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向日葵黑茎病菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立
被引量：
4
1
作者
邝瑞瑞
雷荣
+6 位作者
江丽
段维军
李雪莲
符娜
范在丰
李远
吴品珊
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期69-76,89,共9页
向日葵黑茎病菌是向日葵上的一种毁灭性真菌,是我国的植物检疫性有害生物。为了准确快速检测向日葵黑茎病菌,本研究根据向日葵黑茎病菌及其近似种的ITS序列差异,设计特异性RPA引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立了RPA等温扩增技术结合CRISP...
向日葵黑茎病菌是向日葵上的一种毁灭性真菌,是我国的植物检疫性有害生物。为了准确快速检测向日葵黑茎病菌,本研究根据向日葵黑茎病菌及其近似种的ITS序列差异,设计特异性RPA引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立了RPA等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a检测的快速检测方法。通过条件优化,RPA/CRISPR-Cas12a检测体系在37℃恒温条件下,RPA反应30 min,CRISPR/Cas12a反应20 min,即可特异性检测向日葵黑茎病菌。荧光法检测灵敏度与实时荧光PCR的灵敏度相当,最低检测量为0.1 pg,试纸条法检测最低检测量为1 pg。由于试纸条检测结果可用肉眼观察,快速便携,操作简单,更适合用于田间和口岸的向日葵黑茎病菌快速早期检测;而荧光检测灵敏度高,对环境要求高,更适合用于实验室检测。
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关键词
向日葵黑茎病菌
RPA
CRISPR-Cas12a
荧光检测
侧向流层析试纸条
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职称材料
题名
向日葵黑茎病菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立
被引量：
4
1
作者
邝瑞瑞
雷荣
江丽
段维军
李雪莲
符娜
范在丰
李远
吴品珊
机构
中国检验检疫科学研究院
中国农业大学植物保护学院
重庆医科大学永川附属医院
宁波检验检疫科学技术研究院
伊犁师范大学
出处
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期69-76,89,共9页
基金
国家重点研发计划(2021YFC2600400,2021YFC2600402)
中国检验检疫科学研究院基本科研业务费(2020JK048)。
文摘
向日葵黑茎病菌是向日葵上的一种毁灭性真菌,是我国的植物检疫性有害生物。为了准确快速检测向日葵黑茎病菌,本研究根据向日葵黑茎病菌及其近似种的ITS序列差异,设计特异性RPA引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立了RPA等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a检测的快速检测方法。通过条件优化,RPA/CRISPR-Cas12a检测体系在37℃恒温条件下,RPA反应30 min,CRISPR/Cas12a反应20 min,即可特异性检测向日葵黑茎病菌。荧光法检测灵敏度与实时荧光PCR的灵敏度相当,最低检测量为0.1 pg,试纸条法检测最低检测量为1 pg。由于试纸条检测结果可用肉眼观察,快速便携,操作简单,更适合用于田间和口岸的向日葵黑茎病菌快速早期检测;而荧光检测灵敏度高,对环境要求高,更适合用于实验室检测。
关键词
向日葵黑茎病菌
RPA
CRISPR-Cas12a
荧光检测
侧向流层析试纸条
Keywords
Leptosphaeria lindquistii
RPA
CRISPR-Cas12a
fluorescent detection
lateral flow strip
分类号
S435.655 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
向日葵黑茎病菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立
邝瑞瑞
雷荣
江丽
段维军
李雪莲
符娜
范在丰
李远
吴品珊
《植物保护》
CAS
CSCD
北大核心
2022
4
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