转导和转录激活子1基因 电子克隆 生物信息学
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信号转导与转录激活因子5的结构与功能研究进展 被引量:1
3
作者 付志玲 杨艳红 +6 位作者 李维 兰海楠 刘禹 郭风 赵雪 张辉 郑鑫 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第10期86-89,共4页
信号转导与转录激活子5(signal transducer and activator of transcription,STAT5)作为一种重要的信号转导与转录激活子,能被多种细胞因子和多肽类激素激活,引起靶基因的转录。参与调控细胞的增殖、分化及凋亡,并对生物体的生长、造血... 信号转导与转录激活子5(signal transducer and activator of transcription,STAT5)作为一种重要的信号转导与转录激活子,能被多种细胞因子和多肽类激素激活,引起靶基因的转录。参与调控细胞的增殖、分化及凋亡,并对生物体的生长、造血和免疫应答具有重要意义,其活性的高低与肿瘤的发生和发展关系密切。作者重点阐述了STAT5的结构和生物学功能。 展开更多
关键词 信号转导转录激活子5 结构 生物功能
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miRNA-155靶向Wnt5a调控转录激活子3信号通路在支气管哮喘发生发展中的作用 被引量:7
4
作者 梁音 张剑 +2 位作者 王新卫 刘新年 张海英 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第9期931-936,共6页
目的 miRNA-155在支气管哮喘中的作用及其机制研究较少,文章拟探讨miRNA-155通过靶向Wnt5a调控转录激活子3(STAT3)信号通路在大鼠支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-155表达抑... 目的 miRNA-155在支气管哮喘中的作用及其机制研究较少,文章拟探讨miRNA-155通过靶向Wnt5a调控转录激活子3(STAT3)信号通路在大鼠支气管哮喘发生发展中的作用。方法将SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、阴性对照组和miRNA-155表达抑制组,每组12只,正常对照组大鼠腹腔注射等渗盐水,阴性对照组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染NC拮抗物;miRNA-155表达抑制组大鼠在支气管哮喘模型建立后转染miRNA-155拮抗物;分别于转染后7 d麻醉处死,采用HE染色法观察肺组织损伤情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠肺组织miRNA-155、Wnt5a mRNA表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-155与Wnt5a的靶向关系;采用Western blot法检测各组大鼠肺组织Wnt5a、STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平;采用ELISA法分别检测肺组织匀浆IL-6、TNF-α表达水平。结果与正常对照组比较,阴性对照组大鼠肺功能指标FVC、FEV1及PEF均降低而FEV1/FVC升高(P<0.05),且miRNA-155表达水平升高,Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺功能均有不同程度的提高(P<0.05),miRNA-155表达水平降低(P<0.05),Wnt5a基因mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验分析结果显示,miRNA-155和Wnt5a能够靶向结合;与正常对照组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3的蛋白表达水平[(0.20±0.05)、(0.22±0.05)]相比,阴性对照组[(1.35±0.05)和(1.11±0.05)]和miRNA-155表达抑制组大鼠[(1.01±0.06)、(0.52±0.07)]均升高(P<0.05),miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织STAT3、p-STAT3蛋白表达水平较阴性对照组降低(P<0.05);与正常对照组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平[(95.92±8.78)、(88.99±8.12)pg/mL]相比,阴性对照组[(206.11±18.63)、(177.54±13.12)pg/mL]和miRNA-155表达抑制组[(156.17±9.55)、(131.94±9.25)pg/mL]均升高(P<0.05);与阴性对照组相比,miRNA-155表达抑制组大鼠肺组织IL-6、TNF-α表达水平降低(P<0.05)。结论 miRNA-155通过靶向Wnt5a激活STAT3信号通路促进支气管哮喘的发生发展。 展开更多
关键词 支气管哮喘 miRNA-155 WNT5A 信号转导和转录激活子3
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柴胡皂苷A通过调控NF-κB和STAT6信号通路影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能
5
作者 崔昭 束雅婷 +1 位作者 雷凡 彭美玉 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第18期2197-2210,共14页
目的研究柴胡皂苷A(saikosaponin A,SSA)对小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)M1/M2型巨噬细胞分化、凋亡和功能的影响,并探究其分子机制。方法体外诱导BMDM分别向M1/M2型巨噬细胞分化,并同时加入SSA处理后:CC... 目的研究柴胡皂苷A(saikosaponin A,SSA)对小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)M1/M2型巨噬细胞分化、凋亡和功能的影响,并探究其分子机制。方法体外诱导BMDM分别向M1/M2型巨噬细胞分化,并同时加入SSA处理后:CCK-8检测BMDM、M1/M2型巨噬细胞的活性;倒置荧光显微镜观察M1/M2型巨噬细胞形态;流式细胞术(flow cytometry,FCM)和ELISA法检测M1/M2型巨噬细胞表面标志物和细胞因子水平;实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)检测IL-6、TNF-α、精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)的mRNA水平;FCM检测腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球颗粒的能力;免疫组织荧光染色(immunofluorescence,IF)和Western blot检测SSA调控M1/M2型巨噬细胞的分子机制。结果SSA浓度在10.0 mg/L范围内对细胞活性无明显影响,SSA浓度15.0 mg/L时,M1/M2型巨噬细胞活性均受到明显抑制(P<0.01);10.0 mg/L SSA处理后的M1/M2型巨噬细胞形态发生变化,M1型巨噬细胞出现纺锤状或不规则形,少数细胞具有伪足,部分细胞边界不清;M2型巨噬细胞部分变为类圆形或者不规则形(P<0.001),边界不清楚。SSA处理后BMDM分化为M1/M2型巨噬细胞的比例均显著降低(P<0.05),且M1型巨噬细胞分泌IL-6、TNF-α的水平和其mRNA水平均显著降低(P<0.05),但M2型巨噬细胞分泌Arg-1和其mRNA水平均显著升高(P<0.05)。SSA可降低腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球颗粒的能力(P<0.01),且具有浓度依赖性。SSA可降低M1型巨噬细胞磷酸化核转录因子-κB(phosphorylation of NF-kappaB,p-NF-κB)(P<0.01),提高M2型巨噬细胞磷酸化信号转导和转录激活因子6(phosphorylation of signal transducer and activator of transcription 6,p-STAT6)(P<0.05)。结论SSA可能通过调控NF-κB和STAT6信号通路来影响M1/M2型巨噬细胞的分化和功能。 展开更多
关键词 柴胡皂苷A 骨髓源性巨噬细胞 细胞分化 核因子-Κb 信号转导和转录激活子6
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STATTAT5b基因多态性及其与京海黄鸡繁殖性状的相关分析 被引量:1
6
作者 赵秀华 王金玉 +2 位作者 李满雨 刘国君 许珊珊 《中国家禽》 北大核心 2015年第22期4-9,共6页
以信号转导和转录激活子5b(STAT5b)基因为候选基因,采用PCR-SSCP和DNA测序技术检测STAT5b基因在京海黄鸡、边鸡、尤溪麻鸡和AA鸡4个群体中的单核苷酸多态性(SNPs),并与京海黄鸡繁殖性状的相关性进行研究。结果表明,就STAT5b基因P1位点而... 以信号转导和转录激活子5b(STAT5b)基因为候选基因,采用PCR-SSCP和DNA测序技术检测STAT5b基因在京海黄鸡、边鸡、尤溪麻鸡和AA鸡4个群体中的单核苷酸多态性(SNPs),并与京海黄鸡繁殖性状的相关性进行研究。结果表明,就STAT5b基因P1位点而言,在4个鸡群体中检测到6种基因型(DD、DE、DF、EE、EF、FF)。克隆测序发现,与DD基因型相比EE和FF基因型中存在2个突变(A9221G、T9401C)。就P2位点而言,在4个鸡品种中检测到3种基因型(GG、GH和HH),克隆测序发现,与GG基因型比较HH基因型有3个突变(C11159T、T11183C和T11252C)。最小二乘分析结果显示,DF基因型的京海黄鸡300日龄产蛋数显著高于EE基因型的京海黄鸡个体(P<0.05),其他性状基因型间无差异(P>0.05);GG基因型京海黄鸡300日龄体重显著高于GH基因型的京海黄鸡个体(P<0.05),其他性状基因型间无差异(P>0.05)。单倍型分析产生8种单倍型,10种单倍型组合。单倍型组合H1H3和H1H8京海黄鸡个体300日龄产蛋数最多;单倍型组合H1H7京海黄鸡个体300日龄蛋重最大;H1H1单倍型组合京海黄鸡个体300日龄体重最高。因此,推测STAT5b基因P1、P2位点对京海黄鸡繁殖性状有一定影响。 展开更多
关键词 京海黄鸡 信号转导和转录激活子5b(STAT5b) PCR—SSCP 多态性 繁殖性状
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酵母菌胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶基因治疗系统对K562B细胞杀伤效应的初步研究 被引量:1
7
作者 张雨生 王健民 翟勇平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期166-169,共4页
目的 :克隆酵母菌胞嘧啶脱氨酶 (YCD)基因 ,观察 YCD/ 5氟胞嘧啶 (YCD/ 5 - FC)系统对转基因肿瘤细胞的杀伤效应。 方法 :扩增 YCD基因并构建 YCD基因重组逆转录病毒载体 ;载体转染包装细胞获得高滴度病毒并转染高致瘤细胞K5 6 2 B,筛... 目的 :克隆酵母菌胞嘧啶脱氨酶 (YCD)基因 ,观察 YCD/ 5氟胞嘧啶 (YCD/ 5 - FC)系统对转基因肿瘤细胞的杀伤效应。 方法 :扩增 YCD基因并构建 YCD基因重组逆转录病毒载体 ;载体转染包装细胞获得高滴度病毒并转染高致瘤细胞K5 6 2 B,筛选并鉴定阳性转基因克隆 ;以 MTT法检测 5 - FC对 YCD转基因细胞的杀伤效应 ,测定转基因细胞裂解产物对5 - FC→ 5 - FU的转化。结果 :PCR法扩增出全长 YCD基因 ,经测序证实序列正确 ;构建了 MSCV - YCD- IRES- EGFP逆转录病毒载体 ,载体转染包装细胞Ф NX- A,获得滴度为 3.5× 10 6 CFU / m l的逆转录病毒 ;病毒转染 K5 6 2 B,转染率为 30 % ,经筛选获得转基因阳性克隆 YCD- K 5 6 2 B,RT- PCR检测显示 YCD- K5 6 2 B有 YCD基因的 m RNA表达 ,其细胞裂解产物可使 5 - FC转化为 5 - FU,表明其有 CD酶活性 ;MTT法检测低浓度 5 - FC(15μmol/ L )作用 96 h对 YCD- K5 6 2 B有明显的杀伤效应。 结论 :YCD/ 5 - FC系统对转基因肿瘤细胞有明显的杀伤效应。 展开更多
关键词 酵母菌胞嘧啶脱氨酶 5-氟胞嘧啶 白血病 杀伤效应 转录病毒载体 基因治疗 K562b细胞
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丙型肝炎病毒NS5B基因的克隆及在大肠杆菌的分泌表达 被引量:5
8
作者 张跃红 段惠娟 鞠连才 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期696-698,共3页
由于全长丙型肝炎病毒NS5B的疏水性 ,其表达和纯化非常困难。为了分泌表达NS5B ,作者对NS5B进行截短 ,缺失其疏水部分从而在大肠杆菌细胞中分泌表达HCVNS5B基因 ,并测定其活性。用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)的方法 ,设计截去NS5B疏水... 由于全长丙型肝炎病毒NS5B的疏水性 ,其表达和纯化非常困难。为了分泌表达NS5B ,作者对NS5B进行截短 ,缺失其疏水部分从而在大肠杆菌细胞中分泌表达HCVNS5B基因 ,并测定其活性。用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)的方法 ,设计截去NS5B疏水部分 ,PCR引物以HCV全长质粒pBRTM/HCV 1为模板 ,克隆到pGEM Teasy载体中 ,双酶切后回收连接到pET 2 1b中表达。大肠杆菌培养上清过柱纯化 ,进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western免疫印迹分析 ,并用液闪近端分析 (SPA)法分析NS5BRdRp活性。成功地构建了NS5B基因大肠杆菌表达载体 ,Western免疫印迹显示NS5B蛋白在大肠杆菌细胞中表达。表达产物在大肠杆菌培养上清中存在 ,分子量 6 8kD左右 ,而且 [3 H]总掺入率达 6 90 0cpm。NS5B蛋白在大肠杆菌上清中表达成功 ,经过活性测定 。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 NS5b基因 大肠杆菌 基因表达 转录多聚酶链反应
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基于核转录因子-κB信号通路探讨针灸四关穴治疗偏头痛的机制 被引量:39
9
作者 梁晓瑜 张中平 谭景斐 《世界中医药》 CAS 2020年第8期1205-1209,共5页
目的:基于核转录因子-κB信号通路(NF-κB)探讨针灸四关穴治疗偏头痛疗效。方法:选取2018年2月至2019年2月广州中医药大学祈福医院收治的偏头痛患者114例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组57例。对照组采用常... 目的:基于核转录因子-κB信号通路(NF-κB)探讨针灸四关穴治疗偏头痛疗效。方法:选取2018年2月至2019年2月广州中医药大学祈福医院收治的偏头痛患者114例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组57例。对照组采用常规西药治疗,观察组在常规西药治疗的基础上加用针灸四关穴治疗,均治疗4周。比较2组症状积分、临床疗效、NF-κB信号通路及其相关指标变化。结果:治疗后2组降钙素原基因相关肽(CGRP)、VAS评分、症状持续时间、发作频率、NF-κB、环氧合酶抑制剂(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、大脑前动脉(ACA)、大脑中动脉(MCA)、大脑后动脉(PCA)、椎动脉(VA)、基底动脉(BA)平均血流速度均较治疗前下降,差异均有统计学意义(P<0.05),而β-内啡肽(β-EP)和5-羟色胺(5-HT)均较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且观察组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率为87.72%,高于对照组的71.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:四关穴能改善NF-κB信号通路,改善大脑动脉血流速度,从而改善偏头痛症状。 展开更多
关键词 转录因子-κb信号通路 针灸 四关穴 偏头痛 降钙素原基因相关肽 5-羟色胺 大脑血流速度 疗效
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5-氮杂-2-脱氧胞苷和曲古抑菌素A对胃癌MGMT基因表达及NF-κB活性的影响 被引量:1
10
作者 孟兰 程民 +6 位作者 沈国栋 徐婷娟 刘林青 唐杨琛 韩晓青 沈干 胡世莲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期1370-1375,共6页
目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对不同分化程度的人胃癌MKN-45和MGC-803细胞系增殖、凋亡,抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-Methylguanine-DNA Methyltrans... 目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)和曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对不同分化程度的人胃癌MKN-45和MGC-803细胞系增殖、凋亡,抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-Methylguanine-DNA Methyltransferase,MGMT)甲基化水平及其核转录因子NF-κB磷酸化程度影响。方法利用CCK-8、流式细胞术、MSP、RT-PCR、Western blot等方法检测5-Aza-dC(10μmol/L)、TSA(1μmol/L)单独或联合刺激后,MKN-45和MGC-803细胞增殖、凋亡,MGMT甲基化、mRNA、蛋白表达水平及NF-κB p65蛋白的磷酸化程度。结果①5-Aza-dC、TSA单独或联合使用均可抑制MKN-45和MGC-803细胞的生长,与单药组相比,联合用药组抑制作用更明显(P<0.05);②5-Aza-dC及TSA均可促进MKN-45和MGC-803细胞的凋亡,联合用药组凋亡率[(8.43±1.80)%和(21.75±3.06)%]均明显高于5-Aza-dc组[(7.33±1.18)%、(15.22±1.03)%]和TSA组[(3.53±1.18)%、(12.66±1.10)%](P<0.05);③5-AzadC、TSA单独或联合刺激均可逆转MGMT基因甲基化,使其mRNA及蛋白表达水平上调,联合用药作用更加明显(P<0.05);④NF-κB活性高表达的MKN-45和MGC-803经5-Aza-dC和TSA处理后细胞的NF-κB活性降低,且联合用药组[(12.81±4.18)%和(9.08±2.66)%]抑制程度较5-Aza-dc组[(39.13±3.38)%、(34.90±4.89)%]和TSA组[(27.55±5.00)%、(22.11±3.07)%]更加明显(P<0.05)。结论 5-Aza-dC与TSA均可抑制胃癌细胞生长和促进细胞凋亡,逆转MGMT基因甲基化反应,提高基因表达和抑制NF-κB的活性,二药联合作用提示效果更加明显。 展开更多
关键词 胃癌 5-氮杂-2-脱氧胞苷 曲古抑菌素A MGMT基因 转录因子-Κb
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5-氮杂-2-脱氧胞苷联合曲古抑菌素A对胃癌细胞SGC-7901MGMT表达及NF-κB活性的影响 被引量:2
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作者 孟兰 程民 +6 位作者 沈国栋 徐婷娟 刘林青 唐杨琛 韩晓青 沈干 胡世莲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期244-250,共7页
目的研究5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycitydine,5-Aza-dC)及曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖、凋亡及移植瘤生长的影响,从体内、体外观察抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达,核转... 目的研究5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycitydine,5-Aza-dC)及曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖、凋亡及移植瘤生长的影响,从体内、体外观察抑癌基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达,核转录因子NF-κB活性的改变,探讨5-Aza-dC联合TSA用于胃癌临床治疗的可行性。方法实验分对照组、5-Aza-dC组、TSA组和5-Aza-dC联合TSA组,利用CCK-8增殖试剂盒检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡,RT-PCR检测各组MGMT mRNA表达,Western blot检测MGMT、NF-κB p65蛋白表达及NF-κB p65的磷酸化水平。结果 5-Aza-dC、TSA单独处理均可抑制SGC-7901细胞的生长和促进其凋亡,联合用药后效果更明显(P<0.05);与对照组相比,单药组移植瘤变化没有统计学意义(P>0.05),而联合用药组较单药组移植瘤变小;5-Aza-dC、TSA单独或联合处理SGC-7901细胞和裸鼠移植瘤后,与对照组比较,MGMT基因mRNA及蛋白表达水平均上调,联合用药比单独用药升高明显,NF-κB p65在各处理组中的表达量未发生变化,但其磷酸化程度较对照组下降,联合用药较单药下降更明显(P<0.05)。结论 5-Aza-dC与TSA发挥抑制胃癌生长的作用可能是通过抑制NF-κB的活性,提高MGMT基因的转录和表达而实现的,两药联合使用的抗癌效果更加明显。 展开更多
关键词 胃癌 细胞系 SGC-7901 5-氮杂-2-脱氧胞苷 曲古抑菌素A MGMT基因 转录因子κb
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黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达 被引量:1
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作者 杨凯 潘颖 +4 位作者 刘萍 宇芙蓉 魏晓康 张发苏 王琴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期704-709,共6页
目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达... 目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达;采用MxA小干涉RNA(si-MxA)转染HepG2细胞并以α干扰素(IFN-α)处理细胞,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞黏液病毒抗性蛋白A(MxA)、蛋白激酶R(PKR)和寡聚腺苷酸合成酶(OAS)的mRNA表达,Western blot法检测MxA、PKR、OAS、细胞信号转导子与转录激活子1(STAT1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)、STAT2、p-STAT2和干扰素调节因子9(IRF9)的蛋白表达。此外,pcDNA3.1-Flag-MxA与pISRE-TA-luc分别共转染至HepG2和HepG2.2.15细胞,荧光素酶活性检测干扰素刺激应答元件(ISRE)活性。结果MxA蛋白在HepG2细胞质和细胞核均有表达且细胞质表达量高于胞核。敲低HepG2细胞中MxA表达虽不影响IFN-α诱导的STAT1、p-STAT1、STAT2、p-STAT2和IRF9蛋白的表达,但显著降低抗病毒蛋白PKR和OAS的表达。过表达MxA的HepG2细胞ISRE活性增强且PKR和OAS蛋白表达增高,但这种效应却在HepG2.2.15细胞中被抑制。结论MxA通过增强JAK/STAT信号通路ISRE活性诱导抗病毒蛋白表达。 展开更多
关键词 黏病毒抗性蛋白A(MxA) Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT) 干扰素刺激应答元件(ISRE) 干扰素刺激基因(ISG)
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STAT5基因对乳腺发育及泌乳性状的影响研究进展
13
作者 张广乐 苗永旺 《中国牛业科学》 2020年第2期61-66,共6页
信号转导与转录激活因子5(signal transducer and activator of transcription5,STAT5)是受细胞外的细胞因子、生长因子和激素调控的重要转录激活因子,在动物各组织器官中都有所表达,作用广泛。STAT5与β-酪蛋白的启动子有2个特异性结... 信号转导与转录激活因子5(signal transducer and activator of transcription5,STAT5)是受细胞外的细胞因子、生长因子和激素调控的重要转录激活因子,在动物各组织器官中都有所表达,作用广泛。STAT5与β-酪蛋白的启动子有2个特异性结合位点,参与了催乳素作用下的乳腺发育以及乳汁的形成。文章综述了STAT5基因的结构和作用机制,该基因在乳腺中的表达和功能以及其多态性对泌乳性状的影响。 展开更多
关键词 信号转导转录激活因子5 调控机制 表达及功能 基因多态性
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LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡 被引量:3
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作者 樊翠 张娅薇 +3 位作者 杨蕊 吴肖婕 周嘉迪 薛江楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期207-214,共8页
目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以... 目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨髓增殖性肿瘤 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1) JAK2 V617F突变 Janus激酶(JAK) 信号转导子与转录激活子(STAT) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 蛋白激酶b(AKT)
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黄酮类中药单体对多囊卵巢综合征信号通路的调控作用
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作者 冀凡 司振民 +4 位作者 刘承东 韩延华 黄志超 吴效科 常惠 《世界中医药》 北大核心 2024年第23期3709-3717,共9页
多囊卵巢综合征(PCOS)是女性常见的生殖代谢紊乱性疾病,严重危害育龄期女性健康。中药单体是从传统中药中提取的天然有机化合物,具有多重生物活性。近年来研究发现,黄酮类中药单体通过调控PCOS的多条信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B... 多囊卵巢综合征(PCOS)是女性常见的生殖代谢紊乱性疾病,严重危害育龄期女性健康。中药单体是从传统中药中提取的天然有机化合物,具有多重生物活性。近年来研究发现,黄酮类中药单体通过调控PCOS的多条信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、Janus激酶/信号转导与转录激活子(JAK/STAT)、AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)、核因子kappa-B(NF-κB)等发挥抗炎、抗氧化、免疫增强及激素调节的作用;此外,黄酮类中药单体还能减轻胰岛素抵抗、改善糖脂代谢,并减轻卵巢炎症和纤维化等损伤,从而达到治疗PCOS及其并发症的目的。 展开更多
关键词 黄酮类中药单体 多囊卵巢综合征 信号通路 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶b信号通路 Janus激酶/信号转导转录激活子信号通路 AMP依赖的蛋白激酶信号通路 促分裂原活化的蛋白激酶信号通路 核因子kappa-b信号通路
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JAK/STAT通路在脂多糖诱导肝细胞HMGB1释放中的作用 被引量:6
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作者 张健 帅朝霞 +3 位作者 胡志刚 王春新 袁劲松 陈国千 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1514-1516,1533,共4页
目的:探讨Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)信号通路在内毒素脂多糖诱导肝细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放中的作用。方法:观察100μg/L脂多糖诱导后,大鼠肝细胞BRL-3A细胞HMGB1 mRNA表达水平和细胞培养上清液中HMGB1含量的变... 目的:探讨Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)信号通路在内毒素脂多糖诱导肝细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放中的作用。方法:观察100μg/L脂多糖诱导后,大鼠肝细胞BRL-3A细胞HMGB1 mRNA表达水平和细胞培养上清液中HMGB1含量的变化,及不同浓度的JAK/STAT通路抑制剂tyrphostin AG490、氟达拉滨的影响。结果:脂多糖诱导BRL-3A细胞24h后HMGB1 mRNA表达水平和培养上清液中HMGB1含量明显升高(P<0.01),25μmol/L tyrphostin AG490和50μmol/L氟达拉滨对以上2个指标显示一定程度的抑制作用(P<0.05)。结论:内毒素脂多糖可诱导肝细胞HMGB1的表达和释放,其机制可能与细胞JAK/STAT信号通路有关。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白b1 肝细胞 内毒素 JANUS激酶 信号转导和转录激活子
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GRIM-19及其靶基因产物STAT3在胃癌组织中的表达及其意义 被引量:8
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作者 张照果 李静 +3 位作者 刘岩 李道磊 于世勇 梁晓芳 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期499-504,F0003,共7页
目的:探讨维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因-19(GRIM-19)及其靶基因产物STAT3在胃癌组织中的表达及其临床意义,阐明其在胃癌发生和发展过程中的作用。方法:应用RT-PCR、免疫组织化学染色法和Western blotting法检测48例胃癌组织、癌旁组... 目的:探讨维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因-19(GRIM-19)及其靶基因产物STAT3在胃癌组织中的表达及其临床意义,阐明其在胃癌发生和发展过程中的作用。方法:应用RT-PCR、免疫组织化学染色法和Western blotting法检测48例胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织中GRIM-19和STAT3的mRNA及蛋白表达水平,并分析其蛋白的表达情况与临床病理特征的关系。结果:GRIM-19 mRNA及蛋白表达水平在胃癌及癌旁组织较正常胃组织表达减弱(P<0.01),且GRIM-19蛋白表达水平与胃癌分化程度和临床分期有关联(P<0.01);STAT3 mRNA及蛋白表达水平在胃癌及癌旁组织较正常胃组织表达增强(P<0.01),且STAT3蛋白表达水平与胃癌分化程度、淋巴结转移及临床分期有关联(P<0.01);GRIM-19与STAT3在胃癌组织中表达水平呈负相关关系(r=-0.396,P<0.01)。结论:在胃癌组织中有STAT3持续高表达和GRIM-19低表达共存现象,可能与正常细胞发生恶性转化和异常增殖有关,促进了胃癌的发生和发展。 展开更多
关键词 胃肿瘤 维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因-19 转录信号传导子与激活子3 信号转导通路
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JAK2/STAT5通路在胰岛对妊娠适应中的作用 被引量:1
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作者 陈焕珍 王晓 +4 位作者 李凤英 聂爱芳 刘赟 李果 罗敏 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期555-559,共5页
目的探讨妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能增强的机制。方法以妊娠15 d的SD大鼠(实验组,n=24)和同批次未妊娠的雌性SD大鼠(对照组,n=24)作为实验对象。通过原位灌注胰岛分离的方法获得单个胰岛,用胰酶消化胰岛,形成单个细胞,原代分离的胰岛加入... 目的探讨妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能增强的机制。方法以妊娠15 d的SD大鼠(实验组,n=24)和同批次未妊娠的雌性SD大鼠(对照组,n=24)作为实验对象。通过原位灌注胰岛分离的方法获得单个胰岛,用胰酶消化胰岛,形成单个细胞,原代分离的胰岛加入含5.6 mmol/L葡萄糖和15%FBS的DMEM培养基终止消化,用含2.8 mmol/L葡萄糖(对照)或5.6 mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液培养1 h,利用全细胞膜片钳记录B细胞膜电压依赖型钾通道(Kv)电流。采用Real-Time PCR技术测定胰岛JAK2/STAT5通路的关键分子催乳素受体(PRLR)、Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK2)、信号转导和转录激活子5(STAT5A和STAT5B)、葡萄糖代谢的关键分子葡萄糖转运体2(GLUT2)、葡萄糖激酶(GK),以及胰岛素分泌相关的分子ATP敏感性钾通道(KATP)、电压依赖性钙通道(VDCC)mRNA的表达。结果在10~60 mV膜电压条件下,实验组大鼠在5.6 mmol/L葡萄糖刺激下,胰岛单个B细胞细胞膜Kv电流显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠胰岛组织PRLR、JAK2、STAT5A、STAT5B、GLUT2、VDCC、KATPmRNA的相对表达量上调,分别为对照组的2.50、1.84、1.54、2.45、1.41、1.68、1.55倍(P<0.05或P<0.01),两组大鼠胰岛组织GK mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论妊娠中晚期SD大鼠胰岛功能增强可能与催乳素促进JAK2/STAT5通路、葡萄糖代谢及胰岛素分泌相关分子的表达有关,为糖尿病的治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 糖尿病 妊娠 胰岛 分泌 蛋白酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活子5通路
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促红细胞生成素B螺旋结构缩氨酸对大鼠心肌缺血损伤的影响
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作者 曹建 王媛媛 +2 位作者 熊云飞 胡衍辉 徐国海 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期801-803,共3页
目的探讨促红细胞生成素(rhEPO)B螺旋结构缩氨酸(pHBP)对大鼠心肌缺血损伤的影响及其机制。方法采用结扎冠状动脉前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型。90只大鼠随机分为四组:假手术组(A组,n=10)、AMI组(C组,n=20)、rhEPO组(G组,... 目的探讨促红细胞生成素(rhEPO)B螺旋结构缩氨酸(pHBP)对大鼠心肌缺血损伤的影响及其机制。方法采用结扎冠状动脉前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型。90只大鼠随机分为四组:假手术组(A组,n=10)、AMI组(C组,n=20)、rhEPO组(G组,n=30)和pHBP组(E组,n=30)。建模后注射rhEPO、pHBP,24h后通过TCC染色测量MI面积。术后3、24h,Western blot法检测信号转导子与转录激活子3(STAT3)蛋白表达。8周后,通过超声心动图测量左心室舒张期末容积(LVEDV)、左心室收缩期末容积(LVESV)和左心室射血分数(EF)。结果与C组比较,E、G组MI面积明显减小(P<0.05)。与A组比较,E、G组STAT3蛋白表达明显增高(P<0.05)。与A组比较,E组和G组LVEDV和LVESV明显升高,EF明显降低(P<0.01)。与C组比较,E组和G组LVEDV和LVESV明显降低,EF明显升高(P<0.05)。结论 pHBP在大鼠心肌缺血损伤中具有心脏保护作用,其保护机制可能与其抑制心肌细胞凋亡和促进新生血管形成有关。 展开更多
关键词 促红细胞生成素b螺旋结构缩氨酸 心肌缺血 信号转导子与转录激活子3
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缺氧诱导肺泡巨噬细胞HMGB1的释放及其可能机制 被引量:2
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作者 陈爽 李蕾 +5 位作者 刘洁 吴国荣 胡志刚 王琼 陈静瑜 陈国千 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1597-1599,共3页
目的:研究缺氧对肺泡巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)释放的作用及其信号通路。方法:采用大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,观察不同时间缺氧培养对细胞HMGB1 mRNA表达和培养上清液中HMGB1含量的影响,及不同浓度JAK2... 目的:研究缺氧对肺泡巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)释放的作用及其信号通路。方法:采用大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,观察不同时间缺氧培养对细胞HMGB1 mRNA表达和培养上清液中HMGB1含量的影响,及不同浓度JAK2抑制剂tyrphostin AG 490和STAT1抑制剂氟达拉滨对HMGB1释放的抑制作用。HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测。结果:培养上清液中HMGB1含量和mRNA表达水平分别于缺氧培养6、12 h后明显升高(P<0.01),并随缺氧培养时间延长而进一步升高和增强;tyrphostin AG 490和氟达拉滨对缺氧培养肺泡巨噬细胞释放HMGB1有不完全的抑制作用,并呈剂量依赖性。结论:缺氧诱导肺泡巨噬细胞释放HMGB1,JAK/STAT信号通路可能参与其释放过程。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白b1 巨噬细胞 缺氧 信号转导和转录激活子
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