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N端延伸的人肠生长激素类似物基因的合成、克隆及融合表达
被引量：
3
1
作者
李泰明
胡卓逸
+3 位作者
刘景晶
马小驹
周慧
闵伟伟
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期373-377,共5页
目的:合成、克隆及融合表达N端延伸2个Pro,并由Gly取代N端第2个氨基酸Ala的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,初步测定其促肠生长的生物学活性。方法:合成长度分别为53,54及53个碱基的三段寡核苷酸,以中段寡核苷酸为模板,两端寡核苷...
目的:合成、克隆及融合表达N端延伸2个Pro,并由Gly取代N端第2个氨基酸Ala的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,初步测定其促肠生长的生物学活性。方法:合成长度分别为53,54及53个碱基的三段寡核苷酸,以中段寡核苷酸为模板,两端寡核苷酸为引物,经PCR合成PP-h[Gly2]GLP-2基因,克隆于pUC18载体。经测序正确后,将该基因与融合表达载体pED连接构建融合表达质粒pEDGLP-2,转化E.coliBL21(DE3),进行诱导表达,用SDS-PAGE分析。融合蛋白经分离纯化和酸切割后,分离获得PP-h[Gly2]GLP-2,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量,并对雄性SD大鼠皮下给药14 d,初步测定其促肠生长活性。结果:诱导后融合蛋白表达量占菌体可溶性总蛋白的40%以上。电喷雾质谱法测得:经酸切割获得的PP-h[Gly2]GLP-2的相对分子质量为3 947.97 Da,与预测值3 947.38 Da基本一致。初步动物实验结果显示,0.5 mg/(kg.d)剂量组小肠增重百分比为41.65%,与PBS组相比具有显著差异。结论:制备获得的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,与设计的相对分子质量一致,有明显的促肠生长活性。
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关键词
人
肠
生长
激素类似物
融合表达
促肠生长活性
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题名
N端延伸的人肠生长激素类似物基因的合成、克隆及融合表达
被引量：
3
1
作者
李泰明
胡卓逸
刘景晶
马小驹
周慧
闵伟伟
机构
中国药科大学生命科学与技术学院
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期373-377,共5页
基金
国家高技术研究发展计划("八六三"计划)资助项目(No.2002AA217031-2)
国家自然科学基金资助项目(No.30270298)
+1 种基金
江苏省自然科学基金资助项目(No.BK95092309)
江苏省社会发展基金助项目(No.BG2001011)~~
文摘
目的:合成、克隆及融合表达N端延伸2个Pro,并由Gly取代N端第2个氨基酸Ala的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,初步测定其促肠生长的生物学活性。方法:合成长度分别为53,54及53个碱基的三段寡核苷酸,以中段寡核苷酸为模板,两端寡核苷酸为引物,经PCR合成PP-h[Gly2]GLP-2基因,克隆于pUC18载体。经测序正确后,将该基因与融合表达载体pED连接构建融合表达质粒pEDGLP-2,转化E.coliBL21(DE3),进行诱导表达,用SDS-PAGE分析。融合蛋白经分离纯化和酸切割后,分离获得PP-h[Gly2]GLP-2,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量,并对雄性SD大鼠皮下给药14 d,初步测定其促肠生长活性。结果:诱导后融合蛋白表达量占菌体可溶性总蛋白的40%以上。电喷雾质谱法测得:经酸切割获得的PP-h[Gly2]GLP-2的相对分子质量为3 947.97 Da,与预测值3 947.38 Da基本一致。初步动物实验结果显示,0.5 mg/(kg.d)剂量组小肠增重百分比为41.65%,与PBS组相比具有显著差异。结论:制备获得的人肠生长激素类似物PP-h[Gly2]GLP-2,与设计的相对分子质量一致,有明显的促肠生长活性。
关键词
人
肠
生长
激素类似物
融合表达
促肠生长活性
Keywords
Human gut growth hormone analogue
Fusion expression
Intestinotrophic activities
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
N端延伸的人肠生长激素类似物基因的合成、克隆及融合表达
李泰明
胡卓逸
刘景晶
马小驹
周慧
闵伟伟
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
3
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