脂质体转染促甲状腺激素受体基因构建Graves病模型 被引量：1

1

作者 龙文 邱李恒 +1 位作者 孟超 林岩松 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期550-555,共6页

目的比较以不同表达载体、目的基因及免疫程序,通过脂质体转染促甲状腺激素受体(TSHR)基因诱导小鼠Graves病的效率。方法通过脂质体注射转染人TSHR和TSHR A亚基基因免疫小鼠,表达载体分别为pCD-NA3.1(+)(pCDNA组)和pUBC,两组定期免疫并... 目的比较以不同表达载体、目的基因及免疫程序,通过脂质体转染促甲状腺激素受体(TSHR)基因诱导小鼠Graves病的效率。方法通过脂质体注射转染人TSHR和TSHR A亚基基因免疫小鼠,表达载体分别为pCD-NA3.1(+)(pCDNA组)和pUBC,两组定期免疫并监测小鼠体重及血TSHR抗体(TRAb)水平,实验结束后处死小鼠测定血甲状腺激素水平。结果 pUBC组体重及血清TRAb水平变化均不明显。pCDNA组体重增长明显慢于对照组(P<0.05),血TRAb水平亦呈明显上升趋势。TSHRA组体重增长明显慢于TSHR组(P<0.001),血TRAb相对浓度升高较快。pCDNA两实验处理组FT4明显升高(P=0.023),且与体重增长呈负相关,但FT3与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。pCDNA组体重和TRAb变化均在免疫后期较为突出。结论采用pCDNA3.1(+)载体和TSHRA亚基基因免疫并缩短免疫间隔有助于提高模型诱导率,FT4是监测模型甲状腺功能的合适指标。 展开更多

关键词 脂质体 促甲状腺激素受体基因 促甲状腺激素受体A亚基 GRAVES病 PCDNA3 1(+) pUBC

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促甲状腺激素受体基因甲基化与甲状腺乳头状癌关联的Meta分析 被引量：6

2

作者 张晨 霍倩 +2 位作者 李翠珍 周志俊 吴庆 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第28期3371-3375,共5页

目的应用Meta分析方法综合评价促甲状腺激素受体(TSHR)基因的甲基化与人甲状腺乳头状癌的关联,为预防和诊治甲状腺乳头状癌提供参考。方法检索纳入2000年1月—2013年4月发表的8篇有关TSHR基因甲基化和人甲状腺乳头状癌关系的中英文文献... 目的应用Meta分析方法综合评价促甲状腺激素受体(TSHR)基因的甲基化与人甲状腺乳头状癌的关联,为预防和诊治甲状腺乳头状癌提供参考。方法检索纳入2000年1月—2013年4月发表的8篇有关TSHR基因甲基化和人甲状腺乳头状癌关系的中英文文献,应用随机效应模型和固定效应模型对其进行综合的定量分析。结果来自8篇文献的583份样本被纳入Meta分析,甲状腺乳头状癌样本中TSHR基因发生甲基化数与对照组相比的合并OR值为4.57〔95%CI(1.68,12.43),P<0.01〕。分层分析(对照类型、国家、年龄、肿瘤分期、淋巴结转移)以及回归分析用于探索异质性的来源以及可能的危险因素,结果显示,在中国人群中和年龄小于45岁的甲状腺乳头状癌人群中〔OR=9.18,95%CI(5.19,16.23),P<0.01〕以及在非自体组织为对照的研究中〔OR=8.51,95%CI(3.72,19.46),P<0.01〕,TSHR基因的甲基化发生率均较高。TSHR基因甲基化在各期甲状腺癌中均可出现,TSHR基因甲基化发生率在肿瘤中晚期阶段〔OR=14.12,95%CI(2.93,68.18)〕高于早期〔OR=6.01,95%CI(3.21,11.28)〕,与淋巴结转移也存在关联〔OR=14.29,95%CI(2.47,82.75),P<0.01〕。本研究未观察到存在发表偏倚(t=-0.01,P>0.05),具有较好的代表性。结论 TSHR基因为甲状腺乳头状癌抑制基因,其甲基化的发生与甲状腺乳头状癌具有很强的相关性,可作为一个潜在的分子诊断标志物。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 促甲状腺激素受体 甲基化 META分析

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分化型甲状腺癌组织中促甲状腺激素受体的表达 被引量：7

3

作者 程维刚 殷德涛 +1 位作者 卢秀波 邱新光 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第4期626-627,共2页

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中促甲状腺激素受体(TSHR)的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SP法对43例DTC(39例乳头状癌,4例滤泡状癌)、30例甲状腺腺瘤及16例正常甲状腺组织进行TSHR的测定。结果:正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和DT... 目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中促甲状腺激素受体(TSHR)的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SP法对43例DTC(39例乳头状癌,4例滤泡状癌)、30例甲状腺腺瘤及16例正常甲状腺组织进行TSHR的测定。结果:正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和DTC组织TSHR均有不同程度表达,甲状腺腺瘤组织的表达与正常甲状腺组织相似,而DTC中有88.37%(38/43)的表达与正常组织相似,11.63%(5/43)的表达低于正常甲状腺组织。DTC组织中TSHR的表达与肿瘤病理分期、有无淋巴结转移、年龄有关(P<0.05);与性别、肿瘤大小、病灶多少无关(P>0.05)。结论:DTC可能为TSHR依赖性肿瘤,TSHR检测有助于提高DTC的诊疗水平。 展开更多

关键词 甲状腺癌 促甲状腺激素受体 乳头状癌 滤泡状癌

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促甲状腺激素受体抗体与Graves眼病糖皮质激素治疗敏感性的关系探讨 被引量：4

4

作者 刘克辉 刘青 +1 位作者 郭蔚莹 奚树刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期962-963,共2页

目的:探讨促甲状腺激素受体抗体(Thyrotropin receptor antibody,TRAb)与Graves眼病(Graves′s ophthalmopa-thy,GO)患者对糖皮质激素治疗敏感性的关系。方法:37例活动性Graves眼病患者给予口服泼尼松治疗,根据治疗后眼病缓解程度及是... 目的:探讨促甲状腺激素受体抗体(Thyrotropin receptor antibody,TRAb)与Graves眼病(Graves′s ophthalmopa-thy,GO)患者对糖皮质激素治疗敏感性的关系。方法:37例活动性Graves眼病患者给予口服泼尼松治疗,根据治疗后眼病缓解程度及是否仍具活动性评价对激素治疗的敏感性,将病人分为敏感组(S组)和不敏感组(NS组),观察血清TRAb阳性率和抗体水平的变化。结果:敏感组(n=28)治疗前血清TRAb阳性率为76·53%,平均水平为(12·54±5·62)U/L;治疗后TRAb阳性率为22·18%,平均水平为(7·82±4·91)U/L,较治疗前明显下降(P<0·05)。不敏感组(n=9)治疗前血清TRAb阳性率为67·24%,平均水平为(11·07±4·63)U/L,治疗后血清TRAb阳性率为59·74%,平均水平为(10·81±5·96)U/L,与治疗前比较无显著性差异。在治疗前,两组的血清TRAb水平无显著性差异;治疗后,不敏感组的血清TRAb水平明显高于敏感组(P<0·05)。结论:Graves眼病患者血清TRAb水平的变化与糖皮质激素治疗的敏感性密切相关,TRAb可作为评价糖皮质激素治疗效果的主要指标。 展开更多

关键词 GRAVES眼病 GRAVES病 促甲状腺激素受体抗体

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甲状腺乳头状癌中促甲状腺激素受体与钠碘转运体mRNA的表达 被引量：5

5

作者 马晔 刘柳 沈美萍 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第7期699-701,共3页

目的钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要载体,其表达、定位与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)关系密切。文中主要研究甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)及癌旁组织中TSH受体(... 目的钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要载体,其表达、定位与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)关系密切。文中主要研究甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)及癌旁组织中TSH受体(TSH receptor,TSHR)与NIS基因的表达。方法实时荧光定量PCR法测定36例PTC及癌旁组织,20例正常组织中TSHR mRNA及NIS mRNA的表达水平。结果 PTC及癌旁组织中TSHR mRNA表达水平明显低于正常组织,P<0.05;NIS mRNA表达水平在PTC组织中显著下降,P<0.05。结论 PTC组织中TSHR与NIS mRNA基因表达水平呈现同步下降趋势,可能与TSH-TSHR信号通路的调控有关。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌 钠碘转运体 促甲状腺激素受体

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促甲状腺激素受体在甲状腺相关眼病眼外肌原位表达的研究(英文) 被引量：3

6

作者 陈静 魏锐利 +1 位作者 何金 马晓晔 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期7-10,共4页

目的研究甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy, TAO)患者眼外肌组织中促甲状腺激素受体(Thy-rotropin receptor, TSHR)的表达,确定TSHR在TAO发病机制中的作用。方法收集手术治疗的12例严重的TAO患者的眼外肌组织标本及10... 目的研究甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy, TAO)患者眼外肌组织中促甲状腺激素受体(Thy-rotropin receptor, TSHR)的表达,确定TSHR在TAO发病机制中的作用。方法收集手术治疗的12例严重的TAO患者的眼外肌组织标本及10例健康人意外死亡1 h内取出的眼外肌组织标本,4%中性甲醛固定24 h,石蜡包埋组织,作连续切片,采用免疫组织化学链霉卵白素·过氧化物酶连接法对12例严重TAO患者及10例健康人的眼外肌石蜡组织切片进行光学显微镜观察。结果TSHR在眼外肌肌束膜、细胞膜及少量胞浆中表达,12例TAO患者中有10例检测出TSHR蛋白,阳性检出率为83.3%,正常对照组未检测出TSHR蛋白的表达。结论TSHR蛋白TAO患者眼外肌组织中有表达,而在正常个体中没有表达,证实TAO患者球后眼外肌组织中存在有活性的TSHR蛋白,提示TSHR可能作为交叉抗原在TAO发病机制中起重要作用。 展开更多

关键词 促甲状腺激素受体 甲状腺相关眼病 眼外肌 原位表达 免疫组织化学 发病机制

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促甲状腺激素受体的裂解和脱落 被引量：2

7

作者 葛勤敏 苏青 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期354-356,共3页

促甲状腺激素受体(TSHR)是一种重要的自身抗原,TSHR的裂解和脱落可诱发自身免疫。裂解的TSHR是甲状腺主要的功能性受体,α亚单位的脱落对于刺激型TSHR抗体(TSAb)的形成及TSAb和阻断型TSHR抗体(TBAb)之间的平衡有重要意义,对于TSHR胞外... 促甲状腺激素受体(TSHR)是一种重要的自身抗原,TSHR的裂解和脱落可诱发自身免疫。裂解的TSHR是甲状腺主要的功能性受体,α亚单位的脱落对于刺激型TSHR抗体(TSAb)的形成及TSAb和阻断型TSHR抗体(TBAb)之间的平衡有重要意义,对于TSHR胞外域裂解和脱落的相关研究不仅有助于深入理解TSHR的结构和功能,而且有助于阐明自身免疫性甲状腺疾病的发病机制及探寻新的治疗方法。该文就TSHR概况、受体裂解和脱落的机制及其意义作一综述。 展开更多

关键词 促甲状腺激素受体 裂解 脱落

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人促甲状腺激素受体A亚单位蛋白在昆虫细胞体系中的分泌性表达

8

作者 张萌 张恺宁 +5 位作者 陈子怡 王玲 伍丽萍 王悦 刘冰 施秉银 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期409-414,共6页

目的拟构建昆虫细胞分泌表达体系,在草地夜蛾卵巢细胞分泌性促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)A亚单位蛋白。方法将TSHR A亚单位蛋白(22-289)和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因连接到质粒... 目的拟构建昆虫细胞分泌表达体系,在草地夜蛾卵巢细胞分泌性促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)A亚单位蛋白。方法将TSHR A亚单位蛋白(22-289)和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因连接到质粒,并通过转化、蓝白斑筛选获得重组杆粒,将其转染入sf9昆虫细胞收获重组杆状病毒,扩增并测定滴度。最终通过蛋白印迹实验鉴定重组蛋白的表达并优化表达条件。结果在蛋白表达体系的构建过程中,PCR鉴定和测序均证实了重组质粒和重组杆粒序列的正确性。将重组杆粒转染入细胞后观察到病毒出芽迹象,空斑实验鉴定P1代病毒的滴度为2×10^(7) pfu/m。蛋白印迹显示重组蛋白分子质量为55 ku,主要在培养基中。蛋白表达的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1,最佳感染时程为72 h。结论本研究构建了TSHR A亚单位的昆虫细胞杆状病毒表达体系,该体系能够外泌性表达分子质量为55 ku左右的蛋白TSHR 22-289,且蛋白能够成功的糖基化修饰。该系统为其工业化平台的建设及生产提供前期基础,也针对日后TSHR蛋白的研究和Graves病的病因预防提供了有用的工具。 展开更多

关键词 人促甲状腺激素受体A亚单位 昆虫细胞体系 分泌型表达 SF9细胞 GRAVES病

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促甲状腺激素受体mRNA在甲状腺相关眼病球后组织中的表达

9

作者 潘叶 孙丰源 +1 位作者 宋国祥 畅继武 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2002年第5期414-415,共2页

目的　研究促甲状腺激素受体 (TSHR)在甲状腺相关眼病 (TAO)患者球后脂肪和结缔组织中的基因表达 ,确定TSHR在TAO发病机制中的作用。方法　经眼眶减压术获得TAO患者球后脂肪与结缔组织 ,提取总RNA ,经RT PCR产物电泳观察TSHRmRNA的表达... 目的　研究促甲状腺激素受体 (TSHR)在甲状腺相关眼病 (TAO)患者球后脂肪和结缔组织中的基因表达 ,确定TSHR在TAO发病机制中的作用。方法　经眼眶减压术获得TAO患者球后脂肪与结缔组织 ,提取总RNA ,经RT PCR产物电泳观察TSHRmRNA的表达。结果　TAO患者球后组织中TSHRmRNA阳性表达率为 91%,对照组的阳性表达率为 2 0 %,二者有统计学差异。结论　TSHRmRNA在TAO患者球后脂肪和结缔组织中高度表达 ,提示TSHR可能作为交叉抗原在TAO发病机制中起重要作用。 展开更多

关键词 甲状腺相关眼病 球后脂肪 结缔组织 基因表达 促甲状腺激素受体

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人促甲状腺激素受体基因真核表达质粒的构建

10

作者 康莉 黑砚 肖利华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第6期523-524,共2页

关键词 人促甲状腺激素受体 真核表达质粒 受体基因 自身免疫性甲状腺疾病 特异性自身免疫性疾病 receptor 甲状腺相关眼病 动物模型

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中国美利奴成母羊促甲状腺激素受体基因的克隆与组织表达 被引量：3

11

作者 赵赓 高磊 +3 位作者 沈敏 梁耀伟 杨井泉 何高明 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1718-1727,共10页

【目的】探讨绵羊TSHR基因序列及组织表达特征,为进一步研究TSHR在绵羊季节性繁殖中作用的分子机理奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术克隆绵羊TSHR基因,并对序列进行生物信息学分析;采用半定量RT-PCR技术检测TSHR在绵羊不同组织的表达... 【目的】探讨绵羊TSHR基因序列及组织表达特征,为进一步研究TSHR在绵羊季节性繁殖中作用的分子机理奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术克隆绵羊TSHR基因,并对序列进行生物信息学分析;采用半定量RT-PCR技术检测TSHR在绵羊不同组织的表达情况。【结果】以中国美利奴羊卵巢组织cDNA为模板,获得了3 276 bp的TSHR cDNA序列,包括全部编码区序列(Coding Sequence,CDS)长2 295 bp,编码764个氨基酸。TSHR蛋白结构经预测发现存在多个磷酸化位点和蛋白激酶C磷酸化位点。半定量RT-PCR结果显示,绵羊TSHR基因在所检测组织中均有表达,其中在下丘脑、松果体和垂体中呈高丰度表达,在甲状腺、子宫等组织呈中等丰度表达。【结论】从绵羊卵巢组织中克隆到TSHR基因并进行了序列分析;TSHR基因在绵羊各组织中广谱表达,但在下丘脑、松果体、垂体、甲状腺中表达水平较高,提示TSHR在绵羊季节性繁殖等重要生理活动的神经内分泌调节过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 绵羊 促甲状腺激素受体基因 克隆 组织表达

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黄颡鱼促甲状腺激素受体基因的克隆及其对饲料中添加碘化钾的表达反应 被引量：1

12

作者 王春玲 章宏塔 +1 位作者 高有领 钱国英 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期940-952,共13页

本试验旨在得到黄颡鱼促甲状腺激素受体（TSHR）基因的c DNA全长序列,同时掌握其组织表达差异,并揭示饲料中添加碘化钾对黄颡鱼甲状腺TSHR基因表达及生长性能的影响。采用c DNA末端快速扩增（RACE）技术克隆TSHR基因c DNA全长序列,再应... 本试验旨在得到黄颡鱼促甲状腺激素受体（TSHR）基因的c DNA全长序列,同时掌握其组织表达差异,并揭示饲料中添加碘化钾对黄颡鱼甲状腺TSHR基因表达及生长性能的影响。采用c DNA末端快速扩增（RACE）技术克隆TSHR基因c DNA全长序列,再应用荧光定量PCR技术检测TSHR基因的相对表达量,并制备了碘化钾添加量分别为0（对照）、10、50和100 mg/kg的4种试验饲料进行为期27 d的黄颡鱼养殖试验。结果显示：本试验成功克隆得到长度为2 786 bp的TSHR基因c DNA的全长序列,其中开放阅读框2 238 bp,编码745个氨基酸,Blast程序分析表明黄颡鱼TSHR氨基酸序列与其他已知鱼类的相似性为60%～87%。组织表达分析结果表明TSHR基因在甲状腺组织中的相对表达量较高,其次是肝脏、肌肉和肠道。养殖试验结果表明,100 mg/kg组甲状腺TSHR基因相对表达量显著高于其他各组（P〈0.05）,50和100 mg/kg组的增重、特定生长率和饲料系数显著优于对照组（P〈0.05）。由此得出,饲料中添加适量的碘化钾不仅影响TSHR基因的表达,还能有效促进黄颡鱼的生长。 展开更多

关键词 黄颡鱼 碘化钾 促甲状腺激素受体 基因克隆 基因表达

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人源性促甲状腺激素受体单链抗体Fc融合蛋白的制备及鉴定 被引量：3

13

作者 吴黎黎 贾健安 +1 位作者 邵璇璇 黄保军(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第14期1720-1723,共4页

目的:构建含有促甲状腺激素受体抗体(TRAb)单链抗体的重组载体pFastBacTM1-ScFv-IgG1Fc,通过Bac-to-Bac表达系统实现单链抗体融合蛋白的高效表达,并检测目的蛋白表达和免疫学活性。方法:TRAb抗体的重链可变区(HV)和轻链可变区(LV)的序列... 目的:构建含有促甲状腺激素受体抗体(TRAb)单链抗体的重组载体pFastBacTM1-ScFv-IgG1Fc,通过Bac-to-Bac表达系统实现单链抗体融合蛋白的高效表达,并检测目的蛋白表达和免疫学活性。方法:TRAb抗体的重链可变区(HV)和轻链可变区(LV)的序列以linker(G4S)连接,构建ScFv;Genbank检索人IgG1Fc序列,SnapGene软件分析上述序列和载体pFastBacTM1,以基因合成方式构建重组质粒pFastBacTM1-ScFv-IgG1Fc;pFastBacTM1-ScFv-IgG1Fc转化感受态大肠杆菌DH10Bac生成重组杆粒,pUC/M13正向和反向引物进行PCR分析确认目的基因的序列;重组杆粒采用Cellfectin®Ⅱ试剂转染昆虫细胞Sf9生成P1病毒储液,继续感染Sf9生成高滴度的P2和P3病毒储液;P3病毒储液感染High FiveTM细胞,收集上清通过SPA-Sepharose CL-4B亲和层析纯化获得较纯的单链抗体融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的蛋白;化学发光和免疫组化检测目的蛋白抗原结合力。结果:PCR扩增得到约3747 bp的基因序列,重组杆粒中目的基因正确插入;目的蛋白位于55 kDa附近且无杂带,纯度较高;目的蛋白浓度为248 U/L,单链抗体融合蛋白的结合力较好。结论:Bac-to-Bac表达系统成功构建并表达了TRAb单链抗体融合蛋白,抗原亲和力良好。 展开更多

关键词 促甲状腺激素受体抗体 单链抗体 昆虫细胞 重组质粒 重组杆粒

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外周血促甲状腺激素受体mRNA水平在甲状腺癌早期诊断中的意义

14

作者 姜丽红 彭大颖 +1 位作者 潘茜 姜丽萍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期408-408,共1页

1临床资料 1．1一般资料选择2009-2011年本院甲状腺肿瘤手术患者126例（良性病变70例、分化型甲状腺癌56例）和非甲状腺疾病手术患者60例，上述患者诊断均经手术病理证实。手术前1d抽取患者静脉血5mL，使用聚蔗糖-泛影葡胺分层液密度... 1临床资料 1．1一般资料选择2009-2011年本院甲状腺肿瘤手术患者126例（良性病变70例、分化型甲状腺癌56例）和非甲状腺疾病手术患者60例，上述患者诊断均经手术病理证实。手术前1d抽取患者静脉血5mL，使用聚蔗糖-泛影葡胺分层液密度梯度离心法分离血浆， 展开更多

关键词 分化型甲状腺癌 促甲状腺激素受体 早期诊断 MRNA水平 外周血 甲状腺疾病手术 密度梯度离心法 肿瘤手术

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胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用 被引量：9

15

作者 代佳灵 何为民 罗梦绮 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期805-810,共6页

背景甲状腺相关眼病（TAO）是一种自身免疫性疾病，目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1（IGF．1）功能的发挥需要IGF-1受体（IGF-1R）的参与，IGF-1在促甲状腺激素受体（TSHR）的信号传导通路中也起着重... 背景甲状腺相关眼病（TAO）是一种自身免疫性疾病，目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1（IGF．1）功能的发挥需要IGF-1受体（IGF-1R）的参与，IGF-1在促甲状腺激素受体（TSHR）的信号传导通路中也起着重要作用。目的探讨IGF-1对TAO患者眼眶成纤维细胞（OFs）增生及IGF-1R、TSHR表达的影响，探讨IGF-1在TAO发病机制中的作用。方法收集2016年3-6月于四川大学华西医院行TAO眼眶脂肪切除术取得的眶组织标本17例17份及正常人美容手术取得的眼眶组织4人4份，采用含体积分数5％胎牛血清的DMEM／F12培养液培养OFs。分别于培养液中加入不同质量浓度（O、50、100、125μg／L）的IGF-1，采用MTS比色法绘制OFs生长曲线，评估IGF-1对TAO和正常来源OFs增生的影响；采用流式细胞术测定不同质量浓度IGF-1对TAO和正常来源OFs中IGF-1R、TSHR表达水平的影响。结果TAO患者与正常人来源的OFs均生长良好，呈梭形，细胞质丰富，TAO患者与正常人来源的OFs形态学特点一致。培养的OFs波形蛋白呈阳性反应，结蛋白、S-100、肌红蛋白和角蛋白均呈阴性反应。不同质量浓度IGF-1作用后TAO组和正常组OFs增生均呈逐渐上升趋势，总体比较差异有统计学意义（F分组=219．639，P〈0．001；F质量浓度=17．752，P〈0．001），以100μg／LIGF-1的促进作用最强。0、50、100、125μg／LIGF-1作用后TAO组OFs中IGF-1R表达量分别为（0．0091±0．0087）％、（0．0953±0．0233）％、（0．0837±0．0227）％和（0．0709±0．0241）％，正常组OFs中IGF-1R表达量分别为（0．0023±0．0006）％、（0．0093±0．0012）％、（0．0073±0．0015）％和（0．0083±0．0012）％，其中50、100和125μg／LIGF-1作用后各组OFs中IGF-1R表达量均高于无添加IGF-1者，TAO组OFs细胞中IGF-1R的表达量均明显高于正常组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；0、50、100和125μg／LIGF-1作用后TAO组和正常组OFs中TSHR表达量的总体比较差异均无统计学意义（F分组=0．133，P〉0．05；F质量浓度=0．004，P〉0．05）。结论IGF-1对TAO患者和正常人OFs的生长均有促进作用并能上调OFs中IGF-1R的表达，但其对OFs中TSHR的表达变化无明显影响。 展开更多

关键词 甲状腺相关眼病 眼眶成纤维细胞/代谢 胰岛素样生长因子-1/代谢 胰岛素样生长因子-1受体/代谢 促甲状腺激素受体/代谢 细胞增生/药物作用 细胞培养

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转染中国仓鼠卵巢细胞人TSH受体的功能评价 被引量：1

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作者 周亚芹 张洪梅 +2 位作者 李晓永 董艳 苏青 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1224-1227,共4页

目的研究转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞人促甲状腺激素(hTSH)受体(hTSHR)的功能。方法抽提已转染hTSHR的CHO细胞基因组DNA,PCR扩增目的条带,并对产物进行序列测定。采用受体的放射配体结合分析法,以固定量125I的牛促甲状腺激素(125I-bTSH)... 目的研究转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞人促甲状腺激素(hTSH)受体(hTSHR)的功能。方法抽提已转染hTSHR的CHO细胞基因组DNA,PCR扩增目的条带,并对产物进行序列测定。采用受体的放射配体结合分析法,以固定量125I的牛促甲状腺激素(125I-bTSH)和浓度递增的未标记bTSH与hTSHR发生竞争结合反应分析受体的基本功能;通过TSH刺激试验测定细胞环磷酸腺苷(cAMP)含量,评价hTSHR的生物学活性。结果PCR扩增片段长度与预期相符,且序列完全正确。竞争结合反应表明,随着bTSH浓度的递增,125I-bTSH与hTSHR的结合量逐渐下降;TSH刺激试验显示,随着bTSH浓度的递增,细胞cAMP含量亦逐渐升高,当bTSH浓度为10 mIU/mL时,cAMP水平达到峰值。结论cDNA序列整合在CHO细胞基因组内并在细胞膜上表达的hTSHR,具有受体的基本功能特性和良好的生物学活性。该实验为自身免疫性甲状腺疾病患者血清甲状腺刺激性抗体(TSAb)和阻断性抗体(TSBAb)的检测奠定了基础。 展开更多

关键词 中国仓鼠卵巢细胞 促甲状腺激素受体 促甲状腺激素受体抗体 环磷酸腺苷

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乳头状甲状腺癌TSHR基因转录表达和启动子区甲基化研究 被引量：12

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作者 戴亚丽 蔡德鸿 +2 位作者 陈宏 张桦 李静 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期114-117,共4页

目的观察抑癌基因促甲状腺激素受体(TSHR)在乳头状甲状腺癌(PTC组)中的表达,分析其启动子甲基化与肿瘤发生的关系。方法选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤(对照组,包括20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)患者,对两组患者手术获取的标本... 目的观察抑癌基因促甲状腺激素受体(TSHR)在乳头状甲状腺癌(PTC组)中的表达,分析其启动子甲基化与肿瘤发生的关系。方法选择50例PTC和32例良性甲状腺肿瘤(对照组,包括20例结节性甲状腺肿,12例甲状腺腺瘤)患者,对两组患者手术获取的标本提取RNA后,反转录为cDNA,进行PCR检测TSHR基因的表达情况;运用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述组织中TSHR基因启动子区甲基化的情况。结果PTC组患者中有34例(68%)TSHR基因启动子发生甲基化,16例(32%)TSHR基因mRNA表达缺失;对照组患者中有7例(21.9%)TSHR基因启动子发生甲基化,4例(12.5%)TSHR基因mRNA表达缺失。PTC组织TSHR基因启动子甲基化率及TSHR基因mRNA表达缺失率均显著高于对照组(χ2值分别为16.61和4.02,P<0.05)。34例发生了TSHR基因启动子甲基化的PTC患者中,有14例(41.2%)TSHR mRNA表达缺失;16例未发生甲基化的PTC患者中,2例(12.5%)发生了mRNA表达缺失,二者mRNA表达缺失率差异有统计学意义(χ2=4.11,P<0.05)。TSHR基因mRNA在乳头状甲状腺癌中的表达明显低于对照组织(t=3.86,P<0.05)。结论PTC患者TSHR基因启动子甲基化发生率显著高于良性甲状腺肿瘤患者,而TSHR基因mRNA的表达则较良性甲状腺肿瘤降低;推测TSHR基因启动子甲基化可能与PTC的发生、发展相关。 展开更多

关键词 乳头状甲状腺癌 甲基化 促甲状腺激素受体 启动子

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甲状腺乳头状癌中TSHR、NIS基因甲基化和蛋白表达及其与BRAF突变的关系 被引量：7

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作者 史晓光 成建新 +1 位作者 关海霞 滕卫平 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期401-404,共4页

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中促甲状腺激素受体(TSHR)和钠/碘协同转运体(NIS)蛋白表达与相应基因的甲基化及T1799A BRAF基因突变的关系。方法应用直接测序法检测60例PTC和20例癌旁正常甲状腺组织中T1799A BRAF突变;甲基化特异性PCR(M... 目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中促甲状腺激素受体(TSHR)和钠/碘协同转运体(NIS)蛋白表达与相应基因的甲基化及T1799A BRAF基因突变的关系。方法应用直接测序法检测60例PTC和20例癌旁正常甲状腺组织中T1799A BRAF突变;甲基化特异性PCR(MSP)检测上述标本中的TSHR和NIS的基因甲基化;免疫组化法检测蛋白表达。结果60例PTC标本中,BRAF突变率为65%(n=39),TSHR和NIS基因甲基化的发生率分别为43%(n=26)和27%(n=16),突变和甲基化与临床病理特征未见显著关联。TSHR蛋白表达阳性评分在TSHR甲基化阳性组和阴性组中分别为1.3±0.5和1.7±0.7(P=0.009),NIS蛋白表达阳性评分在NIS甲基化阳性组和阴性组中分别为1.1±0.5和1.5±0.6(P=0.019)。BRAF突变的PTC病例中,TSHR和NIS蛋白表达阳性评分显著低于野生组(TSHR,1.4±0.5 vs 1.8±0.8,P=0.031;NIS,1.3±0.6 vs 1.7±0.6,P=0.009),TSHR和NIS基因甲基化发生率显著高于野生组(TSHR,54%vs 36%,P=0.049;NIS,24%vs 10%,P=0.034)。结论PTC中相应基因的甲基化和BRAF突变可能是TSHR和NIS蛋白表达减弱并分布异常的原因。 展开更多

关键词 促甲状腺激素受体 钠/碘协同转运体 BRAF突变 甲基化 甲状腺癌

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TRAb增高的原发性甲状腺功能减退症患者心肌酶谱水平的变化 被引量：7

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作者 张红 吕述军 +3 位作者 高鹏霞 刘影 胡长军 陆卫平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期1564-1566,共3页

目的:研究促甲状腺激素受体抗体(TRAb)升高的原发性甲状腺功能减退症(甲减)患者心肌酶谱水平变化。方法:初诊的原发性甲减患者40例分两组,TRAb升高者20例(TRAb升高组),TRAb水平正常者20例(TRAb正常组),检测患者空腹时肌酸激酶(CK)及其... 目的:研究促甲状腺激素受体抗体(TRAb)升高的原发性甲状腺功能减退症(甲减)患者心肌酶谱水平变化。方法:初诊的原发性甲减患者40例分两组,TRAb升高者20例(TRAb升高组),TRAb水平正常者20例(TRAb正常组),检测患者空腹时肌酸激酶(CK)及其同工酶CKMB、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等水平。结果:与TRAb正常组相比,TRAb升高组患者CK、CKMB、LDH、TC水平均明显升高(P<0.05)。TG水平在两组间无明显差异;TRAb与各心肌酶水平呈正相关(P<0.05);TRAb水平与各心肌酶谱间有直线回归关系,CK、CKMB影响TRAb水平(P<0.05),TRAb决定着LDH的变化(P<0.01)。结论:TRAb升高的原发性甲减患者血清心肌酶谱水平明显升高,二者相互影响加重病情。 展开更多

关键词 甲状腺功能减退症 原发性 促甲状腺激素受体抗体 心肌酶谱

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检测血清TRAb水平在甲状腺疾病诊治中的价值 被引量：3

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作者 段东 倪济苍 +2 位作者 罗加 邓红 陶林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期342-344,共3页

目的 :探讨检测血清TRAb水平在甲状腺疾病诊治中的价值。方法 :分别检测 30 8例甲状腺疾病患者及正常对照组的血清TRAb水平 (采用RRA方法 )、FT3 ,FT4水平及TGAb、TPOAb滴度 (采用RIA方法 )。结果 :血清TRAb水平及阳性率 :Graves’病发... 目的 :探讨检测血清TRAb水平在甲状腺疾病诊治中的价值。方法 :分别检测 30 8例甲状腺疾病患者及正常对照组的血清TRAb水平 (采用RRA方法 )、FT3 ,FT4水平及TGAb、TPOAb滴度 (采用RIA方法 )。结果 :血清TRAb水平及阳性率 :Graves’病发作组、缓解组及桥本氏病组均明显高于正常对照组 ;Graves’病发作组明显高于缓解组。Graves’病组TRAb水平与血清FT3、FT4水平及桥本氏病组TRAb水平与TGAb、TPOAb滴度间均无相关性。结论 :对血清TRAb水平的检测在自身免疫性甲状腺疾病 ,特别是Graves’病的诊断、治疗中具有重要价值。但其水平的高低却不能反映Graves’病的病情轻重 ,同时它也是不同于TGAb。 展开更多

关键词 甲状腺疾病 促甲状腺激素受体抗体(TRAb) 诊断 治疗

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