利用DNA重组技术在柞蚕蛹中表达重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO),经过亲和层析纯化后,用SDS-PAGE分离纯化各组分,并通过电喷雾电离串联质谱技术(ESI-MS/MS)检测其糖基化修饰.结果显示,在柞蚕蛹中表达的rh...利用DNA重组技术在柞蚕蛹中表达重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO),经过亲和层析纯化后,用SDS-PAGE分离纯化各组分,并通过电喷雾电离串联质谱技术(ESI-MS/MS)检测其糖基化修饰.结果显示,在柞蚕蛹中表达的rhEPO比活性约为1190 U/μg,其糖基化修饰位点与人体表达的EPO一致,有3个N-糖基化位点和1个O-糖基化位点.凝集素杂交实验结合质谱结果表明,柞蚕蛹表达的rhEPO的糖链中缺乏唾液酸修饰,而缺少唾液酸修饰的EPO通过鼻腔给药后在多种神经系统疾病的治疗中发挥着重要的作用.所得结果为进一步研究外源蛋白在柞蚕蛹-柞蚕核型多角体病毒(Anthraea pernyi nucleopolyhedrorirus,ApNPV)宿主载体表达系统表达后的糖基化与生物活性提供了依据.展开更多
目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)预处理对大鼠急性高眼压视网膜损伤的保护作用及其机制。方法:选用健康成年雄性Wistar大鼠36只,随机分为正常组4只(不做任何处理直接处死),生理盐水组16只(造模...目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)预处理对大鼠急性高眼压视网膜损伤的保护作用及其机制。方法:选用健康成年雄性Wistar大鼠36只,随机分为正常组4只(不做任何处理直接处死),生理盐水组16只(造模前3hip生理盐水),rhEPO组16只(造模前3hiprhEPO)。采用生理盐水前房加压灌注法升高大鼠眼压至100mmHg并维持60min,于造模成功后6,24,48,72h分别处死动物摘取眼球制作视网膜石蜡切片。HE染色观察视网膜组织的形态学改变;分别采用TUNEL法和免疫组化法观测凋亡细胞和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)在视网膜中的表达和分布,并利用计算机图像分析系统量化检测指标,进行统计学分析。结果:急性高眼压造成大鼠视网膜损伤,生理盐水组大鼠视网膜内层变薄,所占整个视网膜的百分比较正常组下降,rhEPO组视网膜内层所占百分比较生理盐水组大,差异有统计学意义(P<0.01);正常组大鼠视网膜未见TUNEL阳性细胞,生理盐水组和rhEPO组在神经节细胞层、内核层均可见TUNEL阳性凋亡细胞,但rhEPO组与生理盐水组比较,TUNEL阳性细胞减少,差异有统计学意义(P<0.01)。正常组视网膜p-Akt有弱表达,生理盐水组和rhEPO组在神经节细胞层、内网层、内核层均可见p-Akt阳性细胞,但rhEPO组比生理盐水组表达增强,差异有统计学意义(P<0.01)。神经节细胞层与内核层p-Akt的表达较内网层强。结论:rhEPO预处理可减弱高眼压对视网膜造成的损伤,减少和延缓细胞凋亡的发生,其可能的机制是通过激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号传导通路上调p-Akt来抑制凋亡的发生。展开更多
目的 :评价术前应用重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)对降低老年股骨粗隆间骨折择期手术患者围手术期输血的作用。方法:回顾性分析自2011年1月至2013年12月收治的老年股骨粗隆间骨折患者442例,根据纳...目的 :评价术前应用重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)对降低老年股骨粗隆间骨折择期手术患者围手术期输血的作用。方法:回顾性分析自2011年1月至2013年12月收治的老年股骨粗隆间骨折患者442例,根据纳入及排除标准,最终入选119例。其中治疗组52例,男12例,女40例,平均年龄(71.4±12.8)岁,术前接受r Hu EPO 10 000 U(隔日1次)加右旋糖酐铁200 mg(每日3次);对照组67例,男16例,女51例,平均年龄(70.9±16.2)岁,术前仅接受右旋糖酐铁200 mg(每日3次)。所有患者采用PFNA-Ⅱ(辛迪思公司)或Intertan(施乐辉公司)在闭合复位下固定骨折,观察两组患者围手术期输血率、平均输血量、术后并发症、住院时间及30 d内死亡率。结果:119例中71例围手术期接受了至少1 U(200 ml)异体血输入。治疗组围手术期输血率48.1%,低于对照组的68.7%(χ2=4.77,P<0.05);治疗组平均输血量(1.8±0.4)U/pte,低于对照组的(3.6±1.1)U/pte(t=2.244,P<0.05)。治疗组术后1周及30 d血红蛋白水平高于对照组,且治疗组术后30 d较入院时血红蛋白水平高。两组术后血栓事件、术后感染发生率及住院时间比较差异无统计学意义。结论:对于择期手术的老年股骨粗隆间骨折患者,术前应用r Hu EPO可降低围手术期输血率及平均输血量,但其长期安全性仍有待评价。展开更多
文摘目的:探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)预处理对大鼠急性高眼压视网膜损伤的保护作用及其机制。方法:选用健康成年雄性Wistar大鼠36只,随机分为正常组4只(不做任何处理直接处死),生理盐水组16只(造模前3hip生理盐水),rhEPO组16只(造模前3hiprhEPO)。采用生理盐水前房加压灌注法升高大鼠眼压至100mmHg并维持60min,于造模成功后6,24,48,72h分别处死动物摘取眼球制作视网膜石蜡切片。HE染色观察视网膜组织的形态学改变;分别采用TUNEL法和免疫组化法观测凋亡细胞和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)在视网膜中的表达和分布,并利用计算机图像分析系统量化检测指标,进行统计学分析。结果:急性高眼压造成大鼠视网膜损伤,生理盐水组大鼠视网膜内层变薄,所占整个视网膜的百分比较正常组下降,rhEPO组视网膜内层所占百分比较生理盐水组大,差异有统计学意义(P<0.01);正常组大鼠视网膜未见TUNEL阳性细胞,生理盐水组和rhEPO组在神经节细胞层、内核层均可见TUNEL阳性凋亡细胞,但rhEPO组与生理盐水组比较,TUNEL阳性细胞减少,差异有统计学意义(P<0.01)。正常组视网膜p-Akt有弱表达,生理盐水组和rhEPO组在神经节细胞层、内网层、内核层均可见p-Akt阳性细胞,但rhEPO组比生理盐水组表达增强,差异有统计学意义(P<0.01)。神经节细胞层与内核层p-Akt的表达较内网层强。结论:rhEPO预处理可减弱高眼压对视网膜造成的损伤,减少和延缓细胞凋亡的发生,其可能的机制是通过激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号传导通路上调p-Akt来抑制凋亡的发生。
文摘目的 :评价术前应用重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,r Hu EPO)对降低老年股骨粗隆间骨折择期手术患者围手术期输血的作用。方法:回顾性分析自2011年1月至2013年12月收治的老年股骨粗隆间骨折患者442例,根据纳入及排除标准,最终入选119例。其中治疗组52例,男12例,女40例,平均年龄(71.4±12.8)岁,术前接受r Hu EPO 10 000 U(隔日1次)加右旋糖酐铁200 mg(每日3次);对照组67例,男16例,女51例,平均年龄(70.9±16.2)岁,术前仅接受右旋糖酐铁200 mg(每日3次)。所有患者采用PFNA-Ⅱ(辛迪思公司)或Intertan(施乐辉公司)在闭合复位下固定骨折,观察两组患者围手术期输血率、平均输血量、术后并发症、住院时间及30 d内死亡率。结果:119例中71例围手术期接受了至少1 U(200 ml)异体血输入。治疗组围手术期输血率48.1%,低于对照组的68.7%(χ2=4.77,P<0.05);治疗组平均输血量(1.8±0.4)U/pte,低于对照组的(3.6±1.1)U/pte(t=2.244,P<0.05)。治疗组术后1周及30 d血红蛋白水平高于对照组,且治疗组术后30 d较入院时血红蛋白水平高。两组术后血栓事件、术后感染发生率及住院时间比较差异无统计学意义。结论:对于择期手术的老年股骨粗隆间骨折患者,术前应用r Hu EPO可降低围手术期输血率及平均输血量,但其长期安全性仍有待评价。
